| 摘要 | 第10-13页 |
| Abstract | 第13-16页 |
| 第一章 绪论 | 第17-55页 |
| 1.1 癌症发展的影响因素 | 第18-24页 |
| 1.1.1 原癌基因的激活 | 第18-19页 |
| 1.1.2 抑癌基因的失活 | 第19-21页 |
| 1.1.2.1 PTEN诱导肿瘤细胞凋亡 | 第19-20页 |
| 1.1.2.2 PTEN抑制肿瘤细胞侵袭和转移 | 第20页 |
| 1.1.2.3 PTEN ceRNA调控 | 第20页 |
| 1.1.2.4 PTEN与p53相互调控 | 第20页 |
| 1.1.2.5 PTEN抑制P13K/AKT信号通路 | 第20-21页 |
| 1.1.3 细胞凋亡调控基因的失调 | 第21页 |
| 1.1.4 上皮细胞-间充质转化(EMT)过程 | 第21-24页 |
| 1.1.4.1 EMT在恶性肿瘤转移中的作用 | 第22-23页 |
| 1.1.4.2 EMT的形成因素 | 第23-24页 |
| 1.2 增殖、侵袭标志物 | 第24-26页 |
| 1.2.1 增殖标志物 | 第24-25页 |
| 1.2.2 侵袭标志物 | 第25-26页 |
| 1.2.2.1 uPA蛋白 | 第25页 |
| 1.2.2.2 金属蛋白酶 | 第25-26页 |
| 1.3 生物分子及相关细胞活动的生物学检测方法 | 第26-29页 |
| 1.3.1 生物分子的生物学检测方法 | 第26-27页 |
| 1.3.1.1 PCR技术 | 第26页 |
| 1.3.1.2 蛋白免疫印迹 | 第26-27页 |
| 1.3.1.3 免疫组化技术 | 第27页 |
| 1.3.1.4 蛋白质基因组学测序技术 | 第27页 |
| 1.3.2 细胞活动的生物学检测方法 | 第27-29页 |
| 1.3.2.1 细胞增殖 | 第27-28页 |
| 1.3.2.2 细胞迁移 | 第28-29页 |
| 1.3.2.3 细胞侵袭 | 第29页 |
| 1.4 金纳米颗粒在生物分子检测中的应用 | 第29-42页 |
| 1.4.1 金纳米颗粒概述 | 第29-33页 |
| 1.4.1.1 金纳米颗粒的制备方法 | 第30-32页 |
| 1.4.1.2 金纳米颗粒的性质 | 第32-33页 |
| 1.4.1.3 金纳米颗粒的修饰 | 第33页 |
| 1.4.2 基于金纳米颗粒的荧光探针在细胞生物分子检测中的应用 | 第33-42页 |
| 1.5 本论文的选题背景和研究意义 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-55页 |
| 第二章 荧光成像检测PI3K/AKT通路中的多个关键分子以用于评估细胞的迁移和侵袭 | 第55-76页 |
| 2.1 引言 | 第55-56页 |
| 2.2 实验部分 | 第56-63页 |
| 2.2.1 试剂与仪器 | 第56-57页 |
| 2.2.2 DNA及肽链合成 | 第57页 |
| 2.2.3 预测MB结构 | 第57-58页 |
| 2.2.4 金纳米颗粒的制备 | 第58页 |
| 2.2.5 纳米探针的制备 | 第58-59页 |
| 2.2.6 纳米探针上所修饰的MB及肽链数量的确定 | 第59-60页 |
| 2.2.7 纳米探针的特异性实验 | 第60页 |
| 2.2.8 纳米探针的动力学实验 | 第60页 |
| 2.2.9 纳米探针对DNA靶链、MMP-9蛋白的荧光响应 | 第60-61页 |
| 2.2.10 细胞培养 | 第61页 |
| 2.2.11 MTT实验 | 第61页 |
| 2.2.12 探针在细胞中的共聚焦成像实验 | 第61-62页 |
| 2.2.13 实时荧光定量RT-PCR | 第62页 |
| 2.2.14 Western Blot分析 | 第62-63页 |
| 2.2.15 细胞迁移实验 | 第63页 |
| 2.2.16 细胞侵袭实验 | 第63页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第63-72页 |
| 2.3.1 多色荧光纳米探针的制备与表征 | 第63-65页 |
| 2.3.2 多色纳米探针的化学体系研究 | 第65-67页 |
| 2.3.3 MTT实验 | 第67-68页 |
| 2.3.4 多色纳米探针的细胞内成像 | 第68-72页 |
| 2.4 结论 | 第72页 |
| 参考文献 | 第72-76页 |
| 第三章 复合纳米荧光探针可视化研究乳腺癌细胞增殖和侵袭并用于药效评估 | 第76-107页 |
| 3.1 引言 | 第76-78页 |
| 3.2 实验部分 | 第78-85页 |
| 3.2.1 试剂与仪器 | 第78页 |
| 3.2.2 DNA及肽链合成 | 第78-79页 |
| 3.2.3 MB的结构 | 第79页 |
| 3.2.4 金纳米颗粒(AuNPs)的制备 | 第79页 |
| 3.2.5 纳米探针的制备 | 第79-80页 |
| 3.2.6 纳米探针上所修饰的MB及肽链数量的确定 | 第80-81页 |
| 3.2.7 纳米探针的特异性实验 | 第81页 |
| 3.2.8 纳米探针的动力学实验 | 第81页 |
| 3.2.9 纳米探针对DNA靶链、uPA蛋白的荧光响应 | 第81-82页 |
| 3.2.10 细胞培养 | 第82页 |
| 3.2.11 MTT实验 | 第82页 |
| 3.2.12 探针在细胞中的共聚焦成像实验 | 第82-83页 |
| 3.2.13 实时荧光定量RT-PCR | 第83页 |
| 3.2.14 Western Blot分析 | 第83-84页 |
| 3.2.15 细胞计数法绘制细胞生长曲线 | 第84页 |
