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亚洲玉米螟中肠Bt毒素结合位点及V-ATPase A亚基基因与抗性的关系研究

摘要第1-7页
Abstract第7-11页
第一章 引言第11-29页
   ·转 Bt 玉米种植及研发现状第11-21页
   ·转 Bt 基因作物所面临的问题第21-22页
   ·Bt 毒素及作用机理第22-24页
   ·昆虫对 Bt 产生抗性的分子机理第24-26页
     ·昆虫对 Bt 毒素产生抗性的定义第24-25页
     ·昆虫抗 Bt 毒素的分子机理第25页
     ·昆虫中肠 Bt 毒素受体研究第25-26页
   ·抗性治理策略 IRM第26-27页
   ·本研究目的及意义第27-29页
第二章 亚洲玉米螟中肠 Cry1 类毒素受体蛋白研究第29-38页
   ·材料与方法第30-34页
     ·供试昆虫第30页
     ·主要仪器及试剂第30页
     ·透析袋的预处理第30页
     ·亚洲玉米螟中肠 BBMV 的提取第30-31页
     ·BBMV 浓度的测定第31页
     ·Bt 蛋白的标记第31页
     ·WesternBlot 检测标记蛋白第31-32页
     ·Bt 蛋白标记效率测定第32页
     ·免疫性磁珠预处理第32页
     ·免疫性磁珠、Bt 毒素与受体蛋白的结合第32-33页
     ·受体蛋白凝胶分离及银染检测第33-34页
   ·结果及分析第34-35页
     ·Bt 蛋白标记检测第34页
     ·Bt 毒素的生物素标记效率第34-35页
     ·受体蛋白 SDS-PAGE 凝胶分离图谱第35页
   ·讨论第35-38页
第三章 亚洲玉米螟不同品系 V-ATPase A 亚基基因的克隆及表达量测定第38-56页
   ·材料和方法第39-43页
     ·供试昆虫第39页
     ·供试 Bt 蛋白第39页
     ·主要仪器及试剂第39页
     ·引物设计及合成第39-40页
     ·亚洲玉米螟中肠总 RNA 提取及 cDNA 合成第40-41页
     ·亚洲玉米螟 V-ATPase subunit A 基因的克隆第41-42页
       ·中间片段 PCR 扩增第41页
       ·两端 RACE 扩增第41页
       ·亚洲玉米螟 V-ATPase subunit A mRNA 全长扩增第41-42页
     ·qPCR 测定不同品系亚洲玉米螟 V-ATPase subunit A 表达量第42页
     ·相对定量计算方法第42页
     ·应用软件第42-43页
   ·结果及分析第43-54页
     ·亚洲玉米螟 V-ATPase subunit A 基因序列特征第43-46页
     ·抗感品系核苷酸序列差异分析第46-48页
     ·亚洲玉米螟 V-ATPase subunit A 蛋白同源建模第48-49页
     ·qPCR 扩增验证第49-51页
     ·qPCR 定量的阈值循环数第51-52页
     ·亚洲玉米螟 V-ATPase subunit A 基因相对定量结果第52-54页
   ·讨论第54-56页
第四章 全文结论第56-57页
参考文献第57-68页
致谢第68-69页
作者简历第69页

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