| 摘要 | 第1-13页 |
| Abstract | 第13-15页 |
| 1 前言 | 第15-27页 |
| ·胚胎着床的研究进展 | 第15-20页 |
| ·胚胎着床与子宫蜕膜化 | 第15-17页 |
| ·胚胎着床与子宫蜕膜化的分子调控 | 第17-20页 |
| ·CD63的研究进展 | 第20-25页 |
| ·四次跨膜蛋白超家族 | 第20-21页 |
| ·CD63的基因结构 | 第21-22页 |
| ·CD63与肿瘤 | 第22-23页 |
| ·CD63与人免疫缺陷病毒1 | 第23-24页 |
| ·CD63与生殖系统 | 第24-25页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第25-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-49页 |
| ·实验动物 | 第27页 |
| ·实验动物模型及取材 | 第27-28页 |
| ·早期妊娠 | 第27页 |
| ·假孕 | 第27页 |
| ·延迟着床与激活 | 第27-28页 |
| ·人工诱导蜕膜化 | 第28页 |
| ·类固醇激素处理 | 第28页 |
| ·小鼠体外诱导蜕膜化模型 | 第28-30页 |
| ·所需药品及试剂 | 第28-29页 |
| ·小鼠子宫内膜基质细胞的分离培养流程 | 第29-30页 |
| ·小鼠子宫内膜基质细胞的体外诱导蜕膜化 | 第30页 |
| ·CD63基因的克隆及cRNA探针的制备 | 第30-35页 |
| ·菌种及主要分子生物学试剂 | 第30页 |
| ·PCR引物设计 | 第30-31页 |
| ·组织中总RNA的提取 | 第31页 |
| ·DNA的消化 | 第31页 |
| ·反转录 | 第31-32页 |
| ·PCR反应 | 第32页 |
| ·扩增产物的回收及载体连接 | 第32-33页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第33-34页 |
| ·重组质粒的转化、测序及方向鉴定 | 第34页 |
| ·cRNA片段的地高辛标记 | 第34-35页 |
| ·原位杂交 | 第35-37页 |
| ·载玻片的处理 | 第35页 |
| ·冰冻切片方法 | 第35页 |
| ·杂交试剂及溶液 | 第35-36页 |
| ·原位杂交流程 | 第36-37页 |
| ·Real-Time PCR | 第37-40页 |
| ·实时定量PCR引物的设计 | 第37-38页 |
| ·总RNA的提取 | 第38页 |
| ·DNA的消化 | 第38页 |
| ·反转录反应 | 第38-39页 |
| ·实时定量PCR反应 | 第39页 |
| ·融解曲线的分析 | 第39-40页 |
| ·~(ΔΔ)Ct法分析基因表达的相对差异 | 第40页 |
| ·Western Blot | 第40-44页 |
| ·样品的提取 | 第40-41页 |
| ·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第41-42页 |
| ·Immunoblot及显影 | 第42页 |
| ·Western blot试剂及溶液 | 第42-44页 |
| ·CD63启动子分析 | 第44-49页 |
| ·CD63启动子载体的构建 | 第44-46页 |
| ·细胞培养 | 第46-47页 |
| ·转染细胞 | 第47-48页 |
| ·荧光素酶活性分析 | 第48-49页 |
| 3 结果 | 第49-63页 |
| ·CD63基因的克隆和鉴定 | 第49页 |
| ·CD63基因在围着床期小鼠子宫中的表达 | 第49-52页 |
| ·原位杂交检测CD63基因在围着床期小鼠子宫中的表达 | 第49-50页 |
| ·Real Time PCR验证CD63基因在妊娠第5天子宫中的表达 | 第50-51页 |
| ·Western blot检测妊娠第5天子宫中CD63蛋白水平及变化 | 第51-52页 |
| ·活性胚泡对围着床期子宫中CD63基因表达的影响 | 第52-54页 |
| ·原位杂交检测CD63基因在假孕子宫中的表达 | 第52-53页 |
| ·原位杂交检测CD63基因在延迟着床和激活子宫中的表达 | 第53-54页 |
| ·CD63基因在蜕膜化子宫中的表达 | 第54-56页 |
| ·原位杂交检测CD63基因在人工蜕膜化子宫中的表达 | 第54-55页 |
| ·Real Time PCR验证CD63基因在蜕膜化子宫中的表达 | 第55-56页 |
| ·类固醇激素对CD63基因在子宫中表达的影响 | 第56-57页 |
| ·CD63基因在体外蜕膜化过程中的表达 | 第57-59页 |
| ·Dtprp在体外蜕膜化模型中的表达 | 第57-58页 |
| ·CD63 mRNA在体外蜕膜化过程中的表达 | 第58-59页 |
| ·C/EBP β对CD63基因启动子活性的调节 | 第59-63页 |
| 4 讨论 | 第63-67页 |
| ·CD63在围着床期子宫中的表达 | 第63-64页 |
| ·围着床期子宫中CD63基因的调节 | 第64页 |
| ·CD63在体外蜕膜化过程中的表达 | 第64-65页 |
| ·转录因子C/EBP β对CD63表达的调节 | 第65-67页 |
| 5 结论 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