| 3.2.16 CCK-8细胞增殖检测 | 第84页 |
| 3.2.17 CFDA-SE标记法检测细胞增殖 | 第84-85页 |
| 3.2.18 细胞侵袭实验 | 第85页 |
| 3.2.19 活体成像实验 | 第85页 |
| 3.2.20 组织免疫荧光染色 | 第85页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第85-101页 |
| 3.3.1 复合纳米荧光探针的制备与表征 | 第85-87页 |
| 3.3.2 复合纳米探针的化学体系研究 | 第87-88页 |
| 3.3.3 MTT实验 | 第88-89页 |
| 3.3.4 纳米探针的细胞内成像 | 第89-100页 |
| 3.3.4.1 纳米探针在不同乳腺细胞内的成像 | 第89-92页 |
| 3.3.4.2 正常细胞经癌细胞影响的细胞内成像 | 第92-94页 |
| 3.3.4.3 癌细胞经药物处理后的细胞内成像 | 第94-100页 |
| 3.3.5 纳米探针在动物模型中的应用 | 第100-101页 |
| 3.4 结论 | 第101页 |
| 参考文献 | 第101-107页 |
| 第四章 肿瘤细胞上皮间质转化(EMT)和凋亡同时荧光可视化标度靶向EMT药物疗效 | 第107-137页 |
| 4.1 前言 | 第107-109页 |
| 4.2 实验部分 | 第109-116页 |
| 4.2.1 试剂与仪器 | 第109页 |
| 4.2.2 DNA及肽链合成 | 第109-110页 |
| 4.2.3 MB的结构 | 第110页 |
| 4.2.4 金纳米颗粒(AuNPs)的制备 | 第110页 |
| 4.2.5 纳米探针的制备 | 第110-111页 |
| 4.2.6 纳米探针上所修饰的MB及肽链数量的确定 | 第111-112页 |
| 4.2.7 纳米探针的特异性实验 | 第112页 |
| 4.2.8 纳米探针的动力学实验 | 第112页 |
| 4.2.9 纳米探针对DNA靶链、Caspase-3蛋白的荧光响应 | 第112-113页 |
| 4.2.10 细胞培养 | 第113页 |
| 4.2.11 MTT实验 | 第113页 |
| 4.2.12 探针在细胞中的共聚焦成像实验 | 第113-114页 |
| 4.2.13 实时荧光定量RT-PCR | 第114-115页 |
| 4.2.14 Western Blot分析 | 第115页 |
| 4.2.15 活体实验 | 第115-116页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第116-131页 |
| 4.3.1 复合纳米探针的制备与表征 | 第116-119页 |
| 4.3.2 复合纳米探针的化学体系研究 | 第119-121页 |
| 4.3.3 MTT实验 | 第121页 |
| 4.3.4 纳米探针的细胞内成像 | 第121-130页 |
| 4.3.4.1 纳米探针在可视化检测EMT和凋亡过程的细胞内成像 | 第121-124页 |
| 4.3.4.2 纳米探针在研究EMT过程和凋亡过程相互关系的细胞内成像 | 第124-126页 |
| 4.3.4.3 纳米探针可视化研究EMT过程对药物疗效影响的细胞内成像 | 第126-130页 |
| 4.3.5 活体实验 | 第130-131页 |
| 4.4 结论 | 第131-132页 |
| 参考文献 | 第132-137页 |
| 第五章 金硒探针实时原位荧光成像检测MCF-7和PANC-1细胞中uPA和MMP-9蛋白表达的上下游关系 | 第137-158页 |
| 5.1 引言 | 第137-139页 |
| 5.2 实验部分 | 第139-144页 |
| 5.2.1 试剂与仪器 | 第139-140页 |
| 5.2.2 肽链设计与合成 | 第140页 |
| 5.2.3 金纳米颗粒(AuNPs)的制备 | 第140页 |
| 5.2.4 纳米探针的制备 | 第140-141页 |
| 5.2.5 纳米探针上所修饰的肽链数量的确定 | 第141页 |
| 5.2.6 GSH影响实验 | 第141-142页 |
| 5.2.7 纳米探针的特异性实验 | 第142页 |
| 5.2.8 纳米探针的动力学实验 | 第142页 |
| 5.2.9 纳米探针对目标蛋白的荧光响应 | 第142页 |
| 5.2.10 细胞培养 | 第142页 |
| 5.2.11 MTT实验 | 第142-143页 |
| 5.2.12 纳米探针的细胞摄取机制 | 第143页 |
| 5.2.13 生物硫醇对纳米探针的影响 | 第143页 |
| 5.2.14 探针在细胞中的共聚焦成像实验 | 第143-144页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第144-153页 |
| 5.3.1 纳米探针的合成与表征 | 第144-146页 |
| 5.3.2 GSH对探针稳定性的影响 | 第146-147页 |
| 5.3.3 纳米探针的化学体系研究 | 第147-148页 |
| 5.3.4 MTT实验 | 第148页 |
| 5.3.5 细胞摄取机制研究 | 第148-149页 |
| 5.3.6 生物硫醇的影响分析 | 第149-150页 |
| 5.3.7 蛋白表达及上下游关系的荧光成像 | 第150-153页 |
| 5.4 结论 | 第153页 |
| 参考文献 | 第153-158页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文及参与的课题 | 第158-159页 |
| 致谢 | 第159-160页 |
