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油茶AACT基因和FAD6基因的全长cDNA克隆及原核表达

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
1 绪言第13-33页
   ·油茶概述第13-14页
   ·油茶的分子生物学研究第14-16页
     ·油茶的cDNA文库和EST文库的构建第14-15页
     ·油茶的分子标记研究第15-16页
   ·脂肪酸的种类与作用第16-19页
     ·脂肪酸的种类第16-17页
     ·脂肪酸的作用第17-19页
   ·饱和脂肪酸的合成途径及各种催化酶第19-25页
     ·脂肪酸的生物合成第19-20页
     ·乙酰CoA羧化酶第20页
     ·脂肪酸合酶系统第20-24页
     ·脂酰基-酰基载体蛋白硫脂酶第24-25页
   ·不脂肪酸的生物合成及脂肪酸脱饱和酶第25-30页
     ·不饱和脂肪酸的生物合成第25页
     ·脂肪酸脱饱和酶第25-30页
   ·脂肪酸合成的调节第30页
   ·本项研究的意义和技术路线第30-33页
2 油茶AACT基因克隆及原核表达第33-68页
   ·材料第33-35页
     ·植物材料第33页
     ·菌株与质粒第33页
     ·主要试剂第33-34页
     ·主要仪器设备第34-35页
   ·方法第35-50页
     ·油茶EST文库中AACT基因的分离及鉴定第35-36页
     ·油茶种子总RNA提取第36-38页
     ·5’RACE引物设计第38-39页
     ·mRNA反转录获得单链cDNA第39-40页
     ·5’RACE扩增第40-41页
     ·目的片段回收第41-42页
     ·DH5α感受态细胞的制备第42-43页
     ·5’RACE片断的克隆第43页
     ·T载体重组子的制备第43-44页
     ·PCR鉴定RACE片断的重组子第44页
     ·油茶AACT基因全长cDNA克隆第44-46页
     ·油茶AACT基因的生物信息学分析第46页
     ·油茶AACT基因的原核表达第46-50页
   ·结果与分析第50-68页
     ·油茶AACT基因的鉴定第50-52页
     ·油茶AACT基因5’端完整序列扩增第52-55页
     ·油茶AACT基因全长cDNA的克隆第55页
     ·油茶AACT基因的生物信息学分析第55-64页
     ·油茶AACT基因的原核表达第64-68页
3 油茶FAD6基因全长CDNA克隆与生物信息学分析第68-83页
   ·材料第68-69页
     ·植物材料第68页
     ·菌株与质粒第68页
     ·主要试剂第68-69页
     ·主要仪器和用品第69页
   ·方法第69-72页
     ·油茶种子胚乳总RNA提取及电泳检测第69页
     ·mRNA反转录获得单链第69页
     ·简并引物设计第69页
     ·简并引物PCR扩增第69-70页
     ·目的片段回收第70页
     ·感受态细胞的制备第70页
     ·T载体重组子的制备第70页
     ·PCR鉴定重组子及测序第70-71页
     ·扩增CDS引物设计第71页
     ·CDS的扩增及回收第71页
     ·重组子转化感受态细胞第71页
     ·PCR鉴定重组子及测序第71-72页
   ·结果与分析第72-74页
     ·油茶种子总RNA的提取质量第72页
     ·简并RT-PCR产物电泳检测第72页
     ·重组子鉴定结果第72-73页
     ·油茶FAD6基因完整CDS扩增电泳结果第73-74页
   ·油茶FAD6基因的生物信息学分析第74-83页
     ·核苷酸序列分析第74-78页
     ·蛋白质序列分析第78-83页
4 小结与讨论第83-87页
   ·油茶文库建立第83页
   ·油茶种子总RNA的提取第83-84页
   ·RACE合成第84页
   ·扩增基因完整CDS第84-85页
   ·简并PCR第85页
   ·生物信息学分析第85-86页
   ·原核表达第86-87页
5 结论与创新第87-89页
   ·结论第87-88页
   ·创新点第88-89页
参考文献第89-98页
附录A 实验药品第98-101页
附录B 缩略词第101-103页
附录C GeneBank提交序列信息第103-105页
附录D 硕士研究生阶段发表的学术论文第105-106页
致谢第106页

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