| 前言 | 第1-42页 |
| 第一部分 研究背景 | 第42-64页 |
| 一、 四君子汤的组成及功效 | 第43页 |
| 二、 四君子汤的现代约理作用研究进展 | 第43-47页 |
| 1． 对胃肠系统的影响 | 第43-45页 |
| 1．1． 对胃肠运动的影响 | 第43-44页 |
| 1．2． 对胃肠粘膜的影响 | 第44-45页 |
| 1．3． 对胃肠激素的影响 | 第45页 |
| 2． 对机体整体免疫功能的影响 | 第45页 |
| 3． 四君子汤多糖对肠道粘膜免疫的影响 | 第45-47页 |
| 4． 四君子汤的研究中存在的问题 | 第47页 |
| 三、 多糖与免疫功能的关系 | 第47-51页 |
| 1． 多糖的基本性质 | 第47-48页 |
| 2． 多糖的免疫调节作用 | 第48-49页 |
| 3． 中药多糖对整体免疫的调节作用 | 第49页 |
| 4． 中药多糖对肠道粘膜免疫系统的调整作用 | 第49-50页 |
| 5． 四君子汤单味药多糖均具有明显的免疫活性 | 第50-51页 |
| 四、 小肠上皮细胞的解剖结构及其功能 | 第51-59页 |
| 1． 小肠上皮细胞的解剖结构 | 第51页 |
| 2． 小肠上皮细胞的增殖、分化、凋亡、损伤及重构 | 第51-54页 |
| 2．1 增殖与分化 | 第52页 |
| 2．2 凋亡 | 第52-53页 |
| 2．3 损伤 | 第53页 |
| 2．4 重构 | 第53-54页 |
| 3． 细胞功能 | 第54-59页 |
| 3．1 构成上皮屏障对抗肠腔细菌 | 第54-55页 |
| 3．2 分泌保护性的抗肠腔内有害微生物产物，维护肠道粘膜的完整性 | 第55页 |
| 3．3 分泌细胞网子，调节肠粘膜免疫应答 | 第55-57页 |
| 3．4 作为非特异性抗原呈递细胞，表达Ⅰ、Ⅱ类分子或非经典Ⅰ类MHC分子，参与粘膜免疫应答 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 第二部分 研究方法、结果与讨论 | 第64-152页 |
| 第一章 四君子汤总多糖对IEC-6细胞增殖的影响 | 第65-88页 |
| 第一节 大鼠小肠上皮细胞株IEC-6培养体系的建立及其影响因素的探讨 | 第65-74页 |
| 1 材料与方法 | 第65-67页 |
| 1．1 试剂 | 第65-66页 |
| 1．2 仪器 | 第66页 |
| 1．3 细胞株 | 第66页 |
| 1．4 培养液的配制 | 第66页 |
| 1．5 细胞传代培养的一般方法 | 第66页 |
| 1．6 MTT显色法测定小肠上皮细胞株IEC-6细胞的生长和增殖 | 第66-67页 |
| 1．7 统计学处理 | 第67页 |
| 2 实验结果 | 第67-70页 |
| 2．1 IEC-6细胞株的生长形态 | 第67-68页 |
| 2．2 细胞接种密度对IEC-6细胞生长的影响 | 第68-69页 |
| 2．3 按种时间对IEC-6细胞生长的影响 | 第69页 |
| 2．4 不同加药时间IEC-6细胞株生长的影响 | 第69-70页 |
| 3 讨论 | 第70-72页 |
| 3．1 小肠上皮细胞株IEC-6是研究小肠上皮细胞功能的理想工具 | 第70-71页 |
| 3．2 IEC-6细胞株形态与功能 | 第71页 |
| 3．3 MTT法检测细胞增殖的优缺点 | 第71-72页 |
| 4 小结 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-74页 |
| 第二节 四君子汤总多糖对大鼠小肠上皮细胞株IEC-6细胞增殖的影响 | 第74-88页 |
| 1 材料与方法 | 第74-75页 |
| 1．1 试剂和药品 | 第74页 |
| 1．2 仪器 | 第74页 |
| 1．3 细胞株 | 第74页 |
