| 中文摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 缩略词表 | 第5-9页 |
| 前言 | 第9-13页 |
| 第一部分 SFRP5基因稳定沉默的胰腺癌细胞株的建立 | 第13-25页 |
| 1 实验材料和仪器 | 第13-15页 |
| 1.1 主要实验仪器 | 第13-14页 |
| 1.2 实验试剂及实验耗材 | 第14-15页 |
| 2 实验方法 | 第15-20页 |
| 2.1 细胞培养 | 第15-16页 |
| 2.1.1 细胞传代 | 第15页 |
| 2.1.2 细胞冻存 | 第15页 |
| 2.1.3 细胞复苏 | 第15-16页 |
| 2.2 细胞铺板 | 第16页 |
| 2.3 病毒转染 | 第16页 |
| 2.4 Real-time PCR | 第16-18页 |
| 2.4.1 细胞总RNA的提取 | 第16-17页 |
| 2.4.2 cDNA合成（在冰上配制反应液） | 第17页 |
| 2.4.3 PCR扩增 | 第17-18页 |
| 2.5 Western blot | 第18-20页 |
| 2.5.1 细胞蛋白提取 | 第18页 |
| 2.5.2 BCA法蛋白定量 | 第18-19页 |
| 2.5.3 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第19-20页 |
| 2.6 统计学分析 | 第20页 |
| 3 实验结果 | 第20-24页 |
| 3.1 慢病毒介导的shRNA转染细胞效率测定 | 第20-21页 |
| 3.2 Real-time PCR检测慢病毒转染后细胞中SFRP5 RNA的表达 | 第21-22页 |
| 3.3 Western Blot检测慢病毒转染后细胞中SFRP5蛋白的表达 | 第22-24页 |
| 4 实验小结 | 第24-25页 |
| 第二部分 SFRP5沉默对胰腺癌细胞PANC-1 与CFPAC-1 恶性表型的影响 | 第25-33页 |
| 1 实验材料和仪器 | 第25页 |
| 1.1 主要实验仪器 | 第25页 |
| 1.2 实验试剂及实验耗材 | 第25页 |
| 2 实验方法 | 第25-26页 |
| 2.1 细胞增殖实验（CCK-8） | 第25-26页 |
| 2.2 Transwell小室实验 | 第26页 |
| 2.3 细胞划痕实验 | 第26页 |
| 2.4 统计学分析 | 第26页 |
| 3 实验结果 | 第26-31页 |
| 3.1 CCK-8 实验检测细胞增殖能力的变化 | 第26-27页 |
| 3.2 Transwell小室实验检测细胞侵袭能力的变化 | 第27-29页 |
| 3.3 细胞划痕实验检测检测细胞的迁移能力的变化 | 第29-31页 |
| 4 实验小结 | 第31-33页 |
| 讨论 | 第33-37页 |
| 结论 | 第37-38页 |
| 1 主要结论 | 第37页 |
| 2 研究展望 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-43页 |
| 综述：胞外囊泡及其促进胰腺癌侵袭转移的机制 | 第43-49页 |
| 参考文献 | 第46-49页 |
| 在学期间的研究成果 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50页 |
