| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-13页 |
| 第一部分 文献综述：植物抗病基因研究进展 | 第13-30页 |
| 1．1 植物抗病反应的生物学机理 | 第13-14页 |
| 1．2 植物抗病基因的克隆 | 第14-16页 |
| 1．2．1 植物抗病基因的克隆技术 | 第14-15页 |
| 1．2．2 已克隆的植物抗病基因 | 第15-16页 |
| 1．3 植物抗病基因产物的结构特征及抗病基因的类型 | 第16-18页 |
| 1．3．1 抗病基因结构特征 | 第16-18页 |
| 1．3．2 抗病基因的类型 | 第18页 |
| 1．4 植物抗病基因同源序列研究现状 | 第18-19页 |
| 1．5 植物抗病基因信号传导途径相关基因的研究 | 第19-22页 |
| 1．5．1 植物抗病反应的信号分子研究 | 第20页 |
| 1．5．2 通过筛选抗性丧失突变体来鉴定信号传导相关基因 | 第20-21页 |
| 1．5．3 影响特异性防卫反应基因的分离 | 第21页 |
| 1．5．4 酵母双杂交系统分离信号转导基因研究 | 第21-22页 |
| 1．5．5 NDR1基因和EDS1基因的分离 | 第22页 |
| 1．6 抗病基因进化的研究 | 第22-24页 |
| 1．6．1 基因结构与进化 | 第22-23页 |
| 1．6．2 基因复制，重组和进化 | 第23页 |
| 1．6．3 模拟病斑突变体与进化 | 第23页 |
| 1．6．4 病原识别位点的适应进化 | 第23-24页 |
| 1．6．5 转座子与抗病基因进化 | 第24页 |
| 1．7 植物抗病毒基因工程研究策略 | 第24-27页 |
| 1．7．1 外壳蛋白介导的抗性策略 | 第24-25页 |
| 1．7．2 复制酶介导的策略 | 第25页 |
| 1．7．3 病毒卫星RNA策略 | 第25-26页 |
| 1．7．4 病毒反义RNA技术 | 第26页 |
| 1．7．5 缺陷型运动蛋白介导的抗性策略 | 第26页 |
| 1．7．6 利用植物体内的抗病毒基因策略 | 第26页 |
| 1．7．7 转录后基因沉默与植物抗病毒策略 | 第26-27页 |
| 1．8 植物抗病基因工程的进展 | 第27-30页 |
| 第二部分 引言 | 第30-34页 |
| 2．1 立题依据 | 第30-32页 |
| 2．2 研究内容 | 第32页 |
| 2．3 技术路线 | 第32-34页 |
| 第三部分 结球甘蓝cDNA文库的构建 | 第34-42页 |
| 3．1 材料与试剂 | 第34-36页 |
| 3．2 方法 | 第36-39页 |
| 3．3 结果与分析 | 第39-42页 |
| 3．3．1 构建cDNA文库的策略 | 第39-40页 |
| 3．3．2 总RNA的提取及cDNA文库特性鉴定 | 第40-41页 |
| 3．3．3 分析与讨论 | 第41-42页 |
| 第四部分 结球甘蓝抗病基因的分离与克隆 | 第42-71页 |
| 4．1 材料与试剂 | 第42-46页 |
| 4．1．1 植物材料 | 第42页 |
| 4．1．2 菌种，质粒 | 第42-43页 |
| 4．1．3 主要分子生物学试剂 | 第43-46页 |
| 4．2 方法 | 第46-54页 |
| 4．2．1 DNA的提取及PCR | 第46-47页 |
| 4．2．2 结球甘蓝RNA的提取及RT-PCR | 第47-48页 |
| 4．2．3 PCR产物的回收与连接 | 第48页 |
| 4．2．4 感受态细胞的制备及转化 | 第48-49页 |
| 4．2．5 质粒的提取及酶切 | 第49-50页 |
| 4．2．6 DNA测序，基因序列及蛋白质特性分析 | 第50页 |
| 4．2．7 Southern blot及Northern blot | 第50-53页 |
| 4．2．8 入噬菌体cDNA文库的筛选 | 第53-54页 |
| 4．3 结果与分析 | 第54-68页 |
| 4．3．1 结球甘蓝抗病基因同源序列的分离克隆 | 第54-56页 |
| 4．3．2 结球甘蓝基因同源序列的分析 | 第56页 |
| 4．3．3 Borl，Bor2与已克隆的抗病基因同源性比较 | 第56-57页 |
| 4．3．4 结球甘蓝入噬菌体cDNA文库的筛选 | 第57-65页 |
| 4．3．4．1 cDNA文库的筛选 | 第57页 |
| 4．3．4．2 阳性重组噬菌体亚克隆 | 第57-58页 |
| 4．3．4．3 阳性克隆序列分析 | 第58-59页 |
| 4．3．4．4 TuR2与已知植物抗病基因的同源性比较 | 第59-63页 |
| 4．3．4．5 Southern blot，Northern blot及F2共分离检测 | 第63-65页 |
| 4．3．5 TuR2编码的蛋白质的特性和结构预测 | 第65-68页 |
| 4．3．5．1 TuR2编码的蛋白质的基本特性和氨基酸组成分析 | 第65-66页 |
| 4．3．5．2 蛋白质信号肽可能的超螺旋盘绕结构预测 | 第66页 |
| 4．3．5．3 蛋白质的理化特性曲线 | 第66-67页 |
| 4．3．5．4 蛋白质特征位点查找 | 第67-68页 |
| 4．3．5．5 蛋白质二级结构预测 | 第68页 |
| 4．4 讨论 | 第68-71页 |
| 第五部分 TuR2基因转化芥菜的研究 | 第71-82页 |
| 5．1 材料与方法 | 第71-72页 |
| 5．2 方法 | 第72-74页 |
| 5．2．1 大肠杆菌质粒提取 | 第72页 |
| 5．2．2 质粒的酶切，目的DNA片段的回收及连接 | 第72页 |
| 5．2．3 大肠杆菌感受态细胞的制备，转化 | 第72页 |
| 5．2．4 农杆菌LB4404感受态细胞的制备，转化及质粒提取 | 第72-73页 |
| 5．2．5 茎瘤芥无菌无性系的建立 | 第73页 |
| 5．2．6 茎瘤芥的外植体的遗传转化 | 第73-74页 |
| 5．2．7 植物总DNA的提取 | 第74页 |
| 5．2．8 转基因茎瘤芥基因组DNA PCR扩增和PCR-Southern blot | 第74页 |
| 5．3 结果与分析 | 第74-81页 |
| 5．3．1 表达载体pBI121-TUR2的构建 | 第74-76页 |
| 5．3．2 质粒pBI121-TuR2对农杆菌的转化 | 第76页 |
| 5．3．3 茎瘤芥的转化 | 第76-81页 |
| 5．4 讨论 | 第81-82页 |
| 第六部分 结论 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-95页 |
| 缩写词 | 第95-96页 |
| 发表文章 | 第96-97页 |
| 致谢 | 第97页 |
