我国欧洲型PRRSV的流行病学调查与单克隆抗体的制备
| 附表 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第12-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-19页 |
| 1.1 猪繁殖与呼吸综合征 | 第13页 |
| 1.2 猪繁殖与呼吸综合征病毒 | 第13-16页 |
| 1.2.1 病毒粒子的形态结构 | 第13页 |
| 1.2.2 理化特性 | 第13页 |
| 1.2.3 分类地位 | 第13-14页 |
| 1.2.4 基因组结构及编码蛋白 | 第14-16页 |
| 1.3 欧洲型PRRSV流行病学 | 第16-17页 |
| 1.4 单克隆抗体的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.5 研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 欧洲型PRRSV的流行病学调查 | 第19-34页 |
| 2.1 材料与方法 | 第19-20页 |
| 2.1.1 材料样本 | 第19页 |
| 2.1.2 主要试剂和仪器 | 第19页 |
| 2.1.3 细胞和菌株 | 第19-20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-23页 |
| 2.2.1 样本的处理 | 第20页 |
| 2.2.2 引物设计与合成 | 第20-21页 |
| 2.2.3 病毒RNA的提取和cDNA的合成 | 第21页 |
| 2.2.4 PCR扩增 | 第21-22页 |
| 2.2.5 PCR产物回收 | 第22页 |
| 2.2.6 目的片段连接,转化,涂板和克隆 | 第22-23页 |
| 2.2.7 序列分析 | 第23页 |
| 2.2.8 毒株的分离 | 第23页 |
| 2.3 结果 | 第23-31页 |
| 2.3.1 PCR检测电泳结果 | 第23-24页 |
| 2.3.2 全基因组核苷酸同源性分析 | 第24-25页 |
| 2.3.3 遗传演化分析 | 第25-29页 |
| 2.3.4 氨基酸序列分析 | 第29-30页 |
| 2.3.5 重组分析 | 第30-31页 |
| 2.4 讨论 | 第31-34页 |
| 第三章 欧洲型PRRSV的单克隆抗体制备 | 第34-48页 |
| 3.1 实验材料 | 第34-35页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第34页 |
| 3.1.2 实验材料 | 第34页 |
| 3.1.3 实验试剂和耗材 | 第34-35页 |
| 3.1.4 实验仪器 | 第35页 |
| 3.2 试验方法 | 第35-40页 |
| 3.2.1 抗原的制备 | 第35-36页 |
| 3.2.2 抗原的纯化 | 第36页 |
| 3.2.3 间接免疫荧光 | 第36页 |
| 3.2.4 单克隆抗体的制备 | 第36-37页 |
| 3.2.5 阳性杂交瘤细胞的筛选及亚克隆 | 第37-38页 |
| 3.2.6 细胞的冻存 | 第38页 |
| 3.2.7 细胞复苏 | 第38页 |
| 3.2.8 单克隆抗体腹水的制备 | 第38页 |
| 3.2.9 单克隆抗体的生物学特性分析 | 第38-40页 |
| 3.3 实验结果 | 第40-46页 |
| 3.3.1 免疫原的纯化及鉴定 | 第40-41页 |
| 3.3.2 IFA鉴定小鼠血清 | 第41-42页 |
| 3.3.3 细胞融合及杂交瘤细胞的筛选 | 第42-43页 |
| 3.3.4 杂交瘤细胞抗体分泌稳定性的鉴定 | 第43页 |
| 3.3.5 单克隆抗体的生物学特性分析 | 第43-46页 |
| 3.4 讨论 | 第46-48页 |
| 第四章 全文结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-56页 |
| 附录 | 第56-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简介 | 第59页 |