| 1．4 培养液的配制 | 第74-75页 |
| 1．5 细胞培养的方法 | 第75页 |
| 1．6 MTT显色法测定小肠上皮细胞株IEC-6细胞的生长和增值 | 第75页 |
| 1．7 细胞计数法测定小肠上皮细胞株IEC-6细胞的生长和增值 | 第75页 |
| 1．8 统计学处理 | 第75页 |
| 2 实验结果 | 第75-82页 |
| 2．1 四君子汤总多糖中未去蛋白多糖及去蛋白多糖对大鼠小肠上皮细胞株IEC-6细胞增殖的影响（MTT法） | 第75-76页 |
| 2．2 四君子汤总多糖中未去蛋白多糖及去蛋白多糖对大鼠小肠上皮细胞株IEC-6细胞增殖的影响（细胞计数法） | 第76-77页 |
| 2．3 四君子汤总多糖不同作用时间对IEC-6细胞增殖的影响 | 第77-78页 |
| 2．4 四君子汤对消炎痛造成的IEC-6细胞生长抑制的影响 | 第78-79页 |
| 2．5 四君子汤总多糖及其组成单味药多糖对IEC-6细胞增殖的影响 | 第79-81页 |
| 2．6 四君子汤总多糖和每两味多糖对IEC-6细胞增值的影响 | 第81-82页 |
| 3 讨论 | 第82-86页 |
| 3．1 四君子汤总多糖对小肠上皮细胞生长具有调节作用 | 第82-83页 |
| 3．2 四君子汤中四个单味药多糖的免疫活性存在差异 | 第83-84页 |
| 3．3 四君子汤总多糖的促进细胞增殖的作用是四个单味药多糖作用的综合 | 第84页 |
| 3．4 四君子汤总多糖及单味药多糖的免疫活性是中医“整体观”的体现 | 第84-85页 |
| 3．5 体外研究细胞模型是中医复方用药物质基础研究的有效途径之一 | 第85-86页 |
| 4 小结 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-88页 |
| 第二章 四君子汤总多糖对IEC-6细胞迁移的影响 | 第88-114页 |
| 第一节 四君子汤总多糖对IEC-6细胞迁移的影响 | 第88-101页 |
| 1 材料与方法 | 第88-91页 |
| 1．1 试剂与药品 | 第88页 |
| 1．2 仪器 | 第88-89页 |
| 1．3 细胞株 | 第89页 |
| 1．4 培养液的配制 | 第89页 |
| 1．5 细胞培养的方法 | 第89页 |
| 1．6 细胞迁移的测定 | 第89-91页 |
| 1．7 统计学处理 | 第91页 |
| 2 实验结果 | 第91-97页 |
| 2．1 四君子汤总多糖对IEC-6细胞迁移的影响 | 第91-94页 |
| 2．2 小剂量四君子汤总多糖对IEC-6细胞迁移的影响 | 第94页 |
| 2．3 血清对四君子汤总多糖促进IEC-6细胞迁移作用的影响 | 第94-95页 |
| 2．4 四君子汤总多糖作用4天对IEC-6细胞迁移作用的影响 | 第95-96页 |
| 2．5 四君子汤总多糖于造模前及造模后持续给药对IEC-6细胞迁移的影响 | 第96-97页 |
| 3 讨论 | 第97-99页 |
| 3．1 小肠上皮细胞株IEC-6是理想的细胞迁移模型 | 第98页 |
| 3．2 体外对四君子汤促进受损的胃肠道壁粘膜的恢复作用尚属空白 | 第98-99页 |
| 3．3 四君子汤总多糖在体外具有促进小肠上皮细胞迁移的作用 | 第99页 |
| 4 小结 | 第99-100页 |
| 参考文献 | 第100-101页 |
| 第二节 四君子汤总多糖及各单味药多糖对IEC-6细胞迁移作用的影响 | 第101-114页 |
| 1 材料与方法 | 第101-102页 |
| 1．1 试剂和药品 | 第101页 |
| 1．2 仪器 | 第101页 |
| 1．3 细胞株 | 第101页 |
| 1．4 培养液的配制 | 第101页 |
| 1．5 细胞培养的方法 | 第101页 |
