| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 前言 | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-19页 |
| ·丝状真菌的转化系统 | 第11-13页 |
| ·丝状真菌转化方法 | 第11-12页 |
| ·CaCl_2-PEG介导的遗传转化 | 第11页 |
| ·电激介导的遗传转化 | 第11-12页 |
| ·限制性内切酶介导的遗传转化 | 第12页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化 | 第12页 |
| ·真菌转化选择性标记 | 第12-13页 |
| ·营养缺陷型标记 | 第13页 |
| ·抗药性标记 | 第13页 |
| ·泛素—蛋白酶体途径 | 第13-18页 |
| ·泛素—蛋白酶体途径的组成系统 | 第14-15页 |
| ·泛素 | 第14页 |
| ·泛素活化酶E1 | 第14页 |
| ·泛素结合酶E2 | 第14-15页 |
| ·泛素连接酶E3 | 第15页 |
| ·26S蛋白酶体 | 第15页 |
| ·去泛素化系统 | 第15-18页 |
| ·泛素羧基末端水解酶家族 | 第16页 |
| ·泛素特异性加工酶家族 | 第16页 |
| ·卵巢肿瘤蛋白酶OTU | 第16-17页 |
| ·Ataxin-3 | 第17页 |
| ·MP N(+)/JAMM蛋白酶 | 第17页 |
| ·去泛素化蛋白酶CREB | 第17页 |
| ·去泛素化蛋白酶 | 第17-18页 |
| ·丝状真菌的碳源代谢阻遏 | 第18-19页 |
| 第二章 材料与方法 | 第19-31页 |
| ·实验材料 | 第19-24页 |
| ·菌株 | 第19页 |
| ·PCR引物 | 第19-20页 |
| ·培养基和培养条件 | 第20-21页 |
| ·常用储备液及缓冲液 | 第21-22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| ·菌种保藏技术 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-31页 |
| ·double-joint PCR | 第24页 |
| ·制备斜卧青霉原生质体 | 第24-25页 |
| ·原生质体转化 | 第25页 |
| ·T载体连接与转化 | 第25-26页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第26页 |
| ·△pyrG：：ptrA敲除盒的构建 | 第26-27页 |
| ·△creB：：pyrG敲除盒的构建 | 第27-28页 |
| ·△creC：：pyrG敲除盒的构建 | 第28-30页 |
| ·纤维素酶活的测定 | 第30页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第30页 |
| ·生物量的测定 | 第30页 |
| ·转化子表型分析 | 第30-31页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第31-50页 |
| ·可重复利用筛选标记转化系统的建立 | 第31-40页 |
| ·△pyrG：：ptrA敲除盒的构建 | 第31-32页 |
| ·△pyrG：：ptrA突变株的构建 | 第32-33页 |
| ·构建带有同源臂部分重复序列的△creB：：pyrG敲除盒 | 第33-34页 |
| ·△creB突变株的构建 | 第34-35页 |
| ·△creB突变株的Southern blot分析 | 第35-36页 |
| ·构建带有同源臂部分重复序列的△creC：：pyrG敲除盒 | 第36-37页 |
| ·△creC突变株的构建 | 第37-38页 |
| ·△creC突变株的Southern blot分析 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-40页 |
| ·斜卧青霉去泛素化酶CREB、CREC的功能研究 | 第40-50页 |
| ·CREB的缺失对菌株生理特性的影响 | 第40-44页 |
| ·表型分析 | 第40-41页 |
| ·生物量的测定 | 第41-42页 |
| ·发酵液pH值的测定 | 第42页 |
| ·产纤维素酶活特性分析 | 第42-43页 |
| ·胞外总蛋白质含量的测定 | 第43-44页 |
| ·CREC缺失对菌株生理特性的影响 | 第44-48页 |
| ·表型分析 | 第44-45页 |
| ·生物量的测定 | 第45-46页 |
| ·发酵液pH值的测定 | 第46页 |
| ·产纤维素酶活特性分析 | 第46-47页 |
| ·胞外总蛋白质含量的测定 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| 第四章 结论 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 学术成果 | 第57页 |
