假单胞菌酯酶的发现及其在制备手性扁桃酸中的应用
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-15页 |
| 第1章 绪论 | 第15-36页 |
| ·手性是化学品的重要性质 | 第15-17页 |
| ·生物催化在手性化学品生产中应用广泛 | 第17-19页 |
| ·催化生产手性化学品的迅速发展 | 第17页 |
| ·生物催化在手性化学品生产中具有重要地位 | 第17-19页 |
| ·扁桃酸是重要的手性化工前体 | 第19-21页 |
| ·扁桃酸简介 | 第19页 |
| ·消旋体扁桃酸用途 | 第19-20页 |
| ·单一对映体扁桃酸用途 | 第20-21页 |
| ·扁桃酸作为手性药物合成中间体 | 第20-21页 |
| ·扁桃酸作为手性鉴定试剂和手性拆分试剂 | 第21页 |
| ·光学纯扁桃酸的制备方法 | 第21-34页 |
| ·物理化学方法 | 第21-22页 |
| ·化学法 | 第22-24页 |
| ·非对映体盐结晶拆分法 | 第22-23页 |
| ·不对称合成法 | 第23-24页 |
| ·生物催化法 | 第24-34页 |
| ·氧化还原法 | 第24-28页 |
| ·不对称降解法 | 第24-25页 |
| ·不对称氧化法 | 第25页 |
| ·不对称还原法 | 第25-27页 |
| ·氧化还原去消旋化 | 第27-28页 |
| ·不对称单加氧法 | 第28页 |
| ·水解法 | 第28-34页 |
| ·水解酯化产物 | 第29-30页 |
| ·水解酰化产物 | 第30-31页 |
| ·水解法去消旋化 | 第31-32页 |
| ·水解扁桃腈 | 第32-34页 |
| ·本课题的目的和意义 | 第34-36页 |
| 第2章 对映选择性水解乙酰基扁桃酸菌株的筛选 | 第36-52页 |
| ·前言 | 第36-37页 |
| ·筛选路线 | 第37-38页 |
| ·材料与方法 | 第38-44页 |
| ·主要试剂 | 第38页 |
| ·主要设备 | 第38-39页 |
| ·分析方法 | 第39-41页 |
| ·薄层层析法 | 第39页 |
| ·液相色谱法 | 第39-41页 |
| ·实验方法 | 第41-44页 |
| ·目标底物的合成 | 第41-42页 |
| ·初筛 | 第42页 |
| ·复筛 | 第42页 |
| ·重复验证 | 第42页 |
| ·乙酰基扁桃酸自发脱乙酰基反应 | 第42-43页 |
| ·菌种鉴定 | 第43-44页 |
| ·结果与讨论 | 第44-51页 |
| ·不同初筛方法的比较 | 第44-45页 |
| ·不同初筛目标底物的比较 | 第45-46页 |
| ·初筛结果 | 第46页 |
| ·复筛结果 | 第46-47页 |
| ·复证筛选结果及反应性质的初步研究 | 第47-48页 |
| ·目的菌株的鉴定 | 第48-51页 |
| ·本章小结 | 第51-52页 |
| 第3章 假单胞菌酯酶生产的发酵优化 | 第52-75页 |
| ·前言 | 第52-53页 |
| ·材料与方法 | 第53-56页 |
| ·主要试剂和设备 | 第53页 |
| ·检测方法 | 第53-54页 |
| ·酶活力检测方法 | 第53页 |
| ·细胞量检测方法 | 第53-54页 |
| ·单因素优化培养基组成和发酵条件 | 第54页 |
| ·Plackett-Burman设计 | 第54-55页 |
| ·RSM设计 | 第55页 |
| ·罐上发酵条件优化 | 第55页 |
| ·发酵过程动力学模型建立 | 第55-56页 |
| ·结果与讨论 | 第56-73页 |
| ·单因素法优化培养基组成和发酵条件 | 第56-61页 |
| ·Plackett-Burman设计 | 第61-63页 |
| ·RSM设计 | 第63-67页 |
| ·罐上发酵条件优化 | 第67-71页 |
| ·对单因素和统计学方法的解释 | 第71-72页 |
| ·动力学模型的建立和分析 | 第72-73页 |
| ·本章小结 | 第73-75页 |
| 第4章 假单胞菌酯酶整细胞催化剂的改造 | 第75-87页 |
| ·前言 | 第75-76页 |
| ·材料与方法 | 第76-78页 |
| ·主要试剂和设备 | 第76页 |
| ·催化剂活力检测方法 | 第76页 |
| ·生物催化剂的获得 | 第76页 |
| ·细胞固定化方法 | 第76-77页 |
| ·酶固定化方法 | 第77页 |
| ·催化剂的重复使用 | 第77页 |
| ·催化剂的操作稳定性测定 | 第77页 |
| ·整细胞催化剂的通透 | 第77-78页 |
| ·海藻酸钙包埋通透整细胞 | 第78页 |
| ·海藻酸钙包埋通透整细胞拆分乙酰基邻氯扁桃酸 | 第78页 |
| ·结果与讨论 | 第78-86页 |
| ·细胞的固定化研究 | 第78-80页 |
| ·粗酶的固定化研究 | 第80-82页 |
| ·细胞通透处理 | 第82-84页 |
| ·利用固定化细胞进行重复拆分反应 | 第84-85页 |
| ·利用固定化细胞拆分制备邻氯扁桃酸 | 第85-86页 |
| ·本章小结 | 第86-87页 |
| 第5章 假单胞菌酯酶催化酰基水解反应性能的研究 | 第87-102页 |
| ·前言 | 第87-88页 |
| ·材料与方法 | 第88-91页 |
| ·主要试剂和设备 | 第88页 |
| ·底物的合成方法 | 第88页 |
| ·假单胞菌ECU1011静息细胞的获得 | 第88-89页 |
| ·反应条件的优化 | 第89页 |
| ·不同pH对反应的影响 | 第89页 |
| ·不同温度对反应的影响 | 第89页 |
| ·不同有机溶剂对反应的影响 | 第89页 |
| ·不同底物浓度对反应的影响 | 第89页 |
| ·对其它底物的反应 | 第89页 |
| ·不同离去酰基集团底物的反应动力学分析 | 第89-90页 |
| ·反应体系的改造 | 第90页 |
| ·分析方法 | 第90-91页 |
| ·结果与讨论 | 第91-101页 |
| ·底物衍生物的化学合成及酶促水解 | 第91-92页 |
| ·酶促反应性能的研究 | 第92-96页 |
| ·不同离去酰基基团的研究 | 第96-97页 |
| ·不同底物形式的研究 | 第97-101页 |
| ·本章小结 | 第101-102页 |
| 第6章 总结和展望 | 第102-106页 |
| ·全文总结 | 第102-103页 |
| ·论文创新点 | 第103页 |
| ·工作展望 | 第103-106页 |
| 参考文献 | 第106-121页 |
| 攻读博士期间论文发表和专利公开情况 | 第121-122页 |
| 致谢 | 第122-123页 |
| 附录 | 第123-128页 |
