中文摘要 | 第1-3页 |
英文摘要 | 第3-7页 |
第一章 前言 | 第7-17页 |
·细菌四碳二羧酸转运机理研究进展 | 第7-11页 |
·概述 | 第7页 |
·细菌的四碳二羧酸的转运载体 | 第7-11页 |
·四碳二羧酸转运家族 | 第8-10页 |
·DctA载体 | 第10-11页 |
·DctA相关基因的遗传学和调控 | 第11页 |
·根瘤菌中的四碳二羧酸转运系统 | 第11-14页 |
·概述 | 第11-12页 |
·共生与非共生状态下的根瘤菌对四碳二羧酸的利用 | 第12页 |
·Dct调控系统 | 第12-14页 |
·Dct系统的结构 | 第12-13页 |
·DctA的结构 | 第13页 |
·DctB和DctD双组份调控系统 | 第13-14页 |
·DctA和DctB识别底物的机制 | 第14页 |
·植物病原细菌Xcc的四碳二羧酸转运系统 | 第14-16页 |
·野油菜黄单胞菌野油菜致病变种 | 第14-15页 |
·Xcc 8004中通过基因组注释发现的四碳二羧酸转运系统相关基因 | 第15-16页 |
·本研究工作的目的、内容及意义 | 第16-17页 |
·目的和内容 | 第16页 |
·意义 | 第16-17页 |
第二章 材料与方法 | 第17-34页 |
·材料 | 第17-20页 |
·菌株和质粒 | 第17-18页 |
·抗生素和其它药剂 | 第18页 |
·培养基 | 第18-19页 |
·溶液与缓冲液 | 第19-20页 |
·试材 | 第20页 |
·方法 | 第20-34页 |
·菌株培养条件及保存 | 第20-21页 |
·三亲本接合 | 第21页 |
·两亲本接合 | 第21-22页 |
·PCR反应 | 第22-24页 |
·引物设计 | 第22-23页 |
·模板制备 | 第23页 |
·反应体系 | 第23页 |
·反应条件 | 第23页 |
·PCR扩增产物检测 | 第23-24页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第24页 |
·总DNA的提取 | 第24页 |
·DNA的纯化和DNA的沉淀 | 第24-25页 |
·限制性内切酶酶切 | 第25页 |
·DNA片段的回收 | 第25-26页 |
·试剂盒回收 | 第25页 |
·透析法回收DNA片段 | 第25-26页 |
·DNA连接 | 第26-27页 |
·感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
·电脉冲感受态细胞的制备 | 第27页 |
·CaCl2法感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
·转化 | 第28页 |
·电脉冲转化 | 第28页 |
·CaCl2法化学转化 | 第28页 |
·质粒的提取 | 第28-30页 |
·快速碱裂解法少量提取质粒DNA | 第28-29页 |
·质粒DNA的大量提取 | 第29-30页 |
·植株的致病性试验 | 第30-31页 |
·生长曲线的测定 | 第31页 |
·被测菌在叶片中的生长状况 | 第31页 |
·胞外多糖的检测 | 第31-32页 |
·胞外多糖的平板检测 | 第31-32页 |
·胞外多糖的摇瓶发酵检测 | 第32页 |
·胞外酶的检测 | 第32-33页 |
·胞外蛋白酶的检测 | 第32页 |
·胞外淀粉酶的检测 | 第32页 |
·胞外纤维素酶的检测 | 第32-33页 |
·突变体碳源利用的检测 | 第33-34页 |
·平板法 | 第33页 |
·生长曲线检测法 | 第33-34页 |
第三章 结果与分析 | 第34-45页 |
·用生物信息学方法分析Xcc 8004中Dct系统的基因 | 第34-37页 |
·dctA突变体 | 第37-38页 |
·dctA非极性突变体的碳源利用检测 | 第38-39页 |
·平板检测法 | 第38页 |
·生长曲线检测法: | 第38-39页 |
·突变体菌株致病力与野生型没有显著差异 | 第39-40页 |
·dctA基因的生化因子鉴定 | 第40-41页 |
·摇瓶发酵检测胞外多糖 | 第40-41页 |
·胞外酶和胞外多糖的平板检测 | 第41页 |
·非极性突变体的功能互补 | 第41-43页 |
·互菌株补的碳源利用检测 | 第43页 |
·平板检测法 | 第43页 |
·生长曲线检测法: | 第43页 |
·互补菌株致病力的统计学分析致病生化因子检测 | 第43-45页 |
·互补菌株致性的分析 | 第43-44页 |
·检测致病生化因子 | 第44-45页 |
第四章 讨论 | 第45-47页 |
·Xcc中四碳二羧酸转运系统分析 | 第45-46页 |
·dctA基因编码产物的功能预测 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-49页 |
致谢 | 第49页 |