| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-30页 |
| 1 巴西橡胶树的生物学研究现状 | 第10-14页 |
| ·巴西橡胶树生物学背景及产胶机理 | 第10-11页 |
| ·巴西橡胶树的分子生物学研究现状 | 第11-14页 |
| ·巴西橡胶树基因工程研究进展 | 第14页 |
| 2 植物磷吸收的分子机理研究进展 | 第14-25页 |
| ·根系构型及根系分泌物 | 第15-16页 |
| ·菌根与磷吸收 | 第16-17页 |
| ·磷胁迫条件特异性表达基因 | 第17-19页 |
| ·植物的Pi-Transporter | 第19-25页 |
| ·磷酸盐的获得与转运 | 第19-20页 |
| ·磷酸盐转运蛋白的结构 | 第20-21页 |
| ·磷酸盐转运蛋白的分类及其功能 | 第21-23页 |
| ·植物磷转运蛋白基因的表达调控 | 第23-25页 |
| 3 抑制消减杂交技术概况 | 第25-28页 |
| ·SSH技术的原理及步骤 | 第25-26页 |
| ·SSH技术在特殊诱导研究中的应用 | 第26-27页 |
| ·SSH技术在植物发育研究中的应用 | 第27-28页 |
| 4 本研究的意义 | 第28-29页 |
| 5 技术路线 | 第29-30页 |
| 第二章 HbPht基因的克隆及生物信息学分析 | 第30-50页 |
| 1 材料与试剂 | 第30页 |
| ·植物材料 | 第30页 |
| ·质粒及菌种 | 第30页 |
| ·生化试剂 | 第30页 |
| 2 方法与步骤 | 第30-41页 |
| ·RNA的提取 | 第30-31页 |
| ·总RNA中微量DNA的去除 | 第31-32页 |
| ·逆转录合成cDNA第一链 | 第32页 |
| ·HbPht保守区域的扩增 | 第32-35页 |
| ·3'cDNA末端扩增 | 第35-37页 |
| ·5'cDNA末端扩增 | 第37-40页 |
| ·HbPht全长的克隆 | 第40-41页 |
| ·HbPht基因的生物信息学分析 | 第41页 |
| 3 结果与讨论 | 第41-50页 |
| ·RNA提取 | 第41页 |
| ·HbPht基因的克隆 | 第41-45页 |
| ·巴西橡胶树Pht基因的生物信息学分析 | 第45-49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| 第三章 HbPht1基因的原核表达分析 | 第50-60页 |
| 1 材料与试剂 | 第50页 |
| ·材料、质粒、菌株 | 第50页 |
| ·工具酶和试剂 | 第50页 |
| 2 方法步骤 | 第50-56页 |
| ·原核表达载体pET-HbPht1构建 | 第50-52页 |
| ·pET-HbPht1融合蛋白表达 | 第52-53页 |
| ·His-HbPht1融合蛋白电泳(SDS-PAGE) | 第53-56页 |
| 3 结果与讨论 | 第56-60页 |
| ·pET-HbPht1原核表达载体构建 | 第56-57页 |
| ·pET-HbPht1重组质粒酶切鉴定及测序鉴定 | 第57页 |
| ·pET-HbPht1原核表达菌斑PCR鉴定 | 第57-58页 |
| ·pET-HbPht1原核表达及SDS-PAGE电泳分析 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59-60页 |
| 第四章 橡胶树根、叶低磷胁迫处理抑制消减文库构建 | 第60-75页 |
| 1 材料与试剂 | 第60页 |
| ·材料 | 第60页 |
| ·质粒及菌种 | 第60页 |
| ·生化试剂 | 第60页 |
| 2 方法与步骤 | 第60-69页 |
| ·巴西橡胶树幼苗低磷胁迫处理 | 第60-61页 |
| ·巴西橡胶树幼苗根、叶总RNA提取 | 第61-62页 |
| ·抑制消减杂交 | 第62-66页 |
| ·PCR扩增 | 第66-68页 |
| ·克隆与鉴定 | 第68-69页 |
| ·ESTs功能注释 | 第69页 |
| 3 结果与讨论 | 第69-75页 |
| ·各RNA的OD260测定结果及用量 | 第69-70页 |
| ·差减cDNA文库PCR扩增结果分析 | 第70页 |
| ·差减cDNA文库重组子的筛选 | 第70-71页 |
| ·cDNA克隆测序与序列分析 | 第71-74页 |
| ·讨论 | 第74-75页 |
| 第五章 论文小结 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-87页 |
| 附录 | 第87-91页 |
| 致谢 | 第91页 |