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生理切应力对与血管平滑肌细胞联合培养的内皮细胞迁移的影响及其细胞骨架机制

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-18页
第1章 与血管平滑肌细胞联合培养内皮细胞的粘附第18-49页
   ·引言第18-20页
   ·实验材料及仪器第20-24页
     ·实验仪器第20-21页
     ·试剂第21-22页
     ·主要溶液成分及配制第22-24页
   ·实验方法第24-31页
     ·细胞培养与鉴定第24-27页
     ·ECs 和VSMCs(或FBs)的联合培养模型第27-28页
     ·实验分组第28页
     ·24 孔培养板的预处理第28-29页
     ·细胞粘附实验第29页
     ·细胞粘附抑制实验第29页
     ·蛋白提取第29页
     ·蛋白免疫印迹实验(western blot)第29-30页
     ·免疫荧光检测(confocal micracopy)第30页
     ·细胞FAs 面积的测定第30页
     ·多聚微管和微管单体的提取方法第30-31页
     ·统计学方法第31页
   ·实验结果第31-44页
     ·原代培养的ECs、VSMCs 和FBs 形态学观察及鉴定第31-35页
     ·VSMCs 诱导ECs 粘附第35-37页
     ·VSMCs 诱导ECs 的FAs 形成第37-38页
     ·VSMCs 促进 ECs 的FAs 面积增加第38-39页
     ·VSMCs 对ECs 微管聚合的影响第39-40页
     ·VSMCs 对ECs p-paxillin 和ERK1/2 MAPK 信号通路活化的影响第40-41页
     ·ERK1/2 MAPK 信号通路参与调节 VSMCs 诱导 ECs 的 paxillin 激活第41-42页
     ·TSA 改变微管稳定性,抑制VSMCs 诱导的ECs 粘附第42-44页
     ·TSA 抑制了VSMCs 对联合培养ECs 的ERK1/2 和 paxillin 活化第44页
   ·讨论第44-49页
     ·VSMCs 诱导ECs 粘附第44-45页
     ·与VSMCs 联合培养ECs 的粘附机制探讨第45-49页
第2章 切应力对与血管平滑肌联合培养内皮细胞迁移的影响及其细胞骨架机制第49-71页
   ·引言第49-51页
   ·实验材料第51-53页
     ·实验仪器第51-52页
     ·试剂第52-53页
     ·主要溶液成分及配制第53页
   ·实验方法第53-57页
     ·细胞培养第53页
     ·用于VSMCs 和ECs 联合培养的平行平板流动腔系统第53-55页
     ·实验分组第55-56页
     ·细胞迁移实验第56页
     ·HDAC6 RNA 干扰实验第56-57页
     ·蛋白提取第57页
     ·蛋白免疫印迹实验第57页
     ·统计学方法第57页
   ·实验结果第57-66页
     ·切应力和VSMCs 可以诱导ECs 的迁移第57-59页
     ·VSMCs 诱导ECs 的HDAC6 激活第59-60页
     ·HDAC6 的表达改变伴有微管乙酰化水平降低第60-61页
     ·VSMCs 对ECs 中HDAC6 和微管乙酰化表达的影响呈时间依赖性第61页
     ·HDAC6 和微管乙酰化调控ECs 的迁移第61-65页
     ·切应力抑制与ECs 联合培养的VSMCs 的CTGF 的表达第65-66页
   ·讨论第66-71页
     ·切应力对与VSMCs 对联合培养ECs 迁移的影响第66-67页
     ·VSMCs 对ECs 迁移的调控途径第67-69页
     ·切应力对ECs 迁移的调控机制第69-71页
全文小结第71-72页
参考文献第72-78页
文献综述第78-106页
 参考文献第97-106页
致谢第106-107页
攻读博士学位期间已发表和修回的学术论文第107-108页

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