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四种蛋传性病毒病多重PCR检测方法的建立

摘要第1-5页
Abstract第5-11页
文献综述第11-22页
 1 蛋传性病毒病概述第11-12页
 2 四种蛋传性病毒概述第12-20页
   ·禽网状内皮增生病病毒第13-15页
   ·鸡传染性贫血病病毒第15-17页
   ·禽白血病病毒第17-19页
   ·禽呼肠孤病病毒第19-20页
 3 蛋传性病毒病的共感染第20-21页
 4 分子生物学检测方法第21-22页
引言第22-46页
 1 材料与方法第23-31页
   ·材料第23-24页
     ·病料来源第23页
     ·鸡胚、病毒及细胞第23页
     ·主要试剂第23页
     ·溶液、培养基与抗生素及其配制第23页
     ·主要仪器设备第23-24页
   ·方法第24-31页
     ·样品处理第24页
     ·病毒增殖及病毒核酸抽提第24-25页
     ·多重PCR 引物设计第25-26页
     ·单项PCR 检测方法的建立及其条件优化第26-28页
     ·PCR 产物鉴定第28-29页
     ·多重PCR 检测方法的建立第29-30页
     ·可重复性试验第30页
     ·临床检测第30-31页
 2 结果与分析第31-42页
   ·单项PCR 扩增条件的优化第31-34页
     ·单项PCR 共同退火温度的确定第31页
     ·应用不同M92+ 浓度扩增效果第31-32页
     ·应用不同引物浓度的扩增效果第32-33页
     ·应用不同酶浓度的扩增效果第33-34页
   ·PCR 产物鉴定结果第34页
     ·阳性质粒的鉴定结果第34页
     ·测序结果第34页
   ·多重PCR 反应条件的确定第34-36页
     ·多重PCR 引物浓度的确定第34-35页
     ·多重PCR 酶浓度的确定第35页
     ·多重PCR Mg~(2+) 浓度的确定第35-36页
   ·敏感性实验第36-37页
     ·单项PCR 敏感性试验第36页
     ·多重PCR 敏感性试验第36-37页
   ·特异性试验第37-39页
     ·单项PCR 特异性试验结果第37-38页
     ·多重PCR 特异性试验结果第38-39页
   ·可重复性试验结果第39-40页
   ·临床病料、种蛋、成品活疫苗和SPF 鸡胚检测结果第40-41页
     ·临床病料检测结果第40页
     ·种蛋检测结果第40-41页
     ·活疫苗和SPF 鸡胚检测结果第41页
   ·单项PCR 和四重PCR 检测方法的符合率第41-42页
 3 讨论第42-46页
   ·多重PCR 检测方法的建立第42-44页
     ·多重PCR 引物的设计第43页
     ·多重PCR 反应条件的优化第43-44页
   ·临床被检病料的选择第44页
   ·禽用活疫苗的检测第44页
   ·四种蛋传性病毒病的共感染第44-46页
结论第46-47页
参考文献第47-51页
致谢第51-52页
作者简介第52页
在读硕士期间发表的论文第52页

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