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野油菜黄单胞菌野油菜致病变种基因组中dctA基因的功能鉴定

中文摘要第1-3页
英文摘要第3-7页
第一章 前言第7-17页
   ·细菌四碳二羧酸转运机理研究进展第7-11页
     ·概述第7页
     ·细菌的四碳二羧酸的转运载体第7-11页
       ·四碳二羧酸转运家族第8-10页
       ·DctA载体第10-11页
       ·DctA相关基因的遗传学和调控第11页
   ·根瘤菌中的四碳二羧酸转运系统第11-14页
     ·概述第11-12页
     ·共生与非共生状态下的根瘤菌对四碳二羧酸的利用第12页
     ·Dct调控系统第12-14页
       ·Dct系统的结构第12-13页
       ·DctA的结构第13页
       ·DctB和DctD双组份调控系统第13-14页
       ·DctA和DctB识别底物的机制第14页
   ·植物病原细菌Xcc的四碳二羧酸转运系统第14-16页
     ·野油菜黄单胞菌野油菜致病变种第14-15页
     ·Xcc 8004中通过基因组注释发现的四碳二羧酸转运系统相关基因第15-16页
   ·本研究工作的目的、内容及意义第16-17页
     ·目的和内容第16页
     ·意义第16-17页
第二章 材料与方法第17-34页
   ·材料第17-20页
     ·菌株和质粒第17-18页
     ·抗生素和其它药剂第18页
     ·培养基第18-19页
     ·溶液与缓冲液第19-20页
     ·试材第20页
   ·方法第20-34页
     ·菌株培养条件及保存第20-21页
     ·三亲本接合第21页
     ·两亲本接合第21-22页
     ·PCR反应第22-24页
       ·引物设计第22-23页
       ·模板制备第23页
       ·反应体系第23页
       ·反应条件第23页
       ·PCR扩增产物检测第23-24页
     ·琼脂糖凝胶电泳第24页
     ·总DNA的提取第24页
     ·DNA的纯化和DNA的沉淀第24-25页
     ·限制性内切酶酶切第25页
     ·DNA片段的回收第25-26页
       ·试剂盒回收第25页
       ·透析法回收DNA片段第25-26页
     ·DNA连接第26-27页
     ·感受态细胞的制备第27-28页
       ·电脉冲感受态细胞的制备第27页
       ·CaCl2法感受态细胞的制备第27-28页
     ·转化第28页
       ·电脉冲转化第28页
       ·CaCl2法化学转化第28页
     ·质粒的提取第28-30页
       ·快速碱裂解法少量提取质粒DNA第28-29页
       ·质粒DNA的大量提取第29-30页
     ·植株的致病性试验第30-31页
     ·生长曲线的测定第31页
     ·被测菌在叶片中的生长状况第31页
     ·胞外多糖的检测第31-32页
       ·胞外多糖的平板检测第31-32页
       ·胞外多糖的摇瓶发酵检测第32页
     ·胞外酶的检测第32-33页
       ·胞外蛋白酶的检测第32页
       ·胞外淀粉酶的检测第32页
       ·胞外纤维素酶的检测第32-33页
     ·突变体碳源利用的检测第33-34页
       ·平板法第33页
       ·生长曲线检测法第33-34页
第三章 结果与分析第34-45页
   ·用生物信息学方法分析Xcc 8004中Dct系统的基因第34-37页
   ·dctA突变体第37-38页
   ·dctA非极性突变体的碳源利用检测第38-39页
     ·平板检测法第38页
     ·生长曲线检测法:第38-39页
   ·突变体菌株致病力与野生型没有显著差异第39-40页
   ·dctA基因的生化因子鉴定第40-41页
     ·摇瓶发酵检测胞外多糖第40-41页
     ·胞外酶和胞外多糖的平板检测第41页
   ·非极性突变体的功能互补第41-43页
   ·互菌株补的碳源利用检测第43页
     ·平板检测法第43页
     ·生长曲线检测法:第43页
   ·互补菌株致病力的统计学分析致病生化因子检测第43-45页
     ·互补菌株致性的分析第43-44页
     ·检测致病生化因子第44-45页
第四章 讨论第45-47页
   ·Xcc中四碳二羧酸转运系统分析第45-46页
   ·dctA基因编码产物的功能预测第46-47页
参考文献第47-49页
致谢第49页

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