| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 缩写词 | 第12-13页 |
| 第一章 植物抗寒性生理及分子机理研究进展 | 第13-30页 |
| 1 植物对低温逆境适应性的生理及分子机制 | 第13-20页 |
| ·生物膜体系 | 第13-15页 |
| ·抗氧化系统对低温逆境的响应 | 第15-16页 |
| ·渗透调节物质的积累 | 第16-17页 |
| ·光合机构对低温逆境的响应 | 第17-18页 |
| ·低温诱导基因及蛋白的产生 | 第18-20页 |
| 2 低温逆境下的信号传导和基因表达调控 | 第20-23页 |
| ·Ca~(2+)与低温逆境信号传导 | 第20-21页 |
| ·ABA与低温逆境信号传导 | 第21-22页 |
| ·CRT/DRE与低温逆境信号传导 | 第22-23页 |
| 3 CBF转录因子在提高植物抗寒性中的作用 | 第23-27页 |
| ·CBF转录因子的发现 | 第23页 |
| ·CBF转录因子的结构与特性 | 第23-24页 |
| ·CBF转录因子的表达调控 | 第24-26页 |
| ·CBF转录因子的生理生化功能 | 第26-27页 |
| 4 本研究的目的、意义和技术路线 | 第27-30页 |
| 第二章 草莓冷诱导转录因子CBF的分离与克隆 | 第30-67页 |
| 1 材料和方法 | 第31-47页 |
| ·实验材料 | 第31-37页 |
| ·植物材料 | 第31页 |
| ·菌株 | 第31页 |
| ·载体 | 第31-32页 |
| ·试剂与试剂盒 | 第32页 |
| ·培养基 | 第32-33页 |
| ·溶液和缓冲液 | 第33-37页 |
| ·主要仪器设备 | 第37-38页 |
| ·实验方法 | 第38-47页 |
| ·草莓叶片总DNA的提取 | 第38页 |
| ·草莓叶片总RNA的提取 | 第38-39页 |
| ·引物的设计与合成 | 第39-40页 |
| ·电泳技术 | 第40-41页 |
| ·DNA/RNA OD值的测定 | 第41页 |
| ·反转录 | 第41-42页 |
| ·热启动降落PCR | 第42-43页 |
| ·SON-PCR扩增CBF基因侧翼序列 | 第43页 |
| ·RT-PCR | 第43-44页 |
| ·PCR产物的胶回收 | 第44-45页 |
| ·DNA片段和载体DNA的连接 | 第45页 |
| ·E.coli感受态细胞的制备与转化 | 第45-46页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第46-47页 |
| ·转化子的快速鉴定 | 第47页 |
| ·限制性内切酶酶切反应 | 第47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-61页 |
| ·草莓CBF基因克隆及表达策略 | 第47页 |
| ·草莓CBF基因中间片段的分离与克隆 | 第47-49页 |
| ·阳性克隆的筛选和鉴定 | 第49-50页 |
| ·草莓CBF基因中间片段序列测定与分析 | 第50-51页 |
| ·SON-PCR扩增CBF基因侧翼序列 | 第51-53页 |
| ·草莓CBF基因编码区全长cDNA序列的分离及克隆 | 第53页 |
| ·草莓CBF基因编码区全长cDNA序列及其推导氨基酸序列分析 | 第53-55页 |
| ·草莓Facbf1基因CDS序列的碱基组成 | 第55页 |
| ·草莓Facbf1基因CDS氨基酸组成及密码子偏好性 | 第55-56页 |
| ·草莓Facbf1基因cDNA序列及其编码氨基酸序列同源性分析 | 第56-60页 |
| ·草莓Facbf1基因表达的RT-PCR分析 | 第60-61页 |
| 3 讨论 | 第61-65页 |
| ·草莓Facbf1基因的分离与克隆 | 第61-63页 |
| ·草莓Facbf1基因的序列分析 | 第63-64页 |
| ·草莓Facbf1基因表达差异分析 | 第64-65页 |
| 4 小结 | 第65-67页 |
| 第三章 草莓冷诱导转录因子FaCBF1的生物信息学分析 | 第67-91页 |
| 1 材料和方法 | 第67-72页 |
| ·计算机和生物信息学软件 | 第67-68页 |
| ·计算机和操作系统 | 第67页 |
| ·生物信息学软件 | 第67-68页 |
| ·应用分析的主要网站 | 第68页 |
