| 英文缩略词表 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-12页 |
| 英文摘要 | 第12-16页 |
| 前言 | 第16-18页 |
| 第一部分 重组人FGF-20蛋白的原核表达和抗血清制备摘要 | 第18-32页 |
| 1 实验材料 | 第19-20页 |
| 1.1 主要化学药品、生物试剂 | 第19页 |
| 1.2 载体、菌株和细胞株 | 第19页 |
| 1.3 动物 | 第19页 |
| 1.4 主要溶液的配制 | 第19-20页 |
| 1.5 主要实验仪器 | 第20页 |
| 2 实验方法 | 第20-24页 |
| 2.1 人类FGF-20 cDNA的克隆 | 第20-21页 |
| 2.2 rhFGF-20原核表达系统的构建 | 第21页 |
| 2.3 rhFGF-20蛋白原核表达条件的优化 | 第21页 |
| 2.4 rhFGF-20蛋白的表达与纯化 | 第21-23页 |
| 2.4.1 重组大肠杆菌(DE3)的大量培养 | 第21-22页 |
| 2.4.2 细菌裂解 | 第22页 |
| 2.4.3 包涵体提取 | 第22页 |
| 2.4.4 包涵体溶解 | 第22页 |
| 2.4.5 NTA-Ni~(2+)-琼脂糖层析纯化rhFGF-20蛋白 | 第22-23页 |
| 2.5 rhFGF-20蛋白的复性和活性测定 | 第23页 |
| 2.6 rhFGF-20抗血清的制备和鉴定 | 第23-24页 |
| 2.6.1 动物选择 | 第23页 |
| 2.6.2 准备工作 | 第23页 |
| 2.6.3 免疫方案 | 第23-24页 |
| 2.6.4 抗血清鉴定 | 第24页 |
| 2.7 统计学分析 | 第24页 |
| 3 实验结果 | 第24-29页 |
| 3.1 FGF-20 cDNA克隆的鉴定 | 第24-26页 |
| 3.1.1 RT-PCR产物的电泳分析 | 第24-25页 |
| 3.1.2 pET-24a-FGF-20的酶切分析 | 第25-26页 |
| 3.1.3 pET-24a-FGF-20的测序分析 | 第26页 |
| 3.2 大肠杆菌表达rhFGF-20蛋白的最佳条件 | 第26页 |
| 3.3 rhFGF-20蛋白的纯度分析 | 第26-27页 |
| 3.4 rhFGF-20蛋白的促细胞增殖活性 | 第27-28页 |
| 3.5 兔抗rhFGF-20蛋白抗血清的效价和特异性 | 第28-29页 |
| 4 讨论 | 第29-31页 |
| 5 小结 | 第31-32页 |
| 第二部分 肝癌高表达FGF-20的生物学意义以及与β-catenin的相关性分析摘要 | 第32-46页 |
| 1 实验材料 | 第33-34页 |
| 1.1 主要化学药品、生物制剂 | 第33页 |
| 1.2 肝癌和癌旁组织标本 | 第33-34页 |
| 2 实验方法 | 第34-35页 |
| 2.1 组织芯片的制作 | 第34页 |
| 2.2 组织芯片免疫化学染色 | 第34-35页 |
| 2.3 统计学分析 | 第35页 |
| 3 实验结果 | 第35-41页 |
| 3.1 组织芯片的阵列 | 第35页 |
| 3.2 肝癌和癌旁组织FGF-20表达情况 | 第35页 |
| 3.3 FGF-20表达与肝癌临床病理生物学指标的关系 | 第35-36页 |
| 3.4 肝癌和癌旁组织微血管密度及其与FGF-20表达的关系 | 第36-38页 |
| 3.5 肝癌和癌旁组织β-catenin表达及其与FGF-20表达的关系 | 第38-41页 |
| 4 讨论 | 第41-45页 |
| 4.1 关于组织芯片 | 第41页 |
| 4.2 FGF-20表达与肝癌生长 | 第41-42页 |
| 4.3 FGF-20表达与肝癌血管生成 | 第42-43页 |
| 4.4 FGF-20表达与Wnt/β-catenin信号通路 | 第43-45页 |
| 5 小结 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 综述 | 第50-60页 |
| 致谢 | 第60页 |