摘要 | 第1-5页 |
SUMMARY | 第5-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-20页 |
·小菜蛾对阿维菌素的抗药性研究进展 | 第11-13页 |
·阿维菌素类药物的作用机制 | 第12页 |
·小菜蛾对阿维菌素的抗药性研究进展 | 第12-13页 |
·GluCl 受体国内外研究进展 | 第13-16页 |
·GluCl 受体的分子特性研究 | 第14-16页 |
·GluCl 受体的功能研究 | 第16页 |
·荧光定量PCR 技术 | 第16-18页 |
·荧光定量的原理 | 第17页 |
·荧光定量的方法 | 第17-18页 |
·实时荧光定量 PCR 技术的应用 | 第18页 |
·研究内容和目的 | 第18-20页 |
·研究内容和方法 | 第18-19页 |
·本研究的目的意义 | 第19页 |
·技术路线 | 第19-20页 |
第二章 小菜蛾对阿维菌素的抗性选育及交互抗性研究 | 第20-25页 |
·材料与方法 | 第20-21页 |
·主要仪器与材料 | 第20页 |
·供试昆虫 | 第20页 |
·供试药剂 | 第20-21页 |
·主要研究法 | 第21-22页 |
·小菜蛾的饲养 | 第21-22页 |
·阿维菌素抗性小菜蛾的汰选 | 第22页 |
·小菜蛾的生物测定及交互抗性测定 | 第22页 |
·结果与分析 | 第22-24页 |
·阿维菌素抗性小菜蛾的选育 | 第22-23页 |
·小菜蛾的交互抗性测定 | 第23-24页 |
·小结与讨论 | 第24-25页 |
第三章 小菜蛾 GluClα亚基的克隆和序列分析 | 第25-58页 |
·材料与方法 | 第25-28页 |
·供试小菜蛾 | 第25页 |
·主要仪器 | 第25-26页 |
·供试药剂 | 第26页 |
·主要试剂及试剂盒 | 第26-27页 |
·培养基及常用溶液 | 第27-28页 |
·引物和测序 | 第28页 |
·小菜蛾 GluCl 受体α亚基片段的克隆 | 第28-34页 |
·总 RNA 提取 | 第28-29页 |
·RNA 甲醛凝胶变性电泳检测 | 第29页 |
·小菜蛾 cDNA 第一链的合成 | 第29-30页 |
·小菜蛾 GluClα亚基 cDNA 片段的克隆 | 第30-31页 |
·PCR 产物的回收与纯化 | 第31页 |
·PCR 纯化产物与PEASY-T1 载体的连接 | 第31-32页 |
·PCR 纯化产物与PEASY-T1 载体的转化 | 第32页 |
·阳性克隆检测 | 第32-34页 |
·序列测定 | 第34页 |
·小菜蛾 GluClα亚基全长序列的克隆 | 第34-44页 |
·材料与方法 | 第34-35页 |
·实验方法 | 第35-43页 |
·PCR 产物的回收与纯化 | 第43页 |
·载体连接 | 第43页 |
·连接产物转化到感受态细胞 | 第43页 |
·阳性克隆检测 | 第43页 |
·序列测定 | 第43页 |
·cDNA 全长序列的验证 | 第43页 |
·生物信息学分析 | 第43-44页 |
·结果与分析 | 第44-51页 |
·小菜蛾总RNA 的提取 | 第44页 |
·小菜蛾 GluCl 受体α亚基片段序列的克隆 | 第44-46页 |
·小菜蛾 GluClα全长基因的克隆、鉴定及序列分析 | 第46-48页 |
·cDNA 全长序列的验证 | 第48页 |
·小菜蛾 GluClα亚基 cDNA 全长序列及推测的氨基酸序列 | 第48-51页 |
·GluClα推测的氨基酸生物信息学分析 | 第51-56页 |
·GluClα推测的氨基酸序列信号肽分析 | 第51页 |
·GluClα推导氨基酸二级结构预测 | 第51-52页 |
·GluClα氨基酸跨膜结构预测 | 第52页 |
·GluClα编码蛋白的氨基酸组成 | 第52-53页 |
·GluClα推导氨基酸亲脂性分析 | 第53-54页 |
·GluClα蛋白的分子量及等电点 | 第54页 |
·小菜蛾抗性和敏感种群 GluClα核苷酸及氨基酸的序列对比分析 | 第54-56页 |
·小结与讨论 | 第56-58页 |
第四章 小菜蛾 GluClα亚基基因的荧光定量表达分析 | 第58-69页 |
·材料和方法 | 第58-63页 |
·试验材料 | 第58-59页 |
·试验方法 | 第59-63页 |
·结果分析 | 第63-67页 |
·传统PCR 验证实时荧光定量PCR 引物特异性 | 第63-64页 |
·实时荧光定量 PCR 条件的优化 | 第64页 |
·标准曲线和扩增曲线的建立 | 第64-65页 |
·扩增曲线的建立 | 第65-66页 |
·熔解曲线的建立 | 第66-67页 |
·可重复性 GluCl 基因表达差异的检测 | 第67页 |
·小结和讨论 | 第67-69页 |
第五章 全文结论 | 第69-70页 |
·结论 | 第69页 |
·展望 | 第69-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-76页 |
作者简介 | 第76-77页 |
导师简介 | 第77页 |