| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 引言 | 第9-11页 |
| 正文 | 第11-59页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-20页 |
| 一、青蒿素的发现 | 第11-12页 |
| 二、青蒿素的化学结构及合成 | 第12-13页 |
| 三、青蒿素的生物合成 | 第13-16页 |
| (一) 植物萜类物质及其代谢途径 | 第13-15页 |
| (二) 青蒿素的生物合成途径 | 第15-16页 |
| 四、青蒿素高产的调控研究 | 第16-20页 |
| (一) 青蒿素生物合成的基因调控 | 第16-18页 |
| (二) 青蒿素生物合成的冷胁迫等非生物胁迫调控研究进展 | 第18-20页 |
| 第二章 抗重组青蒿素合成酶多克隆抗体制备 | 第20-31页 |
| 一、材料和试剂 | 第20-21页 |
| (一) 质粒与菌株 | 第20页 |
| (二) 主要试剂 | 第20页 |
| (三) 主要仪器 | 第20-21页 |
| 二、实验方法 | 第21-26页 |
| (一) ADS、CYP71AV1、CPR抗原的制备 | 第21-24页 |
| (二) ADS、CYP71AV1、CPR多克隆抗体的制备 | 第24页 |
| (三) 蛋白质浓度测定 | 第24-25页 |
| (四) ELISA检测 | 第25-26页 |
| 三、结果 | 第26-29页 |
| (一) 重组抗原蛋白的纯化与鉴定 | 第26-27页 |
| (二) 抗血清中多克隆抗体滴度测定 | 第27-28页 |
| (三) ELISA标准曲线的制作 | 第28-29页 |
| 四、讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 青蒿素合成基因表达的组织及发育调节 | 第31-37页 |
| 一、材料和试剂 | 第31页 |
| (一) 植物材料 | 第31页 |
| (二) 主要试剂 | 第31页 |
| (三) 主要仪器 | 第31页 |
| 二、实验方法 | 第31-32页 |
| (一) 植物总蛋白提取 | 第31-32页 |
| (二) ELISA测定 | 第32页 |
| (三) 计算 | 第32页 |
| 三、结果 | 第32-36页 |
| (一) 开花前不同组织中青蒿素合成酶的浓度变化 | 第32-34页 |
| (二) 开花后不同组织中青蒿素合成酶的浓度变化 | 第34-35页 |
| (三) 样品不同稀释度对免疫定量测定的影响 | 第35-36页 |
| 四、讨论 | 第36-37页 |
| 第四章 氟定酮对青蒿素合成mRNA水平及酶浓度的影响 | 第37-50页 |
| 一、材料和试剂 | 第37-38页 |
| (一) 植物材料 | 第37页 |
| (二) 主要试剂 | 第37-38页 |
| (三) 主要仪器 | 第38页 |
| 二、实验方法 | 第38-41页 |
| (一) 氟定酮处理方法 | 第38页 |
| (二) cDNA模板的制备 | 第38-40页 |
| (三) 引物设计 | 第40页 |
| (四) 荧光定量RT-RCR检测 | 第40-41页 |
| (五) ELISA | 第41页 |
| 三、结果 | 第41-48页 |
| (一) 氟定酮调节ADS、CYP71AV1 mRNA水平的时间进程 | 第41-44页 |
| (二) 氟定酮调节CPR、DBR2 mRNA水平的时间进程 | 第44-45页 |
| (三) 氟定酮与冷处理对青蒿素合成mRNA水平的协同调节 | 第45-47页 |
| (四) 氟定酮及其与冷处理对青蒿素合成酶的协同调节 | 第47-48页 |
| 四、讨论 | 第48-50页 |
| 第五章 氟定酮诱导~1O_2对青蒿素含量的影响 | 第50-59页 |
| 一、材料和试剂 | 第50页 |
| (一) 植株 | 第50页 |
| (二) 试剂 | 第50页 |
| (三) 仪器设备 | 第50页 |
| 二、实验方法 | 第50-53页 |
| (一) ~1O_2检测液的配制 | 第50-51页 |
| (二) 氟定酮处理 | 第51页 |
| (三) 青蒿素含量测定 | 第51-53页 |
| 三、结果 | 第53-57页 |
| ㈠ 氟定酮处理后植株的形态变化 | 第53页 |
| ㈡ 氟定酮诱导的~1O_2水平 | 第53-54页 |
| ㈢ 氟定酮与冷处理协同诱导的~1O_2水平 | 第54-56页 |
| ㈣ 青蒿素标准曲线的制作 | 第56页 |
| ㈤ 青蒿素含量的测定 | 第56-57页 |
| 四、讨论 | 第57-59页 |
| 结语 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 附录 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
