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青藏高原水环境中H5N1亚型流感病毒的分离鉴定及其遗传演化分析

致谢第1-8页
摘要第8-9页
文献综述第9-30页
 1 概述第9页
 2 禽流感病毒的基因组结构及其特征第9-10页
 3 病毒基因编码蛋白的结构和功能第10-15页
   ·血凝素第10-12页
   ·神经氨酸酶第12-13页
   ·核蛋白第13页
   ·基质蛋白第13-14页
   ·聚合酶第14-15页
   ·非结构蛋白第15页
 4 禽流感致病性的分子生物学基础第15-22页
   ·病毒与宿主细胞膜的融合第15-19页
   ·病毒的脱壳和核的进入第19页
   ·病毒的复制和转录第19-20页
   ·核的输出第20-21页
   ·病毒在质膜上的组装第21页
   ·病毒的出芽和释放第21-22页
 5 水体是病原体的高危载体第22-25页
   ·水环境中病原体的分布第22页
   ·水环境中病原体的存活第22页
   ·水环境样品中病毒的富集第22-23页
   ·水环境中病毒的检测第23-25页
 6 野生水禽在传播水体中高致病禽流感病毒中的作用第25-28页
   ·野生水禽是低致病性禽流感病毒的自然宿主第25页
   ·禽流感病毒在几种野生水禽中的分布情况第25-27页
   ·野生水禽中禽流感病毒的遗传变异第27-28页
   ·野生水禽中高致病性禽流感H5N1 病毒亚型第28页
 7 结语第28-30页
引言第30-31页
试验一 硝酸纤维素膜检测水源中流感病毒方法的建立及其初步应用第31-37页
 1 材料第31页
 2 方法第31-33页
   ·模拟样品制备第31页
   ·病毒回收浓缩第31-32页
   ·硝酸纤维素膜过滤方法的初步应用第32-33页
 3 结果与分析第33-35页
   ·H9N2 禽流感病毒的病毒计数第33页
   ·膜过滤法对自来水和生活污水中禽流感病毒回收率测定第33-34页
   ·不同洗脱液洗脱效果比较第34-35页
   ·采集的水样品的浓缩检测结果第35页
   ·分离毒株的初步鉴定第35页
 4 结论与讨论第35-37页
试验二 青藏高原水源流感病毒H5 亚型分离株的致病性试验第37-45页
 1 材料第37页
 2 方法第37-39页
   ·TCID50 的测定第37页
   ·人工感染康贝尔鸭、Balb/C 小鼠试验的总体设计第37-39页
 3 结果与分析第39-43页
   ·TCID50 测定结果第39页
   ·眼观病理学检查第39-40页
   ·组织病理学检查结果第40-41页
   ·人工感染后各脏器病毒含量(ELD50)的测定结果第41-43页
 4 结论与讨论第43-45页
试验三 青藏高原水源流感病毒H5 亚型分离株8 个基因片段的克隆及分子特征分析第45-77页
 1 材料第45-46页
 2 方法第46-50页
   ·引物设计第46页
   ·病毒RNA 的提取第46-47页
   ·cDNA 合成第47页
   ·聚合酶链式反应(PCR)第47-48页
   ·PCR 产物的电泳分析第48页
   ·流感病毒8 个基因片段的克隆第48-50页
 3 结果与分析第50-72页
   ·PCR 产物电泳鉴定结果第50-52页
   ·毒株测序结果第52-60页
   ·流感病毒各基因的同源性与分子遗传演化分析第60-72页
 4 结论与讨论第72-77页
全文小结第77-78页
参考文献第78-84页
英文摘要第84-86页
攻读硕士期间发表的论文第86页

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