中国水仙NTLEAFY及NTA基因的克隆与表达分析
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 缩写词 | 第7-10页 |
| 1 引言 | 第10-24页 |
| ·花卉基因工程研究进展 | 第10-19页 |
| ·花色基因工程研究进展 | 第11页 |
| ·花香味基因工程研究进展 | 第11-12页 |
| ·花发育基因工程研究进展 | 第12-18页 |
| ·花卉抗性基因研究进展 | 第18-19页 |
| ·实时荧光定量PCR研究进展 | 第19-20页 |
| ·中国水仙花研究进展 | 第20-22页 |
| ·中国水仙种质资源及培育 | 第20-21页 |
| ·中国水仙生物技术研究现状 | 第21-22页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第22-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-40页 |
| ·实验材料 | 第24-26页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·菌株和载体 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24-25页 |
| ·使用软件 | 第25页 |
| ·主要使用仪器 | 第25页 |
| ·引物 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-40页 |
| ·中国水仙的培养和处理 | 第26页 |
| ·总RNA提取与cDNA第一链合成 | 第26-27页 |
| ·RACE第一链cDNA的合成 | 第27-28页 |
| ·PCR反应体系及琼脂糖凝胶电泳 | 第28-29页 |
| ·PCR产物的回收纯化 | 第29-30页 |
| ·克隆载体的连接 | 第30页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌感受态细胞 | 第30-32页 |
| ·挑单菌落及菌液PCR | 第32页 |
| ·质粒DNA提取与酶切分析 | 第32-33页 |
| ·序列的测定与分析 | 第33页 |
| ·荧光定量PCR样品cDNA的准备 | 第33页 |
| ·荧光定量PCR分析基因的表达量差异 | 第33-34页 |
| ·载体构建 | 第34-36页 |
| ·根癌农杆菌感受态细胞制备及转化 | 第36-37页 |
| ·拟南芥的培养 | 第37页 |
| ·根癌农杆菌侵染拟南芥花序 | 第37-38页 |
| ·拟南芥种子的筛选 | 第38页 |
| ·转基因植株基因组DNA检测 | 第38-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-61页 |
| ·NTLEAFY基因的克隆及表达分析 | 第40-53页 |
| ·NTLEAFY基因的克隆及序列分析 | 第40-44页 |
| ·NTLEAFY基因编码蛋白结构模拟 | 第44-45页 |
| ·NTLEAFY基因植物表达载体构建 | 第45-47页 |
| ·NTLEAFY基因干扰载体构建 | 第47页 |
| ·NTLEAFY基因转化拟南芥及抗性筛选 | 第47-48页 |
| ·拟南芥转基因植株的检测 | 第48-49页 |
| ·NTLEAFY基因表达分析 | 第49-53页 |
| ·NTA基因的克隆及表达分析 | 第53-61页 |
| ·NTA基因的克隆及序列分析 | 第53-57页 |
| ·NTA基因编码蛋白结构模拟 | 第57-58页 |
| ·NTA基因植物表达载体构建 | 第58-59页 |
| ·NTA基因转化拟南芥及抗性筛选 | 第59-60页 |
| ·拟南芥转基因植株的检测 | 第60-61页 |
| 4 讨论 | 第61-64页 |
| 5 结论 | 第64-66页 |
| 6 展望 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-79页 |
| 附图 | 第79-81页 |
| 个人简介 | 第81-82页 |
| 第一导师简介 | 第82-83页 |
| 第二导师简介 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84页 |