| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩写 | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第7-22页 |
| 1．1 柔红霉素——一种重要的蒽环类抗生素 | 第7-9页 |
| 1．1．1 柔红霉素的分子结构与性质 | 第7-8页 |
| 1．1．2 柔红霉素作用机制的研兄 | 第8页 |
| 1．1．3 柔红霉素的应用范围 | 第8-9页 |
| 1．1．4 柔红霉素的市场分析 | 第9页 |
| 1．1．5 柔红霉素的工业生产 | 第9页 |
| 1．2 柔红霉素产生菌菌种选育 | 第9-10页 |
| 1．2．1 国外研究进展 | 第9-10页 |
| 1．2．2 国内研究进展 | 第10页 |
| 1．3 柔红霉素的生物合成 | 第10-13页 |
| 1．3．1 柔红霉素的生物合成途径 | 第10-12页 |
| 1．3．2 利用基因工程技术改良柔红霉素产生菌 | 第12-13页 |
| 1．4 原生质体融合技术 | 第13-16页 |
| 1．4．1 原生质体融合的基本原理 | 第13-14页 |
| 1．4．2 原生质体融合技术在抗生素产生菌中的应用 | 第14-15页 |
| 1．4．3 原生质体融合的优点 | 第15页 |
| 1．4．4 原生质体融合技术的发展 | 第15-16页 |
| 1．4．5 原生质体融合衍生技术 | 第16页 |
| 1．5 定向进化 | 第16-21页 |
| 1．5．1 分子定向进化 | 第17-18页 |
| 1．5．2 基因组定向进化 | 第18-21页 |
| 1．6 本课题的立题意义和研究内容 | 第21-22页 |
| 第二章 柔红霉素发酵液提取和测定方法的研究 | 第22-38页 |
| 2．1 仪器和试剂 | 第23页 |
| 1．2．1 仪器 | 第23页 |
| 2．1．2 对照品及试剂 | 第23页 |
| 2．2 实验方法——柔红霉素理化性质知分析方法的研究 | 第23-25页 |
| 2．2．1 柔红霉素在不同pH条件下的性质 | 第23-24页 |
| 2．2．2 HPLC流动相的优化 | 第24-25页 |
| 2．2．3 标准曲线的绘制 | 第25页 |
| 2．2．4 发酵液预处理条件的研究 | 第25页 |
| 2．2．5 菌丝体中DNR的提取 | 第25页 |
| 2．3 实验结果 | 第25-37页 |
| 2．3．1 柔红霉素在不同pH下的性质 | 第25-26页 |
| 2．3．2 HPLC流动相的优化 | 第26-31页 |
| 2．3．3 标准曲线 | 第31-32页 |
| 2．3．4 发酵液的预处理 | 第32-35页 |
| 2．3．5 菌丝体中柔红霉素的提取 | 第35-36页 |
| 2．3．6 摇瓶发酵效价测定 | 第36-37页 |
| 2．4 总结 | 第37页 |
| 2．5 讨论 | 第37-38页 |
| 第三章 柔红霉素产生菌的基因组改组 | 第38-50页 |
| 3．1 实验材料 | 第38-41页 |
| 3．1．1 菌株户 | 第38页 |
| 3．1．2 实验材料 | 第38-39页 |
| 3．1．3 培养基 | 第39-40页 |
| 3．1．4 主要溶液和缓冲液 | 第40-41页 |
| 3．1．5 主要仪器和设备 | 第41页 |
| 3．2 实验方法 | 第41-44页 |
| 3．2．1 菌种的培养和保藏 | 第41页 |
| 3．2．2 菌丝体的培养和收集 | 第41-42页 |
| 3．2．3 原生质体的制备 | 第42页 |
| 3．2．4 原生质体的再生 | 第42页 |
| 3．2．5 原生质体的紫外诱变 | 第42-43页 |
| 3．2．6 基因组改组 | 第43-44页 |
| 3．2．7 DNR抗性平板初筛 | 第44页 |
| 3．2．8 摇瓶发酵复筛 | 第44页 |
| 3．2．9 改组菌株的稳定性研兄 | 第44页 |
| 3．3 实验结果与讨论 | 第44-48页 |
| 3．3．1 菌丝体的培养 | 第44-45页 |
| 3．3．2 原生质体分离 | 第45页 |
| 3．3．3 残存菌丝砰片的培养 | 第45页 |
| 3．3．4 改组前多样性一出发菌群的获得 | 第45页 |
| 3．3．5 基因组改组 | 第45-46页 |
| 3．3．6 SIPI 1482M1对柔红霉素的最低耐受浓度 | 第46页 |
| 3．3．7 对照试验 | 第46页 |
| 3．3．8 再生高产株的获得 | 第46-48页 |
| 3．3．9 改组菌株的稳定性 | 第48页 |
| 3．4 总结 | 第48页 |
| 3．5 讨论 | 第48-50页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
