中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
英文缩略语 | 第6-9页 |
第一章 绪论 | 第9-22页 |
1 细胞周期与癌变 | 第9-13页 |
1.1 细胞周期 | 第9页 |
1.2 细胞周期素 | 第9-11页 |
1.3 细胞周期素依赖性激酶 | 第11页 |
1.4 细胞周期素依赖性激酶抑制因子 | 第11-12页 |
1.5 细胞周期与癌变 | 第12-13页 |
2 原癌基因 c-myc | 第13-18页 |
2.1 c-Myc 的结构 | 第13-14页 |
2.2 c-Myc 与细胞增殖 | 第14-15页 |
2.3 c-Myc 与细胞凋亡 | 第15页 |
2.4 c-myc 癌基因的转录激活功能 | 第15-16页 |
2.5 c-Myc 的转录抑制功能 | 第16页 |
2.6 c-myc 的激活与肿瘤 | 第16-18页 |
3 RNAi技术 | 第18-21页 |
3.1 RNAi介绍 | 第18页 |
3.2 RNAi研究进展 | 第18-19页 |
3.3 RNAi的应用 | 第19-20页 |
3.4 RNAi应用于c-myc基因的研究 | 第20页 |
3.5 RNAi应用于A549细胞的研究 | 第20-21页 |
4 研究目的与意义 | 第21-22页 |
第二章 材料与方法 | 第22-37页 |
1 材料 | 第22-29页 |
1.1 质粒及其宿主菌 | 第22页 |
1.2 细胞 | 第22页 |
1.3 主要试剂 | 第22-24页 |
1.4 溶液配制 | 第24-28页 |
1.5 主要仪器设备 | 第28-29页 |
2 方法 | 第29-37页 |
2.1 质粒DNA制备 | 第29-31页 |
2.2 细胞准备 | 第31页 |
2.3 脂质体介导质粒DNA转染细胞 | 第31页 |
2.4 流式分析细胞处理 | 第31-32页 |
2.5 RT-PCR | 第32-34页 |
2.6 SDS-PAGE与免疫印迹 | 第34-37页 |
第三章 结果与分析 | 第37-46页 |
1 质粒pSilencer-c-myc DNA 鉴定结果 | 第37页 |
1.1 完整性 | 第37页 |
1.2 纯度 | 第37页 |
1.3 酶切鉴定 | 第37页 |
2 RNAi对c-myc基因表达的影响 | 第37-40页 |
2.1 c-myc mRNA水平变化 | 第38-39页 |
2.2 c-myc蛋白水平变化 | 第39-40页 |
3 RNAi对细胞周期的影响 | 第40-41页 |
4 RNAi对细胞周期相关基因mRNA水平的影响 | 第41-44页 |
4.1 cyclin mRNA水平 | 第41-42页 |
4.2 CDK mRNA水平 | 第42-43页 |
4.3 p21及p27 mRNA水平 | 第43-44页 |
5 RNAi对细胞周期相关基因蛋白水平的影响 | 第44-46页 |
5.1 细胞周期素蛋白水平 | 第44-45页 |
5.2 细胞周期素依赖激酶蛋白水平及变化 | 第45-46页 |
第四章 讨论 | 第46-50页 |
1 RNAi对c-myc基因表达的影响 | 第46页 |
2 c-myc RNAi对细胞周期的影响 | 第46页 |
3 RNAi对cyclin表达水平的影响 | 第46-47页 |
4 RNAi对CDK表达水平的影响 | 第47-48页 |
5 RNAi对p21及p27mRNA水平的影响 | 第48页 |
6 小结 | 第48-50页 |
第五章 结论与建议 | 第50-51页 |
1 结论 | 第50页 |
2 建议 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-56页 |
致谢 | 第56页 |