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精液氧化应激检测及其在辅助生殖技术中的应用

英文缩略语第1-7页
中文摘要第7-13页
英文摘要第13-17页
前言(文献综述)第17-25页
 1.男性生殖系统内ROS的种类第17页
 2.精液中ROS的防御系统第17-18页
 3.精液中ROS的来源第18页
 4.精液中ROS升高的相关因素第18-19页
     ·吸烟第18页
     ·环境中的物理因素(辐射、温度)第18-19页
     ·环境中的化学因素第19页
 5.ROS对精子结构和功能的影响第19-20页
     ·ROS对精子膜脂质过氧化反应的影响第19页
     ·ROS对精子DNA的影响第19-20页
 6.活性氧对蛋白质功能的影响第20页
 7.精液氧化应激的检测方法第20-22页
     ·精浆丙二醛含量的检测第20-21页
     ·SOD活性的检测第21页
     ·化学发光法直接检测ROS第21-22页
       ·鲁米诺发光体系第21-22页
       ·吖啶类化学物发光体系第22页
 8.精液ROS与辅助生殖技术第22-25页
第一部分 精液氧化应激与男性不育的相关性研究第25-38页
 1.材料和方法第26-29页
     ·研究对象第26页
     ·主要试剂第26页
     ·主要仪器设备第26-27页
     ·方法第27-29页
       ·精液收集和检测第27页
       ·用化学发光法检测精液ROS水平第27页
       ·白细胞FMLP激惹试验第27页
       ·原始精液与离心、洗涤后的精子悬液ROS水平的比较第27-28页
       ·精液标本的分离和保存第28页
       ·人类精子活力试验第28页
       ·统计分析第28-29页
 2.结果第29-35页
     ·研究对象的一般情况与各项精液检测结果第29-30页
     ·不育男性精液ROS水平分布第30-31页
     ·原始精液和离心洗涤后的精子悬液ROS水平的比较第31页
     ·ROS与精液常规指标的相关性分析第31-32页
     ·用志愿者精液ROS参数的95百分位数作为正常参考值评价不育男性精液第32页
     ·用白细胞激惹试验评估精液中白细胞浓度以及白细胞对精液ROS的影响第32-33页
     ·氧化应激阴性组和氧化应激阳性组精液参数的比较第33页
     ·人类精子活力试验通过匹配选择的三组精浆ROS水平第33-34页
     ·精子活力试验结果第34-35页
 3.讨论第35-38页
第二部分 一种检测精子质膜损伤的新技术第38-54页
 1.材料与方法第40-43页
     ·研究对象第40页
     ·主要试剂第40页
     ·主要仪器设备第40页
     ·方法第40-43页
       ·LIVE/DEAD Sperm Viability Kit操作方法第40-41页
       ·Transgreen/PI荧光复染法步骤第41页
       ·Transgreen/PI与SYBR-14/PI复染法检测精子存活率结果的相关性第41页
       ·不同的Transgreen和PI加入顺序对精子存活率检测结果的影响第41页
       ·Transgreen和PI染料对精子活率的影响第41-42页
       ·用Transgreen/PI测临床精子标本的存活率第42页
       ·SYBR-14和Transgreen进入精子并与DNA结合的时间曲线第42页
       ·用荧光酶标仪检测精子存活系数第42页
       ·评价荧光酶标仪和人工计数两种方法时间(观察者内)的可靠性第42页
       ·用荧光酶标仪检测不同密度的精子第42页
       ·评价荧光酶标仪和荧光显微镜下计数两种方法检测结果的相关性第42-43页
       ·统计学方法第43页
 2.结果第43-51页
     ·Transgreen/PI复染法荧光显微镜下示意图第43-44页
     ·Transgreen/PI与SYBR-14/PI复染法检测精子存活率结果的比较第44页
     ·精液中Transgreen和PI加入顺序对精子存活率检测结果的影响第44-45页
     ·Transgreen和PI染料对精子活率的影响第45-46页
     ·用Transgreen/PI检测不育男性精子在不同氧化应激状态下的存活率第46-47页
     ·Transgreen,SYBR-14穿膜进入精子过程中荧光强度的变化曲线第47-48页
     ·荧光酶标仪和荧光显微镜下计数两种方法的可靠性(重复性)的比较第48-49页
     ·用荧光酶标仪测量同一份精液稀释成不同密度组的存活系数第49-50页
     ·用荧光酶标仪和荧光显微镜下计数法检测结果的相关性第50-51页
 3.讨论第51-53页
     ·荧光复染法检测精子存活系数和存活率的原理第51页
     ·Transgreen/PI检测精子的存活率的有效性第51页
     ·Transgreen/PI方法的易操作性第51-52页
     ·Transgreen/PI复染法对精子运动的影响第52页
     ·荧光酶标仪结合荧光染料检测精子质膜完整性的原理:第52页
     ·使用Transgreen/PI荧光复染法测量临床精液标本第52页
     ·Transgreen和SYBR-14进入精子的时间曲线比较第52页
     ·荧光酶标仪测量存活系数和荧光显微镜下计数存活率可靠性的比较第52-53页
     ·不同密度精子存活系数的测量第53页
     ·荧光酶标仪测量存活系数和荧光显微镜下计数存活率的相关性分析第53页
 4.小结第53-54页
第三部分 中药补肾生精汤抗氧化治疗男性严重少、弱精子症的研究第54-61页
 1.临床资料第54-55页
     ·入选病例第54-55页
     ·分组方法及一般资料第55页
 2.方法第55-57页
     ·中药抗氧化治疗少弱精子症第55-56页
       ·干预措施第55页
       ·检测指标与方法第55-56页
       ·随访第56页
     ·ICSI辅助生殖技术第56-57页
       ·ICSI的方法第56页
       ·胚胎评价指标第56-57页
     ·统计学方法第57页
 3.结果第57-58页
     ·两组患者精液常规和ROS水平比较第57页
     ·两组患者妊娠结局第57-58页
     ·不良反应第58页
     ·接受ICSI治疗的部分患者卵子受精、胚胎发育和临床妊娠率结果比较第58页
 4.讨论第58-61页
参考文献第61-68页
硕士期间发表的论文第68-69页
致谢第69-70页

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