| 中文摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 英文缩略表 | 第13-14页 |
| 第一部分 综述 | 第14-30页 |
| 一 植物基因工程的现状和发展趋势 | 第14-19页 |
| ·植物基因工程的现状 | 第14-16页 |
| ·植物基因工程的发展趋势 | 第16-17页 |
| ·烟草基因工程的研究进展和意义 | 第17-19页 |
| ·抗性基因工程的研究 | 第17-18页 |
| ·品质改良基因工程的研究 | 第18页 |
| ·生物反应器系统基因工程的研究 | 第18-19页 |
| 二 根癌农杆菌Ti 质粒介导的遗传转化机制 | 第19-21页 |
| ·根癌农杆菌的生物学特性 | 第19-20页 |
| ·根癌农杆菌的内共生原理 | 第20页 |
| ·根癌农杆菌转化的优点 | 第20-21页 |
| ·影响转化效率的因素 | 第21页 |
| 三 卤代甲烷（MeX）酶促机制的研究 | 第21-27页 |
| ·卤代甲烷（CH3X）的自然源研究 | 第21-22页 |
| ·卤代甲烷的生物产生机制 | 第22-24页 |
| ·模式植物拟南芥的HOL 基因 | 第24-26页 |
| ·酶促机制产生卤代甲烷对植物的生物学意义 | 第26-27页 |
| 四 线虫 | 第27-29页 |
| 五 本文的立题依据及目的意义 | 第29-30页 |
| 第二部分 实验论文 | 第30-53页 |
| 一 实验材料及实验方法 | 第30-41页 |
| 1 实验材料 | 第30-32页 |
| ·植物材料 | 第30页 |
| ·菌株及质粒 | 第30页 |
| ·酶及化学试剂 | 第30页 |
| ·主要仪器设备 | 第30-31页 |
| ·培养基 | 第31页 |
| ·植物激素和抗生素的配制 | 第31-32页 |
| ·质粒提取液 | 第32页 |
| ·引物序列 | 第32页 |
| 2 实验方法 | 第32-41页 |
| ·质粒的提取 | 第32-33页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备及转化 | 第33页 |
| ·GeneClean 法从琼脂糖凝胶上回收DNA 片段 | 第33-34页 |
| ·农杆菌感受态的制备及转化 | 第34页 |
| ·烟草NC89 遗传转化 | 第34-36页 |
| ·无菌苗的获得 | 第34-35页 |
| ·烟草高频再生体系的建立 | 第35页 |
| ·根癌农杆菌的转化前培养 | 第35页 |
| ·转化 | 第35-36页 |
| ·转基因植株的PCR 检测 | 第36-37页 |
| ·CTAB 法微量提取基因组DNA | 第36页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测烟草总DNA | 第36-37页 |
| ·PCR 检测 | 第37页 |
| ·植物基因组DNA 的提取及Southern 杂交膜的制备 | 第37-39页 |
| ·CTAB 法大量提取植物基因组DNA | 第37-38页 |
| ·Southern 杂交膜的制备 | 第38-39页 |
| ·Southern 杂交分析 | 第39-40页 |
| ·cDNA 探针的制备 | 第39页 |
| ·杂交过程 | 第39-40页 |
| ·洗膜及显影 | 第40页 |
| ·Western 杂交分析 | 第40-41页 |
| ·烟草可溶性蛋白的提取 | 第40页 |
| ·SDS-PAGE | 第40-41页 |
| ·转膜 | 第41页 |
| ·Western 检测 | 第41页 |
| 二 实验结果与分析 | 第41-50页 |
| 1 植物表达载体的验证 | 第41-42页 |
| 2 NC89 烟草遗传转化体系的建立 | 第42-48页 |
| ·烟草叶片分化培养基中激素浓度的确定 | 第42-43页 |
| ·选择培养中抑菌抗生素浓度的确定 | 第43-45页 |
| ·选择压的确定 | 第45页 |
| ·预培养时间 | 第45-46页 |
| ·浸染用农杆菌的浓度和浸染时间 | 第46-47页 |
| ·共培养时间 | 第47页 |
| ·转化植株的获得 | 第47-48页 |
| 3 转基因植株的PCR 检测 | 第48-49页 |
| ·CTAB 法提取的植株的DNA 检测 | 第48页 |
| ·CTAB 法提取的植株DNA 的PCR 检测 | 第48-49页 |
| 4 转基因烟草的Southern 杂交分析 | 第49页 |
| 5 转基因烟草的Western 杂交分析 | 第49-50页 |
| 三 讨论 | 第50-53页 |
| 图版 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |