| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-27页 |
| 1．1 血栓疾病及溶栓剂 | 第10-14页 |
| 1．1．1 血栓性疾病 | 第10-12页 |
| 1．1．1．1 凝血系统及溶检系统 | 第10-11页 |
| 1．1．1．2 血栓产生原因 | 第11页 |
| 1．1．1．3 常见血检性疾病 | 第11-12页 |
| 1．1．2 溶栓剂 | 第12-14页 |
| 1．1．2．1 溶栓剂作用原理 | 第12页 |
| 1．1．2．2 第一代溶栓剂 | 第12页 |
| 1．1．2．3 第二代溶栓剂 | 第12-14页 |
| 1．1．2．4 第三代溶栓剂 | 第14页 |
| 1．2 纳豆激酶的研究进展 | 第14-25页 |
| 1．2．1 纳豆激酶的历史 | 第14页 |
| 1．2．2 纳豆激酶的基因和蛋白质结构 | 第14-15页 |
| 1．2．3 纳豆激酶的溶栓机制 | 第15页 |
| 1．2．4 纳豆激酶的生化性质 | 第15-16页 |
| 1．2．5 纳豆激酶活性测定方法 | 第16-17页 |
| 1．2．5．1 纤维蛋白平板法 | 第16页 |
| 1．2．5．2 纤维蛋白块溶解时间法 | 第16-17页 |
| 1．2．5．3 四肽底物法 | 第17页 |
| 1．2．5．4 血清板法 | 第17页 |
| 1．2．5．5 酶联免疫吸附法(ELISA) | 第17页 |
| 1．2．6 纳豆激酶的溶栓性能 | 第17-19页 |
| 1．2．6．1 纳豆激酶的药理学研究 | 第18页 |
| 1．2．6．2 纳豆激酶药效学研究 | 第18-19页 |
| 1．2．7 纳豆激酶的制备 | 第19-21页 |
| 1．2．7．1 纳豆激酶发酵研究 | 第19页 |
| 1．2．7．2 纳豆激酶的分离纯化 | 第19-21页 |
| 1．2．8 纳豆激酶产品状况 | 第21-22页 |
| 1．2．9 肠溶药物的开发现状 | 第22-25页 |
| 1．2．9．1 肠溶药物的制备方法 | 第22-23页 |
| 1．2．9．2 常用肠溶溶药物包衣材料 | 第23-25页 |
| 1．3 立论依据和课题来源 | 第25页 |
| 1．4 本论文研究目的和内容 | 第25-27页 |
| 第二章 纳豆激酶的分离纯化 | 第27-43页 |
| 2．1 材料与方法 | 第27-33页 |
| 2．1．1 实验材料 | 第27-28页 |
| 2．1．1．1 AKTA Explorer 100分离纯化快速开拓系统 | 第27页 |
| 2．1．1．2 其它主要仪器设备 | 第27-28页 |
| 2．1．1．3 主要试剂 | 第28页 |
| 2．1．2 实验方法 | 第28-33页 |
| 2．1．2．1 纳豆激酶的液体发酵 | 第28-29页 |
| 2．1．2．2 纳豆激酶的活力测定方法 | 第29-30页 |
| 2．1．2．3 蛋白含量的测定方法——考马斯亮蓝法 | 第30-31页 |
| 2．1．2．4 纳豆激酶的分离纯化方法 | 第31-32页 |
| 2．1．2．5 SDS-PAGE | 第32-33页 |
| 2．2 实验结果 | 第33-41页 |
| 2．2．1 纳豆激酶的液体发酵 | 第33-34页 |
| 2．2．2 硫酸铵沉淀和色谱法分离纯化纳豆激酶 | 第34-39页 |
| 2．2．2．1 发酵液预处理 | 第34页 |
| 2．2．2．2 乙醇沉淀结果 | 第34-35页 |
| 2．2．2．3 硫酸按沉淀结果 | 第35页 |
| 2．2．2．4 凝胶层析 | 第35-37页 |
| 2．2．2．5 离子交换层析 | 第37-38页 |
| 2．2．2．6 SDS-PAGE非连续电泳 | 第38-39页 |
