摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
1 绪言 | 第13-33页 |
·油茶概述 | 第13-14页 |
·油茶的分子生物学研究 | 第14-16页 |
·油茶的cDNA文库和EST文库的构建 | 第14-15页 |
·油茶的分子标记研究 | 第15-16页 |
·脂肪酸的种类与作用 | 第16-19页 |
·脂肪酸的种类 | 第16-17页 |
·脂肪酸的作用 | 第17-19页 |
·饱和脂肪酸的合成途径及各种催化酶 | 第19-25页 |
·脂肪酸的生物合成 | 第19-20页 |
·乙酰CoA羧化酶 | 第20页 |
·脂肪酸合酶系统 | 第20-24页 |
·脂酰基-酰基载体蛋白硫脂酶 | 第24-25页 |
·不脂肪酸的生物合成及脂肪酸脱饱和酶 | 第25-30页 |
·不饱和脂肪酸的生物合成 | 第25页 |
·脂肪酸脱饱和酶 | 第25-30页 |
·脂肪酸合成的调节 | 第30页 |
·本项研究的意义和技术路线 | 第30-33页 |
2 油茶AACT基因克隆及原核表达 | 第33-68页 |
·材料 | 第33-35页 |
·植物材料 | 第33页 |
·菌株与质粒 | 第33页 |
·主要试剂 | 第33-34页 |
·主要仪器设备 | 第34-35页 |
·方法 | 第35-50页 |
·油茶EST文库中AACT基因的分离及鉴定 | 第35-36页 |
·油茶种子总RNA提取 | 第36-38页 |
·5’RACE引物设计 | 第38-39页 |
·mRNA反转录获得单链cDNA | 第39-40页 |
·5’RACE扩增 | 第40-41页 |
·目的片段回收 | 第41-42页 |
·DH5α感受态细胞的制备 | 第42-43页 |
·5’RACE片断的克隆 | 第43页 |
·T载体重组子的制备 | 第43-44页 |
·PCR鉴定RACE片断的重组子 | 第44页 |
·油茶AACT基因全长cDNA克隆 | 第44-46页 |
·油茶AACT基因的生物信息学分析 | 第46页 |
·油茶AACT基因的原核表达 | 第46-50页 |
·结果与分析 | 第50-68页 |
·油茶AACT基因的鉴定 | 第50-52页 |
·油茶AACT基因5’端完整序列扩增 | 第52-55页 |
·油茶AACT基因全长cDNA的克隆 | 第55页 |
·油茶AACT基因的生物信息学分析 | 第55-64页 |
·油茶AACT基因的原核表达 | 第64-68页 |
3 油茶FAD6基因全长CDNA克隆与生物信息学分析 | 第68-83页 |
·材料 | 第68-69页 |
·植物材料 | 第68页 |
·菌株与质粒 | 第68页 |
·主要试剂 | 第68-69页 |
·主要仪器和用品 | 第69页 |
·方法 | 第69-72页 |
·油茶种子胚乳总RNA提取及电泳检测 | 第69页 |
·mRNA反转录获得单链 | 第69页 |
·简并引物设计 | 第69页 |
·简并引物PCR扩增 | 第69-70页 |
·目的片段回收 | 第70页 |
·感受态细胞的制备 | 第70页 |
·T载体重组子的制备 | 第70页 |
·PCR鉴定重组子及测序 | 第70-71页 |
·扩增CDS引物设计 | 第71页 |
·CDS的扩增及回收 | 第71页 |
·重组子转化感受态细胞 | 第71页 |
·PCR鉴定重组子及测序 | 第71-72页 |
·结果与分析 | 第72-74页 |
·油茶种子总RNA的提取质量 | 第72页 |
·简并RT-PCR产物电泳检测 | 第72页 |
·重组子鉴定结果 | 第72-73页 |
·油茶FAD6基因完整CDS扩增电泳结果 | 第73-74页 |
·油茶FAD6基因的生物信息学分析 | 第74-83页 |
·核苷酸序列分析 | 第74-78页 |
·蛋白质序列分析 | 第78-83页 |
4 小结与讨论 | 第83-87页 |
·油茶文库建立 | 第83页 |
·油茶种子总RNA的提取 | 第83-84页 |
·RACE合成 | 第84页 |
·扩增基因完整CDS | 第84-85页 |
·简并PCR | 第85页 |
·生物信息学分析 | 第85-86页 |
·原核表达 | 第86-87页 |
5 结论与创新 | 第87-89页 |
·结论 | 第87-88页 |
·创新点 | 第88-89页 |
参考文献 | 第89-98页 |
附录A 实验药品 | 第98-101页 |
附录B 缩略词 | 第101-103页 |
附录C GeneBank提交序列信息 | 第103-105页 |
附录D 硕士研究生阶段发表的学术论文 | 第105-106页 |
致谢 | 第106页 |