目录 | 第1-5页 |
摘要 | 第5-8页 |
Abstract | 第8-12页 |
第一章 绪论 | 第12-36页 |
第一节 生物质谱及蛋白质组学背景知识 | 第13-16页 |
1 生物质谱 | 第13-14页 |
2 蛋白质组学 | 第14-16页 |
第二节 生物质谱及蛋白质组学相关研究前沿 | 第16-24页 |
1 基质辅助激光解析离子化原理研究 | 第16页 |
2 无机光敏基底辅助的激光诱导样品离子化 | 第16-17页 |
3 纳米氧化钛等无机半导体材料的光电化学性质 | 第17-18页 |
4 基于质谱的各种样品碎裂技术 | 第18-21页 |
5 肽段标记技术 | 第21页 |
6 蛋白质组学后修饰研究 | 第21-23页 |
7 固定化酶技术用于蛋白快速酶解 | 第23-24页 |
第三节 本论文的工作和意义 | 第24-26页 |
参考文献 | 第26-36页 |
第二章 激光解析离子化过程的源内光电化学反应研究及其应用 | 第36-81页 |
第一节 基于激光解析离子化过程光致氧化原理的半胱氨酸源内标记 | 第38-55页 |
1 前言 | 第38页 |
2 实验部分 | 第38-40页 |
·材料与实验试剂 | 第38-39页 |
·实验中用到的溶液准备方法 | 第39页 |
·蛋白的酶解 | 第39页 |
·氧化钛纳米粒子稳定悬浊液的准备 | 第39页 |
·纳米氧化钛修饰的MALDI靶板 | 第39页 |
·半胱氨酸的源内选择性标记 | 第39-40页 |
·β-乳球蛋白A和白蛋白的数据库检索分析 | 第40页 |
3 结果与讨论 | 第40-54页 |
·MALDI离子化过程中光电氧化反应引起的半胱氨酸源内标记 | 第40-44页 |
·标记方法特异性的研究 | 第44-47页 |
·该标记方法机理的初步讨论 | 第47-49页 |
·该标记方法在蛋白质组学分析鉴定中的应用 | 第49-54页 |
4 结论 | 第54-55页 |
第二节 基于激光解析离子化过程光催化还原原理的二硫键源内断裂 | 第55-61页 |
1 前言 | 第55页 |
2 实验部分 | 第55-56页 |
·材料与实验试剂 | 第55页 |
·氧化钛修饰的不锈钢靶板准备 | 第55-56页 |
·激光解析离子化过程中的源内二硫键还原 | 第56页 |
3 结果与讨论 | 第56-60页 |
·激光离子化过程中光电还原反应引起的二硫键断裂 | 第56-58页 |
·关于源内二硫键还原反应机理的探讨 | 第58-60页 |
4 结论 | 第60-61页 |
第三节 基于激光解析离子化过程光电化学原理的肽段源内氧化还原裂解 | 第61-75页 |
1 前言 | 第61页 |
2 实验部分 | 第61-62页 |
·材料和实验试剂 | 第61-62页 |
·氧化钛修饰的不锈钢靶板准备 | 第62页 |
·质谱方法和数据分析 | 第62页 |
3 结果与讨论 | 第62-74页 |
·基于纳米氧化钛基底的光致肽段裂解 | 第62-65页 |
·电子给体 | 第65-69页 |
·源内光致肽段氧化裂解原理探讨 | 第69-73页 |
·源内光致还原过程引起的肽段裂解 | 第73-74页 |
4 结论 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-81页 |
第三章 纳米氧化钛修饰的功能化MALDI靶板用于原位磷酸化肽段富集分析 | 第81-101页 |
1 前言 | 第82-83页 |
2 实验部分 | 第83-85页 |
·材料和实验试剂 | 第83-84页 |
·氧化钛修饰的不锈钢靶板准备 | 第84页 |
·标准蛋白和牛奶的酶解 | 第84页 |
·靶上磷酸化肽段的富集 | 第84-85页 |
·金属离子亲和色谱(IMAC)技术用于磷酸化肽段富集 | 第85页 |
·质谱分析和数据检索 | 第85页 |
3 结果与讨论 | 第85-96页 |
·基于TiO_2修饰靶板的磷酸化肽段板上富集 | 第85-89页 |
·复杂混合样品中的磷酸化肽段靶上富集 | 第89-94页 |
·磷酸化肽段的快速原位富集 | 第94-96页 |
4 结论 | 第96-97页 |
参考文献 | 第97-101页 |
第四章 基于介孔材料纳米限域的快速蛋白酶解鉴定 | 第101-122页 |
1 前言 | 第102页 |
2 实验部分 | 第102-105页 |
·材料与实验试剂 | 第103页 |
·用于酶固定化的介孔材料的合成与表征 | 第103页 |
·胰蛋白酶的吸附固定 | 第103-104页 |
·人肝细胞质样本的准备 | 第104页 |
·纳米限域的蛋白质酶解 | 第104页 |
·人肝细胞质样本利用纳米限域酶解产生的肽段的液相色谱分离 | 第104-105页 |
·酶解样品的MALDI-MS质谱鉴定 | 第105页 |
3 结果与讨论 | 第105-111页 |
·基于介孔材料纳米管道的酶解反应过程 | 第105-106页 |
·最佳酶负载量优化 | 第106-108页 |
·CNS纳米酶反应器用于标准蛋白快速酶解 | 第108-110页 |
·CNS纳米酶反应器用于人肝样本的快速酶解 | 第110-111页 |
4 结论 | 第111-112页 |
5 附录 | 第112-118页 |
参考文献 | 第118-122页 |
硕士期间发表论文情况 | 第122-124页 |
致谢 | 第124-125页 |