| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 缩略词 | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 图表目录 | 第8-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-19页 |
| ·铜绿假单胞菌 | 第9页 |
| ·铜绿假单胞菌的抗药性 | 第9-10页 |
| ·抗生素 | 第9-10页 |
| ·铜绿假单胞菌的多重耐药性 | 第10页 |
| ·铜绿假单胞菌在胁迫条件下的持久存活 | 第10-12页 |
| ·细菌的持久存活 | 第10-12页 |
| ·PA在胁迫条件下持久存活与其基因表达 | 第12页 |
| ·铜绿假单胞菌胁迫条件下持久存活的生存机制 | 第12-18页 |
| ·PA持久存活激活了特殊调节路径引起基因表达变化 | 第12-15页 |
| ·群体感应系统促使PA的持久生存 | 第15-16页 |
| ·生物被膜与PA的持久生存的关系 | 第16-18页 |
| ·本论文研究内容及意义 | 第18-19页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第19-35页 |
| ·实验材料 | 第19-22页 |
| ·菌株、质粒和生长条件 | 第19-21页 |
| ·试剂 | 第21页 |
| ·仪器 | 第21-22页 |
| ·基本实验方法 | 第22-26页 |
| ·细菌培养基 | 第22页 |
| ·基因扩增 | 第22-23页 |
| ·质粒的小量提取 | 第23-24页 |
| ·限制性内切酶的酶切 | 第24页 |
| ·纯化酶切产物 | 第24-25页 |
| ·粘性末端连接 | 第25页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第25-26页 |
| ·电转化 | 第26页 |
| ·蓝白筛选 | 第26页 |
| ·筛选长期条件表达的基因 | 第26-28页 |
| ·构建的随机启动子库 | 第26-27页 |
| ·胁迫条件下表达基因的筛选 | 第27-28页 |
| ·胁迫条件下长期表达的启动子序列的测定与分析 | 第28页 |
| ·筛选出的胁迫条件下长期表达的基因的敲除 | 第28-32页 |
| ·筛选出的胁迫条件下长期表达的基因功能验证 | 第32-35页 |
| ·菌落形成单位的测定 | 第32-33页 |
| ·突变株在长期培养条件下生长的测定 | 第33-34页 |
| ·突变株与野生型菌株在长期培养条件下的竞争性生长实验 | 第34页 |
| ·突变株与野生型菌株在长期培养条件及外加压力下的生长测定 | 第34-35页 |
| 第三章 结果 | 第35-44页 |
| ·在长期培养条件下对铜绿假单胞菌随机启动子库的筛选 | 第35-38页 |
| ·筛选出的胁迫条件下长期表达的基因 | 第38-39页 |
| ·突变体长期培养的结果 | 第39-40页 |
| ·在长期培养条件下突变体与野生型菌株的竞争性实验结果 | 第40-42页 |
| ·突变体在渗透压以及酸性条件下长期培养的结果 | 第42-44页 |
| 第四章 讨论 | 第44-47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
| 附录 | 第51-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
