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参与番茄花柄离区发育的转录因子SPL3的基因功能研究

摘要第1-8页
Abstract第8-17页
第一章 绪论第17-33页
   ·器官脱落第17页
   ·植物离区发育研究进展第17-21页
     ·离区的细胞学研究第17页
     ·离区与植物激素的关系第17-18页
     ·离区的生理生化研究进展第18-19页
     ·离区发育的分子生物学研究进展第19-21页
   ·MADS-box基因研究进展第21-24页
     ·MADS-box基因的起源与分类第22页
     ·MADS-box基因结构第22-23页
     ·MADS-box基因功能第23-24页
   ·SPL基因研究进展第24-31页
     ·SPL基因结构及进化第25-26页
     ·SPL基因功能研究第26-29页
     ·mir156/157 家族对SPL转录因子的调控第29-31页
   ·本实验的研究内容,意义和所采用的技术路线第31-33页
     ·本实验的研究内容和意义第31-32页
     ·本实验所采用的技术路线第32-33页
第二章 番茄JOINTLESS上游调控因子筛选第33-49页
   ·引言第33页
   ·实验材料第33-34页
     ·植物材料第33页
     ·实验所用试剂盒第33页
     ·酶及其他实验耗材第33页
     ·引物第33页
     ·菌株与载体第33-34页
   ·实验方法第34-41页
     ·实验取材第34页
     ·酵母单杂交cDNA文库构建第34-35页
     ·酵母单杂交载体构建第35-39页
     ·酵母单杂交及目标片段检测第39-41页
     ·转录因子与JOINTLESS启动子区域互做单杂交验证第41页
   ·实验结果与分析第41-47页
     ·番茄JOINTLESS基因启动子区域克隆第41-42页
     ·番茄材料总RNA提取第42页
     ·酵母单杂交cDNA文库构建第42-43页
     ·酵母单杂交筛选上游调控因子第43-44页
     ·酵母质粒PCR鉴定结果第44页
     ·测序结果分析第44-46页
     ·转录因子与PTM01 区域互作酵母单杂交验证第46-47页
   ·讨论第47-49页
第三章 番茄LeSPL3 基因功能研究第49-72页
   ·引言第49页
   ·实验材料第49-50页
     ·植物材料第49页
     ·实验所用试剂盒第49页
     ·酶及其他实验耗材第49页
     ·引物第49-50页
     ·菌株和载体第50页
   ·实验方法第50-63页
     ·植物材料第50页
     ·目标基因的获得及载体构建第50-53页
     ·烟草转化第53-54页
     ·拟南芥转化第54-55页
     ·转基因植株鉴定第55-56页
     ·重组蛋白表达与纯化第56-57页
     ·凝胶阻滞(Electrophoretic Mobility Mobility Shift Assay)第57-59页
     ·免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation)第59-60页
     ·亚细胞定位第60-61页
     ·石蜡切片制备第61-63页
   ·实验结果与分析第63-69页
     ·番茄LeSPL3 基因克隆及分析第63-64页
     ·番茄LeSPL3 蛋白表达和纯化第64页
     ·EMSA实验结果第64-66页
     ·LeSPL3 亚细胞定位第66页
     ·LeSPL3 组织特异性分析第66-67页
     ·LeSPL3 拟南芥转化第67页
     ·LeSPL3 烟草转化第67-69页
   ·讨论第69-72页
     ·LeSPL3 基因克隆及分析第69-70页
     ·LeSPL3 与JOINTLESS互作验证第70-71页
     ·LeSPL3 基因功能分析第71-72页
第四章 烟草NtSPL3 基因功能研究第72-85页
   ·引言第72页
   ·实验材料第72-73页
     ·植物材料第72页
     ·实验所用试剂盒第72页
     ·酶及其他实验耗材第72页
     ·引物第72页
     ·菌株和载体第72-73页
   ·实验方法第73-76页
     ·植物材料第73页
     ·目标基因的获得第73页
     ·载体构建第73-74页
     ·烟草转化第74页
     ·转基因植株鉴定第74-75页
     ·转基因植株细胞学鉴定第75页
     ·NtSPL3 基因亚细胞定位第75页
     ·转基因植株扫描电镜分析第75-76页
   ·结果与分析第76-83页
     ·NtSPL3 基因克隆与序列分析第76-77页
     ·NtSPL3 亚细胞定位第77-78页
     ·NtSPL3 过表达植株分析第78-79页
     ·NtSPL3 RNAi植株分析第79-80页
     ·NtSPL3 过表达及RNAi植株扫描电镜分析第80-82页
     ·NtSPL3 转基因植株ABA应答第82-83页
   ·讨论第83-85页
第五章 全文结论第85-87页
   ·酵母单杂交筛选JOINTLESS上游调控基因第85页
   ·LeSPL3 可以结合JOINTLESS启动子区域顺式作用元件第85页
   ·LeSPL3 影响多个植株发育生物学过程第85-86页
   ·NtSPL3 影响烟草离区发育和叶表皮气孔发育第86页
   ·LeSPL3 影响番茄离区发育的可能分子生物学模型第86-87页
参考文献第87-94页
附录第94-101页
致谢第101-102页
作者简历第102页

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