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外源基因清除技术(Gene-deletor)在转基因油菜中的应用研究

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
第一部分 文献综述第9-23页
 1.转基因油菜的研究进展第9-17页
   ·油菜遗传转化方法第9-12页
     ·农杆菌介导法第9-10页
     ·基因枪法第10页
     ·PEG法第10页
     ·激光微束穿刺法第10-11页
     ·花粉管通道法第11页
     ·in planta转化法第11-12页
   ·油菜遗传转化受体第12-13页
     ·下胚轴、子叶受体第12页
     ·花药受体第12-13页
     ·小孢子、茎段受体第13页
   ·油菜遗传转化基因第13-15页
     ·油酸脱饱和酶基因第13-14页
     ·抗虫基因第14页
     ·抗病基因第14-15页
     ·雄性不育基因第15页
   ·油菜选择标记基因第15-17页
     ·抗抗生素基因第15-16页
     ·抗除草剂基因第16页
     ·绿色荧光蛋白第16-17页
 2.转基因作物与环境安全性第17-19页
   ·国内外转基因作物现状第17页
   ·转基因作物环境安全性问题第17-19页
     ·"杂草化"问题第18页
     ·影响生物多样性第18-19页
     ·花粉飘逸问题第19页
 3. 位点特异性重组酶系统第19-22页
   ·Cre/lox重组系统第19-20页
   ·R/RS重组系统第20页
   ·FLP/FRT重组系统第20-21页
   ·Lox/FRT重组系统第21-22页
 4.本文研究的目的及意义第22-23页
第二部分 农杆菌介导法遗传转化油菜及转基因植株外源基因清除效率分析第23-44页
 前言第23-24页
 1.材料方法第24-33页
   ·实验材料第24页
     ·下胚轴第24页
     ·花柄第24页
   ·主要试剂及配方第24-27页
   ·菌株与质粒第27-29页
     ·感受态细胞的制备第28页
     ·感受态细胞的转化第28页
     ·重组质粒PCR验证第28-29页
   ·花粉生活力检测第29页
   ·花粉GUS组织化学检测第29页
   ·转基因植株花粉外源基因清除效率检测第29页
   ·遗传转化方法第29-30页
   ·再生植株检测第30-33页
     ·GUS组织化学染色第30页
     ·CTAB法小量提取油菜基因组DNA第30页
     ·PCR分子检测第30-31页
     ·Southern印迹杂交第31-33页
       ·油菜基因组DNA提取、酶切及电泳第31页
       ·地高辛标记探针的制备第31-32页
       ·Southern印迹第32页
       ·预杂交和杂交第32页
       ·洗膜第32页
       ·检测杂交信号第32-33页
 2.结果分析第33-40页
   ·重组质粒PCR验证第33页
   ·转基因植株的获得第33-37页
     ·再生植株的抗性筛选第33-35页
     ·GUS组织化学检测第35-36页
     ·PCR分子鉴定第36页
     ·Southern印迹杂交检测第36-37页
   ·转基因油菜植株移栽及性状观察第37-38页
   ·花粉生活力检测第38-39页
   ·花粉GUS组织化学检测第39页
   ·转基因植株花粉外源基因清除效率分析第39-40页
 3.讨论第40-43页
 4.展望第43-44页
参考文献第44-51页
缩略词第51-52页
致谢第52-53页
附录第53-55页

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