| 1．6 细胞迁移的测定 | 第101-102页 |
| 1．7 统计学处理 | 第102页 |
| 2 实验结果 | 第102-109页 |
| 2．1 四君子汤中各单味药多糖对IEC-6细胞迁移的影响 | 第102-105页 |
| 2．2 四君子汤中各单味药多糖作用4天对IEC-6细胞迁移效应的影响 | 第105-108页 |
| 2．3 四君子汤总多糖及各单味药多糖促IEC-6细胞迁移的影响的作用比较 | 第108页 |
| 2．4 四君子汤总多糖及各单味药多糖作用4天促IEC-6细胞迁移的作用比较 | 第108-109页 |
| 3 讨论 | 第109-112页 |
| 3．1 四君子汤中4种单味药多糖对IEC-6细胞迁移作用不一致，药物与细胞孵育时间不同，其作用亦有所差别 | 第109-111页 |
| 3．2 四君子汤总多糖促进IEC-6细胞迁移的作用优于各单味药多糖 | 第111页 |
| 3．3 细胞增殖可能在IEC-6细胞迁移中不发挥主要作用 | 第111-112页 |
| 4 小结 | 第112-113页 |
| 参考文献 | 第113-114页 |
| 第三章 四君子汤总多糖对大鼠小肠上皮细胞株IEC-6细胞粘附的影响 | 第114-124页 |
| 1 材料与方法 | 第114-115页 |
| 1．1 试剂和药品 | 第114页 |
| 1．2 仪器 | 第114页 |
| 1．3 细胞株 | 第114页 |
| 1．4 培养液的配制 | 第114页 |
| 1．5 细胞培养的方法 | 第114页 |
| 1．6 粘附实验前细胞的基本处理 | 第114-115页 |
| 1．7 细胞粘附测定 | 第115页 |
| 1．8 统计学处理 | 第115页 |
| 2 实验结果 | 第115-120页 |
| 2．1 多胺耗竭对细胞粘附的影响 | 第115-116页 |
| 2．2 四君子汤总多糖对DFMO造成的细胞粘附功能障碍的影响 | 第116-117页 |
| 2．3 四君子汤总多糖及DFMO对粘附细胞的扩散作用的影响 | 第117-119页 |
| 2．4 四君子汤总多糖对IEC-6细胞株已融合细胞结构的影响 | 第119-120页 |
| 3 讨论 | 第120-122页 |
| 4 小结 | 第122-123页 |
| 参考文献 | 第123-124页 |
| 第四章 四君子汤总多糖对IEC-6细胞基因表达谱的影响 | 第124-152页 |
| 第一节 四君子汤总多糖对正常IEC-6细胞基因表达谱的影响 | 第124-137页 |
| 1 材料与方法 | 第124-125页 |
| 1．1 试剂和药品 | 第124页 |
| 1．2 仪器 | 第124页 |
| 1．3 细胞株 | 第124-125页 |
| 1．4 培养液配制 | 第125页 |
| 1．5 IEC-6细胞株的处理及细胞传代培养方法 | 第125页 |
| 1．6 基因芯片的制备 | 第125页 |
| 1．7 基因谱检测与分析方法 | 第125页 |
| 2 结果与讨论 | 第125-134页 |
| 2．1 芯片杂交信号强度散点图 | 第125-126页 |
| 2．2 基因芯片双色荧光标记叠加图 | 第126-127页 |
| 2．3 四君子汤总多糖引起的IEC-6细胞株基因表达谱的变化情况 | 第127-132页 |
| 2．4 PPS所致小肠上皮细胞株IEC-6基因表达谱的变化分析 | 第132-133页 |
| 2．4．1 与细胞信号传导相关的基因变化 | 第132页 |
| 2．4．2 与细胞代谢相关的基因变化 | 第132页 |
| 2．4．3 与细胞生长相关的基因变化 | 第132-133页 |
| 2．4．4 与细胞粘附功能相关的基因变化 | 第133页 |
| 2．4．5 与免疫应答功能相关的基因变化 | 第133页 |
| 2．5 基因芯片技术的研究现状，缺陷以及应用前景 | 第133-134页 |
