摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-18页 |
第1章 与血管平滑肌细胞联合培养内皮细胞的粘附 | 第18-49页 |
·引言 | 第18-20页 |
·实验材料及仪器 | 第20-24页 |
·实验仪器 | 第20-21页 |
·试剂 | 第21-22页 |
·主要溶液成分及配制 | 第22-24页 |
·实验方法 | 第24-31页 |
·细胞培养与鉴定 | 第24-27页 |
·ECs 和VSMCs(或FBs)的联合培养模型 | 第27-28页 |
·实验分组 | 第28页 |
·24 孔培养板的预处理 | 第28-29页 |
·细胞粘附实验 | 第29页 |
·细胞粘附抑制实验 | 第29页 |
·蛋白提取 | 第29页 |
·蛋白免疫印迹实验(western blot) | 第29-30页 |
·免疫荧光检测(confocal micracopy) | 第30页 |
·细胞FAs 面积的测定 | 第30页 |
·多聚微管和微管单体的提取方法 | 第30-31页 |
·统计学方法 | 第31页 |
·实验结果 | 第31-44页 |
·原代培养的ECs、VSMCs 和FBs 形态学观察及鉴定 | 第31-35页 |
·VSMCs 诱导ECs 粘附 | 第35-37页 |
·VSMCs 诱导ECs 的FAs 形成 | 第37-38页 |
·VSMCs 促进 ECs 的FAs 面积增加 | 第38-39页 |
·VSMCs 对ECs 微管聚合的影响 | 第39-40页 |
·VSMCs 对ECs p-paxillin 和ERK1/2 MAPK 信号通路活化的影响 | 第40-41页 |
·ERK1/2 MAPK 信号通路参与调节 VSMCs 诱导 ECs 的 paxillin 激活 | 第41-42页 |
·TSA 改变微管稳定性,抑制VSMCs 诱导的ECs 粘附 | 第42-44页 |
·TSA 抑制了VSMCs 对联合培养ECs 的ERK1/2 和 paxillin 活化 | 第44页 |
·讨论 | 第44-49页 |
·VSMCs 诱导ECs 粘附 | 第44-45页 |
·与VSMCs 联合培养ECs 的粘附机制探讨 | 第45-49页 |
第2章 切应力对与血管平滑肌联合培养内皮细胞迁移的影响及其细胞骨架机制 | 第49-71页 |
·引言 | 第49-51页 |
·实验材料 | 第51-53页 |
·实验仪器 | 第51-52页 |
·试剂 | 第52-53页 |
·主要溶液成分及配制 | 第53页 |
·实验方法 | 第53-57页 |
·细胞培养 | 第53页 |
·用于VSMCs 和ECs 联合培养的平行平板流动腔系统 | 第53-55页 |
·实验分组 | 第55-56页 |
·细胞迁移实验 | 第56页 |
·HDAC6 RNA 干扰实验 | 第56-57页 |
·蛋白提取 | 第57页 |
·蛋白免疫印迹实验 | 第57页 |
·统计学方法 | 第57页 |
·实验结果 | 第57-66页 |
·切应力和VSMCs 可以诱导ECs 的迁移 | 第57-59页 |
·VSMCs 诱导ECs 的HDAC6 激活 | 第59-60页 |
·HDAC6 的表达改变伴有微管乙酰化水平降低 | 第60-61页 |
·VSMCs 对ECs 中HDAC6 和微管乙酰化表达的影响呈时间依赖性 | 第61页 |
·HDAC6 和微管乙酰化调控ECs 的迁移 | 第61-65页 |
·切应力抑制与ECs 联合培养的VSMCs 的CTGF 的表达 | 第65-66页 |
·讨论 | 第66-71页 |
·切应力对与VSMCs 对联合培养ECs 迁移的影响 | 第66-67页 |
·VSMCs 对ECs 迁移的调控途径 | 第67-69页 |
·切应力对ECs 迁移的调控机制 | 第69-71页 |
全文小结 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-78页 |
文献综述 | 第78-106页 |
参考文献 | 第97-106页 |
致谢 | 第106-107页 |
攻读博士学位期间已发表和修回的学术论文 | 第107-108页 |