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小菜蛾对阿维菌素抗性的分子机制研究

摘要第1-5页
SUMMARY第5-11页
第一章 文献综述第11-20页
   ·小菜蛾对阿维菌素的抗药性研究进展第11-13页
     ·阿维菌素类药物的作用机制第12页
     ·小菜蛾对阿维菌素的抗药性研究进展第12-13页
   ·GluCl 受体国内外研究进展第13-16页
     ·GluCl 受体的分子特性研究第14-16页
     ·GluCl 受体的功能研究第16页
   ·荧光定量PCR 技术第16-18页
     ·荧光定量的原理第17页
     ·荧光定量的方法第17-18页
     ·实时荧光定量 PCR 技术的应用第18页
   ·研究内容和目的第18-20页
     ·研究内容和方法第18-19页
     ·本研究的目的意义第19页
     ·技术路线第19-20页
第二章 小菜蛾对阿维菌素的抗性选育及交互抗性研究第20-25页
   ·材料与方法第20-21页
     ·主要仪器与材料第20页
     ·供试昆虫第20页
     ·供试药剂第20-21页
   ·主要研究法第21-22页
     ·小菜蛾的饲养第21-22页
     ·阿维菌素抗性小菜蛾的汰选第22页
     ·小菜蛾的生物测定及交互抗性测定第22页
   ·结果与分析第22-24页
     ·阿维菌素抗性小菜蛾的选育第22-23页
     ·小菜蛾的交互抗性测定第23-24页
   ·小结与讨论第24-25页
第三章 小菜蛾 GluClα亚基的克隆和序列分析第25-58页
   ·材料与方法第25-28页
     ·供试小菜蛾第25页
     ·主要仪器第25-26页
     ·供试药剂第26页
     ·主要试剂及试剂盒第26-27页
     ·培养基及常用溶液第27-28页
     ·引物和测序第28页
   ·小菜蛾 GluCl 受体α亚基片段的克隆第28-34页
     ·总 RNA 提取第28-29页
     ·RNA 甲醛凝胶变性电泳检测第29页
     ·小菜蛾 cDNA 第一链的合成第29-30页
     ·小菜蛾 GluClα亚基 cDNA 片段的克隆第30-31页
     ·PCR 产物的回收与纯化第31页
     ·PCR 纯化产物与PEASY-T1 载体的连接第31-32页
     ·PCR 纯化产物与PEASY-T1 载体的转化第32页
     ·阳性克隆检测第32-34页
     ·序列测定第34页
   ·小菜蛾 GluClα亚基全长序列的克隆第34-44页
     ·材料与方法第34-35页
     ·实验方法第35-43页
     ·PCR 产物的回收与纯化第43页
     ·载体连接第43页
     ·连接产物转化到感受态细胞第43页
     ·阳性克隆检测第43页
     ·序列测定第43页
     ·cDNA 全长序列的验证第43页
     ·生物信息学分析第43-44页
   ·结果与分析第44-51页
     ·小菜蛾总RNA 的提取第44页
     ·小菜蛾 GluCl 受体α亚基片段序列的克隆第44-46页
     ·小菜蛾 GluClα全长基因的克隆、鉴定及序列分析第46-48页
     ·cDNA 全长序列的验证第48页
     ·小菜蛾 GluClα亚基 cDNA 全长序列及推测的氨基酸序列第48-51页
   ·GluClα推测的氨基酸生物信息学分析第51-56页
     ·GluClα推测的氨基酸序列信号肽分析第51页
     ·GluClα推导氨基酸二级结构预测第51-52页
     ·GluClα氨基酸跨膜结构预测第52页
     ·GluClα编码蛋白的氨基酸组成第52-53页
     ·GluClα推导氨基酸亲脂性分析第53-54页
     ·GluClα蛋白的分子量及等电点第54页
     ·小菜蛾抗性和敏感种群 GluClα核苷酸及氨基酸的序列对比分析第54-56页
   ·小结与讨论第56-58页
第四章 小菜蛾 GluClα亚基基因的荧光定量表达分析第58-69页
   ·材料和方法第58-63页
     ·试验材料第58-59页
     ·试验方法第59-63页
   ·结果分析第63-67页
     ·传统PCR 验证实时荧光定量PCR 引物特异性第63-64页
     ·实时荧光定量 PCR 条件的优化第64页
     ·标准曲线和扩增曲线的建立第64-65页
     ·扩增曲线的建立第65-66页
     ·熔解曲线的建立第66-67页
     ·可重复性 GluCl 基因表达差异的检测第67页
   ·小结和讨论第67-69页
第五章 全文结论第69-70页
   ·结论第69页
   ·展望第69-70页
致谢第70-71页
参考文献第71-76页
作者简介第76-77页
导师简介第77页

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