| ·Facbf1基因编码蛋白的结构分析 | 第68-70页 |
| ·一级结构的分析 | 第68-69页 |
| ·蛋白质的理化特性分析 | 第68-69页 |
| ·蛋白质的系统进化树的构建 | 第69页 |
| ·二级结构的分析 | 第69-70页 |
| ·用ANTHEWIN 5.0软件预测蛋白质的二级结构 | 第69页 |
| ·利用PredictProtein等服务器预测蛋白质的二级结构 | 第69-70页 |
| ·三级结构预测 | 第70页 |
| ·新基因编码蛋白的功能预测 | 第70-72页 |
| ·保守结构域分析 | 第70-71页 |
| ·蛋白质超家族分析 | 第71页 |
| ·信号肽、跨膜区和卷曲螺旋分析 | 第71页 |
| ·糖基化位点和磷酸化位点分析 | 第71-72页 |
| ·新基因的电子表达谱分析 | 第72页 |
| ·新基因的电子定位分析 | 第72页 |
| 2 结果与分析 | 第72-88页 |
| ·Facbf1基因编码蛋白的结构分析 | 第72-80页 |
| ·一级结构的分析 | 第72-76页 |
| ·FaCBF1蛋白的理化特性分析 | 第72-74页 |
| ·FaCBF1蛋白的系统进化树的构建 | 第74-76页 |
| ·二级结构预测 | 第76-79页 |
| ·三级结构预测 | 第79-80页 |
| ·新基因编码蛋白的功能预测 | 第80-88页 |
| ·保守结构域分析 | 第80-81页 |
| ·蛋白质超家族分析 | 第81页 |
| ·信号肽预测分析 | 第81-83页 |
| ·卷曲螺旋预测分析 | 第83页 |
| ·蛋白质跨膜结构分析 | 第83页 |
| ·糖基化位点分析 | 第83-84页 |
| ·磷酸化位点分析 | 第84-86页 |
| ·新基因的电子表达谱及染色体定位 | 第86-88页 |
| 3 讨论 | 第88-90页 |
| ·FaCBF1蛋白质结构分析 | 第88页 |
| ·FaCBF1蛋白质功能的预测 | 第88-90页 |
| 4 小结 | 第90-91页 |
| 第四章 草莓冷诱导转录因子FaCBF1的抗寒特性研究 | 第91-112页 |
| 1 材料与方法 | 第91-95页 |
| ·材料 | 第91-92页 |
| ·处理 | 第92页 |
| ·方法 | 第92-95页 |
| ·草莓Facbf1基因表达的半定量分析 | 第92页 |
| ·细胞质膜相对透性(PMP)的测定 | 第92页 |
| ·丙二醛(MDA)含量测定 | 第92页 |
| ·超氧化物歧化酶(SOD)活性测定 | 第92-93页 |
| ·过氧化氢酶(CAT)活性测定 | 第93页 |
| ·抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性的测定 | 第93页 |
| ·谷胱甘肽还原酶(GR)活性的测定 | 第93页 |
| ·游离脯氨酸含量的测定 | 第93-94页 |
| ·可溶性蛋白质含量的测定 | 第94页 |
| ·可溶性糖含量的测定 | 第94-95页 |
| ·叶绿素和类胡萝卜素含量的测定 | 第95页 |
| ·数据分析 | 第95页 |
| 2 结果与分析 | 第95-105页 |
| ·草莓Facbf1基因表达的半定量分析 | 第95-96页 |
| ·低温诱导Facbf1基因表达对草莓细胞膜系统的影响 | 第96-98页 |
| ·低温诱导Facbf1基因表达对草莓保护酶系统的影响 | 第98-101页 |
| ·低温诱导Facbf1基因表达对草莓渗透调节物质的影响 | 第101-103页 |
| ·低温诱导Facbf1基因表达对草莓光合色素的影响 | 第103-105页 |
| 3 讨论 | 第105-110页 |
| ·细胞膜系统与植物抗寒性的关系 | 第105-106页 |
| ·保护酶与植物抗寒性的关系 | 第106-107页 |
| ·渗透调节物质与植物抗寒性的关系 | 第107-108页 |
| ·光合作用与植物抗寒性的关系 | 第108-109页 |
| ·草莓Facbf1基因的表达与植物抗寒性的关系 | 第109-110页 |
| 4 小结 | 第110-112页 |
| 第五章 结论与研究展望 | 第112-115页 |
| 1 结论 | 第112-113页 |
| 2 研究展望 | 第113-115页 |
| 参考文献 | 第115-127页 |
| 致谢 | 第127-128页 |
| 攻读博士期间论文发表情况 | 第128-129页 |
