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农杆菌介导的盐生杜氏藻Dscbr基因转化紫花苜蓿的初步研究

主要英文缩略词表第1-8页
中文摘要第8-9页
英文摘要第9-11页
前言第11-13页
文献综述第13-35页
 1 光诱导胁迫蛋白(ELIPs)研究进展第13-25页
   ·引言第13-14页
   ·ELIP亚家族:原核和真核生物的ELIP-like蛋白第14-17页
   ·ELIP表达的调控第17-21页
     ·光受体第17页
     ·转录调节第17-19页
       ·光强和光质调节ELIP的表达第18页
       ·温度调节ELIP表达第18页
       ·发育调节ELIP表达第18页
       ·植物激素调节ELIP表达第18-19页
       ·细胞核和细胞质因子参与ELIP表达第19页
     ·翻译后调节第19-21页
       ·ELIP整合到类囊体膜上第19页
       ·ELIPs在光胁迫条件下的稳定第19-20页
       ·光恢复过程中ELIPs的降解第20-21页
   ·ELIPs的功能:“色素载体”蛋白第21-25页
     ·ELIPs:临时的叶绿素结合蛋白第22-24页
     ·ELIPs在增加的色素蛋白转换中的积累第24页
     ·ELIPs在蛋白体复合物装配和去装配区域中的定位第24页
     ·ELIPs在叶黄素循环中的作用第24-25页
 2 苜蓿组织培养研究进展第25-29页
   ·苜蓿组织培养中选用的外植体第26页
   ·苜蓿组织培养中培养基的选择第26-27页
   ·苜蓿组织培养途径第27-28页
     ·直接分化再生途径第27页
     ·愈伤组织再生途径第27页
     ·原生质体再生途径第27-28页
     ·胚状体再生途径第28页
   ·细胞生长调节物质的应用第28-29页
   ·培养条件的控制第29页
     ·光照第29页
     ·温度第29页
 3 苜蓿基因工程的研究现状第29-35页
   ·前言第29-30页
   ·紫花苜蓿的转基因研究第30-34页
     ·非生物胁迫的耐受性第30-31页
     ·生物胁迫的耐受性第31-32页
     ·对除草剂的抗性第32页
     ·改良牧草质量第32-33页
     ·新型化合物的生产第33-34页
   ·苜蓿基因工程的局限性第34-35页
第一章 苜蓿的组织培养第35-42页
 1 材料与方法第35-37页
   ·实验材料第35-36页
     ·植物材料第35页
     ·基本培养基第35-36页
     ·植物激素第36页
   ·方法第36-37页
     ·种子灭菌及无菌苗的获得第36-37页
     ·培养基的筛选第37页
     ·外植体的选择第37页
     ·苜蓿再生苗的扩繁第37页
 2 结果与分析第37-40页
   ·培养基的筛选第37-38页
   ·外植体的选择第38-39页
   ·再生植株的扩繁第39-40页
 3 讨论第40-41页
   ·苜蓿种子灭菌及无菌苗的培养第40页
   ·苜蓿愈伤组织的形成分化第40-41页
 4 小结第41-42页
第二章 农杆菌介导的Dscbr基因转化苜蓿的体系优化第42-56页
 1 材料与方法第42-47页
   ·实验材料第42-44页
     ·植物材料第42页
     ·基本培养基第42页
       ·植物培养基第42页
       ·农杆菌培养基第42页
     ·试剂第42-43页
     ·菌株和质粒第43-44页
   ·方法第44-47页
     ·卡那霉素选择压的比较第44页
       ·愈伤诱导过程中选择压力的比较第44页
       ·生根过程中选择压力的比较第44页
     ·Dscbr基因转化根癌农杆菌第44-46页
       ·碱裂解法制备小量质粒DNA第44页
       ·根癌农杆菌感受态细胞的制备第44-45页
       ·冻融法转化感受态的根癌农杆菌第45页
       ·转化子的检测第45-46页
     ·农杆菌介导的苜蓿遗传转化方法第46-47页
       ·菌液的制备第46页
       ·剪叶预培养第46页
       ·侵染第46页
       ·洗叶第46页
       ·再生植株的获得第46页
       ·再生植株的移栽第46-47页
     ·GUS组织化学染色分析第47页
     ·转化条件的优化分析第47页
       ·叶片预培养对转化的影响第47页
       ·侵染时间对转化的影响第47页
       ·共培养时间对转化的影响第47页
 2 结果与分析第47-53页
   ·选择压力的确定第47-48页
     ·愈伤诱导过程中选择压力的确定第47-48页
     ·生根过程中选择压力的确定第48页
   ·Dscbr基因转化根癌农杆菌第48-49页
   ·苜蓿转化系统的优化第49-52页
     ·叶片预培养对转化效率的影响第49-50页
     ·侵染时间对转化效率的影响第50页
     ·共培养时间及方法对转化效率的影响第50-52页
   ·Dscbr基因的导入与植株再生第52-53页
 3 讨论第53-54页
   ·农杆菌菌株对转化的影响第53页
   ·农杆菌与外植体共培养第53-54页
     ·共培养方法第53页
     ·最佳共培养时间第53-54页
   ·转化细胞的选择第54页
 4 小结第54-56页
第三章 转盐生杜氏藻Dscbr基因苜蓿的分子生物学鉴定第56-62页
 1 材料与方法第56-58页
   ·材料第56页
   ·方法第56-58页
     ·DNA的提取第56页
     ·RNA的提取第56-57页
     ·转基因苜蓿的PCR检测第57页
     ·转基因苜蓿的RT-PCR检测第57-58页
 2 结果第58-59页
   ·转基因苜蓿的PCR检测第58-59页
   ·转基因苜蓿的RT-PCR检测第59页
     ·总RNA电泳检测第59页
     ·RT-PCR检测第59页
 3 讨论第59-61页
   ·PCR检测第59-60页
   ·苜蓿RNA的提取第60页
   ·RT-PCR检测第60-61页
 4 小结第61-62页
结论第62-63页
参考文献第63-75页
致谢第75-76页
附图第76-78页

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