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拟南芥NADPH氧化酶(D和F型)与磷脂酸相互作用及其在ABA信号转导中的关系研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-11页
符号及缩略语(Abbreviation)表第11-13页
第一章 文献综述第13-36页
 第一节 动物NADPH氧化酶及其研究进展第13-16页
 第二节 植物NADPH氧化酶的功能与调控第16-30页
 第三节 植物磷脂酶D及其信号作用第30-34页
 第四节 研究展望第34-36页
第二章 AtrbohD和AtrbohF基因的克隆、原核表达及与PA结合第36-60页
 引言第36-38页
 1 材料与方法第38-47页
   ·材料第38页
   ·实验方法第38-47页
 2 结果与分析第47-58页
   ·AtrbohD和AtrbohF全长cDNA和片段的克隆第47-49页
   ·AtrbohD和AtrbohF序列生物信息学分析第49-51页
   ·AtrbohD和AtrbohF克隆载体的构建及鉴定第51-52页
   ·AtrbohD和AtrbohF原核表达载体的构建及鉴定第52-53页
   ·Atrbohs重组融合蛋白在E.coli中表达、纯化及Western印迹第53-54页
   ·以脂肪western印迹法(Fat western-blot)研究PA-Atrbohs结合第54-56页
   ·以ELISA法研究PA-Atrbohs结合第56-58页
 3 讨论第58-60页
第三章 AtrbohD和AtrbohF蛋白与PA结合位点鉴定第60-79页
 引言第60-61页
 1 材料与方法第61-68页
   ·材料第61页
   ·方法第61-68页
 2 结果与分析第68-77页
   ·AtrbohD截断片段的构建、原核表达及western印迹第68-71页
   ·应用定点突变实验鉴定PA-AtrbohD相互作用氨基酸位点第71-73页
   ·AtrbohF片段构建、原核表达及western印迹第73-74页
   ·NBD-PC荧光标记和免疫共沉淀第74-77页
 3 讨论第77-79页
第四章 PLDα1调节拟南芥Atrbohs来源的ROS产生并参与ABA诱导气孔关闭第79-99页
 引言第79-80页
 1 材料与方法第80-84页
   ·材料第80-81页
   ·实验方法第81-84页
 2 结果与分析第84-95页
   ·AtrbohD在叶肉细胞原生质体的YFP定位第84-86页
   ·拟南芥pldα1和atrbohs突变体鉴定及表型分析第86-89页
   ·PLDα1来源的PA调控AtrbohD和AtrbohF诱导的气孔关闭第89-92页
   ·在ABA诱导拟南芥气孔关闭过程中,PLDα1介导AtrbohD和AtrbohF来源的ROS产生第92-95页
 3 讨论第95-99页
第五章 全文结论及创新之处第99-101页
参考文献第101-115页
攻读博士学位期间发表的学术论文目录第115-117页
致谢第117页

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