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花瓣对称性基因的克隆及LjCYC2对露地菊的遗传转化

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
1 绪论第9-29页
   ·花对称性的演化第9-10页
   ·花对称性的遗传控制第10-14页
     ·TCP结构域基因家族第12-14页
   ·豆科植物中花对称性的控制第14-24页
     ·LjCYC2基因的结构与功能第14-18页
     ·LjCYC2基因参与花对称性的控制第18-19页
     ·LjCYC2基因对花发育的调控第19-22页
     ·LjCYC2作为"选择基因"对豆科多种花型起源与演化的启示第22-24页
   ·荧光蛋白标签技术在植物中的应用第24-26页
     ·荧光蛋白简介第24-25页
     ·植物细胞中自发荧光对定位结果的影响第25-26页
   ·菊花基因工程研究进展第26-27页
     ·菊花遗传转化体系建立的重要因素第26-27页
   ·实验研究的目的和意义第27-29页
2 菊花中花对称性基因的克隆第29-41页
   ·材料与方法第29-30页
     ·植物材料第29页
     ·实验试剂第29-30页
     ·试验设备第30页
   ·研究方法第30-35页
     ·PCR反应的引物设计第30-31页
     ·‘松江白鹤’RNA提取第31页
     ·RT-PCR克隆‘松江白鹤’花对称性基因第31-32页
     ·PCR产物的纯化第32-33页
     ·目的片段与载体的连接第33页
     ·连接产物的转化第33-34页
     ·质粒DNA的提取及纯化第34-35页
   ·结果与分析第35-40页
     ·总RNA的提取第35-36页
     ·‘松江白鹤’基因全长克隆第36-40页
   ·本章小结第40-41页
3 花对称性基因LjCYC2对露地菊遗传转化的研究第41-59页
   ·材料第41-43页
     ·植物材料第41页
     ·载体第41-42页
     ·基本培养基、试剂及实验设备第42-43页
   ·研究方法第43-45页
     ·农杆菌转化菌株的鉴定第43页
     ·质粒的酶切鉴定第43-45页
   ·农杆菌介导的LjCYC2基因露地菊‘火焰’的遗传转化第45-48页
     ·植物培养基第45页
     ·农杆菌遗传转化体系第45-46页
     ·再生体系的优化第46页
     ·抗生素敏感性试验第46页
     ·转化体系的优化第46-47页
     ·转基因株系的检测第47-48页
   ·结果与分析第48-57页
     ·农杆菌菌株鉴定第48页
     ·质粒酶切鉴定第48页
     ·质粒PCR鉴定第48-49页
     ·再生体系的优化第49-51页
     ·转化体系的优化第51-53页
     ·转化条件的优化第53-56页
     ·LjCYC2基因在露地菊中的遗传转化第56-57页
   ·本章小结第57-58页
   ·展望第58-59页
4 讨论第59-62页
   ·遗传转化效率第59页
   ·延迟筛选时间及选择压(Hyg)的强度对遗传转化的影响第59-60页
   ·外植体的预培养第60页
   ·外植体的共培养第60页
   ·花对称性演化中的几个问题第60-62页
结论第62-63页
参考文献第63-68页
附录第68-69页
攻读学位期间发表的学术论文第69-70页
致谢第70-71页

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