| 2．2．3 透析和色谱法分离纯化纳豆激酶 | 第39-41页 |
| 2．2．3．1 透析 | 第39页 |
| 2．2．3．2 离子交换层析 | 第39-40页 |
| 2．2．3．3 SDS-PAGE | 第40-41页 |
| 2．3 讨论 | 第41-42页 |
| 2．4 本章小节 | 第42-43页 |
| 第三章 纳豆激酶的酶学性质 | 第43-65页 |
| 3．1 材料与方法 | 第43-48页 |
| 3．1．1 实验材料 | 第43-44页 |
| 3．1．1．1 主要仪器设备 | 第43页 |
| 3．1．1．2 主要试剂 | 第43-44页 |
| 3．1．2 实验方法 | 第44-48页 |
| 3．1．2．1 酶活测定方法 | 第44页 |
| 3．1．2．2 SDS-PAGE非连续电泳 | 第44页 |
| 3．1．2．3 纳豆激酶的分子量 | 第44页 |
| 3．1．2．4 纳豆激酶反应最适温度的确定 | 第44页 |
| 3．1．2．5 纳豆激酶的最适pH | 第44-45页 |
| 3．1．2．6 纳豆激酶的作用方式 | 第45页 |
| 3．1．2．7 纤维蛋白原和纤维蛋白降解过程分析 | 第45-46页 |
| 3．1．2．8 抑制剂和变性剂对酶活的影响 | 第46页 |
| 3．1．2．9 金属离子对酶活的影响 | 第46页 |
| 3．1．2．10 稳定性 | 第46-47页 |
| 3．1．2．11 肠溶微丸的制备方法 | 第47页 |
| 3．1．2．12 肠溶微丸效果的测定 | 第47-48页 |
| 3．2 实验结果 | 第48-62页 |
| 3．2．1 纳豆激酶的分子量 | 第48-49页 |
| 3．2．2 最适温度 | 第49-50页 |
| 3．2．3 最适pH | 第50页 |
| 3．2．4 纳豆激酶的作用方式 | 第50-51页 |
| 3．2．5 纤维蛋白原和纤维蛋白降解过程分析 | 第51-52页 |
| 3．2．6 抑制剂和变性剂对酶活的影响 | 第52页 |
| 3．2．7 金属离子对酶活的影响 | 第52-53页 |
| 3．2．8 稳定性 | 第53-57页 |
| 3．2．8．1 温度对稳定性的影响 | 第54页 |
| 3．2．8．2 pH对稳定性的影响 | 第54-55页 |
| 3．2．8．3 保温时间对稳定性的影响 | 第55-56页 |
| 3．2．8．4 添加不同物质对热稳定性的影响 | 第56-57页 |
| 3．2．9 纳豆激酶肠溶药物的研究 | 第57-62页 |
| 3．2．9．1 不同CaCl_2浓度下面NK包埋率的研究 | 第57页 |
| 3．2．9．2 海藻酸钙胶珠肠溶释放度的研究 | 第57-58页 |
| 3．2．9．3 不同CAP浓度下包埋率的研究 | 第58-59页 |
| 3．2．9．4 不同蛋白质浓度下面 CAP肠溶微丸包埋率的研究 | 第59-60页 |
| 3．2．9．5 CAP肠溶微丸肠溶溶效果的测定 | 第60页 |
| 3．2．9．6 添加不同辅料对纳豆激酶活力保存的影响 | 第60-61页 |
| 3．2．9．7 海藻酸钙胶囊和 CAP肠溶微丸的比较 | 第61-62页 |
| 3．3 讨论 | 第62-63页 |
| 3．3．1 纳豆激酶酶学性质研究的目标 | 第62页 |
| 3．3．2 纳豆激酶酶学性质研究的意义 | 第62-63页 |
| 3．3．3 肠溶微丸的制备 | 第63页 |
| 3．4 本章小结 | 第63-65页 |
| 第四章 结论和建议 | 第65-67页 |
| 4．1 结论 | 第65-66页 |
| 4．2 建议 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
