中文摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-7页 |
第一章 文献综述 | 第7-18页 |
·干扰素的研究背景 | 第7-11页 |
·干扰素的发现 | 第7页 |
·干扰素的产生及其结构特点 | 第7-8页 |
·干扰素的治病原理 | 第8-11页 |
·蛋白质的聚乙二醇修饰 | 第11-14页 |
·聚乙二醇的性质 | 第12页 |
·PEG 修饰蛋白的应用原理 | 第12-13页 |
·聚乙二醇的活化 | 第13-14页 |
·干扰素-αPEG 修饰的研究进展 | 第14-18页 |
·PEG-干扰素-α2a(Pegasys) | 第14-15页 |
·PEG-干扰素-α26(PEG-Intron) | 第15-16页 |
·PEG-干扰素-α(位点特异的PEG 化) | 第16-18页 |
第二章 干扰素-α的基因表达 | 第18-42页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第18-21页 |
·试剂 | 第19-20页 |
·仪器 | 第20页 |
·操作步骤 | 第20-21页 |
·质粒双酶切 | 第21-24页 |
·质粒的提取 | 第21-23页 |
·DNA 电泳 | 第23-24页 |
·SDS-PAGE 检测目的蛋白表达 | 第24-28页 |
·目的蛋白的诱导表达 | 第24-25页 |
·SDS-PAGE | 第25-28页 |
·SDS-PAGE 分析蛋白表达产物 | 第28-30页 |
·试剂 | 第29-30页 |
·实验步骤 | 第30页 |
·WESTERN BLOT 分析诱导表达后细菌裂解物 | 第30-33页 |
·主要试剂及仪器 | 第30页 |
·Western Blot 方法步骤 | 第30-33页 |
·蛋白表达条件的优化 | 第33-34页 |
·实验结果及讨论 | 第34-39页 |
·感受态细胞的制备和转化 | 第34页 |
·质粒双酶切鉴定 | 第34-35页 |
·SDS-PAGE 检测目的蛋白表达 | 第35-36页 |
·SDS-PAGE 分析蛋白表达产物 | 第36-38页 |
·Western Blot 分析诱导表达后细菌裂解物 | 第38-39页 |
·蛋白表达条件的优化 | 第39-42页 |
第三章 目的蛋白的分离纯化 | 第42-54页 |
·包涵体的变性复性 | 第42-44页 |
·主要试剂 | 第43页 |
·实验步骤 | 第43-44页 |
·阳离子交换层析 | 第44-46页 |
·主要试剂及仪器 | 第45页 |
·实验步骤 | 第45-46页 |
·蛋白质的含量测定 | 第46-47页 |
·试剂及仪器 | 第46-47页 |
·实验步骤 | 第47页 |
·层析的条件优化 | 第47-48页 |
·实验结果与讨论 | 第48-54页 |
·包涵体的变性复性 | 第48页 |
·阳离子交换层析 | 第48-50页 |
·蛋白质的含量测定 | 第50-51页 |
·层析的条件优化 | 第51-54页 |
参考文献 | 第54-56页 |
发表论文和科研情况说明 | 第56-57页 |
致谢 | 第57页 |