| 2．5．1 基因芯片技术的现状 | 第133-134页 |
| 2．5．2 基因芯片技术应用中的问题与缺陷 | 第134页 |
| 2．5．3 基因芯片技术的应用前景 | 第134页 |
| 3 小结 | 第134-136页 |
| 参考文献 | 第136-137页 |
| 第二节 四君子汤总多糖对IEC-6细胞迁移模型功能性基因表达谱的影响 | 第137-152页 |
| 1 材料与方法 | 第137-141页 |
| 1．1 试剂与药品 | 第137页 |
| 1．2 仪器 | 第137页 |
| 1．3 细胞株 | 第137页 |
| 1．4 培养液的配制 | 第137页 |
| 1．5 细胞传代培养方法 | 第137页 |
| 1．6 小肠上皮细胞株IEC-6细胞损伤模型的制备及处理的处理 | 第137-138页 |
| 1．7 收获细胞后进行RNA提取以及电泳检测 | 第138-139页 |
| 1．8 探针合成程序 | 第139-140页 |
| 1．9 杂交 | 第140-141页 |
| 2 结果 | 第141-146页 |
| 2．1 芯片杂交信号强度散点图 | 第141页 |
| 2．2 双色荧光标记及替加图 | 第141-142页 |
| 2．3 四君子汤总多糖对大鼠小肠上皮细胞IEC-6细胞迁移模型的基因表达谱的变化情况 | 第142-146页 |
| 3 讨论 | 第146-150页 |
| 3．1 四君子汤总多糖促进IEC-6细胞迁移机理可能与细胞离子通道密切相关 | 第146-148页 |
| 3．2 四君子汤总多糖促进IEC-6细胞迁移机理可能与调节细胞的生长代谢有关 | 第148-149页 |
| 3．3 四君子汤总多糖促进IEC-6细胞迁移可能与影响细胞凋亡机制有关 | 第149页 |
| 3．4 四君子汤总多糖促进IEC-6细胞迁移极力可能与调节细胞内信号传导有关 | 第149-150页 |
| 4 小结 | 第150-151页 |
| 参考文献 | 第151-152页 |
| 第三部分 结论与展望 | 第152-162页 |
| 1 四君子汤总多糖具有促进IEC-6细胞增殖、迁移、粘附的作用 | 第153-154页 |
| 1．1 促进IEC-6细胞增值作用 | 第153页 |
| 1．2 对IEC-6细胞迁移的影响 | 第153页 |
| 1．3 IEC-6细胞粘附功能的影响 | 第153-154页 |
| 1．4 IEC-6细胞基因表达谱的影响 | 第154页 |
| 2 四君子汤总多糖无论是对IEC-6细胞增值，或者细胞迁移的作用均优于各单味药多糖，可能是各种单味药多糖综合作用的结果 | 第154-155页 |
| 3 多糖可能是四君子汤“益气健脾”药效的主要成分群之一 | 第155-156页 |
| 4 小肠上皮细胞可能是四君子汤总多糖的作用靶点之一 | 第156-157页 |
| 5 首次采用基因芯片技术和IEC-6细胞迁移体外模型研究中药复方多糖的作用机理，提示基因芯片技术在中医药领域中具有重要的应用价值 | 第157-159页 |
| 5．1 基因芯片技术在中药鉴定中的应用 | 第157-158页 |
| 5．2 基因芯片在中药有效成分筛选和新药开发中的应用 | 第158页 |
| 5．3 基因芯片在中药作用机理研究和中药新药研究开发中的应用 | 第158页 |
| 5．4 基因芯片在中药毒理方面的应用 | 第158-159页 |
| 5．5 基因芯片在中医药基本理论研究方面的应用 | 第159页 |
| 6 展望 | 第159-161页 |
| 参考文献 | 第161-162页 |
| 致谢 | 第162-163页 |
| 附录 | 第163-166页 |
| 附录A 本论文所使用的缩略语 | 第163-165页 |
| 附录B 博士在读期间发表的论文 | 第165-166页 |
| 附图 | 第166-171页 |
