摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
前言 | 第9-22页 |
一 马传染性贫血病毒概述 | 第9-14页 |
1 EIAV的分类地位 | 第9-10页 |
2 EIAV的认知历史 | 第10-11页 |
3 EIAV形态和理化特性 | 第11-12页 |
4 EIAV的主要生物学特性 | 第12-13页 |
5 几个重要的EIAV毒株 | 第13-14页 |
二 EIAV感染性分子克隆在功能基因组学研究中的作用及进展 | 第14-20页 |
1 EIAV基因组结构 | 第14-15页 |
2 与病毒复制过程相关的功能基因研究 | 第15-18页 |
3 与病毒毒力和免疫相关的基因研究 | 第18-20页 |
三 本研究的背景、内容和意义 | 第20-22页 |
材料和方法 | 第22-37页 |
一 材料 | 第22-24页 |
1 病毒和细胞培养 | 第22页 |
2 质粒和菌株 | 第22页 |
3 引物 | 第22页 |
4 试剂 | 第22-24页 |
5 培养基 | 第24页 |
6 主要仪器 | 第24页 |
二 方法 | 第24-37页 |
1 病毒细胞培养 | 第24页 |
2 前病毒DNA的提取 | 第24-25页 |
3 EIAV前病毒DNA分段扩增和基因克隆 | 第25-26页 |
4 EIAV全基因克隆的构建 | 第26-27页 |
5 质粒的提取与纯化 | 第27-28页 |
6 DNA序列测定与分析 | 第28-29页 |
7 质粒在细胞培养中的转染和传代 | 第29页 |
8 转染传代后细胞培养物中EIAV的检查 | 第29-32页 |
9 动物感染试验 | 第32-37页 |
结果 | 第37-70页 |
1 EIAV前病毒DNA PCR扩增及不同片段克隆质粒的鉴定 | 第37页 |
2 DV116全基因克隆的构建 | 第37-38页 |
3 DV116前病毒核苷酸全序列及其结构基因编码的蛋白质序列 | 第38-42页 |
4 DV116前病毒序列分析 | 第42-61页 |
5 DV116前病毒全基因克隆体外转染后的检测 | 第61-62页 |
6 动物感染试验 | 第62-70页 |
讨论 | 第70-76页 |
一 有关基因序列比较引发的讨论 | 第70-73页 |
1 我国的EIAV毒株基因在基因进化关系中形成独立发展的一支 | 第70-72页 |
2 基因保守区是维持病毒基本生物学特性的基础,变异区却蕴含着毒力变化的关键信息 | 第72页 |
3 细胞免疫是慢病毒免疫主要形式,基因变异可能不是能够影响免疫的决定因素。 | 第72-73页 |
二 感染性分子克隆是进行病毒遗传操作,阐明基因与功能相互关系的有力手段 | 第73-74页 |
三 关于不同细胞嗜性毒株的转染问题 | 第74-75页 |
1 DV116全基因克隆在高拷贝质粒载体上不能稳定存在 | 第74页 |
2 转染策略与细胞嗜性 | 第74-75页 |
四 有关动物试验和感染性分子克隆衍生毒生物学特性的继承性问题 | 第75-76页 |
结论 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-84页 |
致谢 | 第84-85页 |
作者简介 | 第85页 |