中文摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-6页 |
缩略语表 | 第10-12页 |
绪论 | 第12-17页 |
第一部分 构建胰岛β细胞OGA特异性敲除小鼠模型 | 第17-32页 |
1 材料与试剂 | 第17-20页 |
1.1 试验动物 | 第17页 |
1.2 实验仪器及器材 | 第17-18页 |
1.3 实验试剂及药物 | 第18-19页 |
1.4 实验试剂配制 | 第19-20页 |
2 实验方法 | 第20-26页 |
2.1 运用Cre/LoxP重组酶系统构建OGA胰岛β细胞特异性敲除小鼠 | 第20-22页 |
2.2 小鼠基因型鉴定 | 第22-24页 |
2.3 小鼠胰腺组织采集 | 第24-25页 |
2.4 通过免疫组织化学染色法验证敲除结果 | 第25-26页 |
3 实验结果 | 第26-29页 |
3.1 胰岛β细胞OGA特异性敲除小鼠基因型鉴定结果 | 第26-27页 |
3.2 胰岛β细胞OGA特异性敲除小鼠模型验证结果 | 第27-29页 |
4 结果分析与讨论 | 第29-32页 |
第二部 分探讨无诱导条件下的胰岛β细胞OGA敲除小鼠自身糖代谢调节情况 | 第32-41页 |
1 材料与试剂 | 第32-33页 |
1.1 实验动物 | 第32页 |
1.2 实验仪器及器材 | 第32页 |
1.3 实验试剂及药物 | 第32-33页 |
2 实验方法 | 第33-35页 |
2.1 检测两组小鼠体质量及血糖 | 第33页 |
2.2 经腹腔注射的葡糖糖耐量实验(IPGTT) | 第33页 |
2.3 经腹腔注射的胰岛素耐量实验(IPITT) | 第33页 |
2.4 小鼠眼眶静脉取血 | 第33-34页 |
2.5 样品的收集与保存 | 第34页 |
2.6 ELASA法测定小鼠空腹胰岛素含量 | 第34页 |
2.7 统计学方法 | 第34-35页 |
3 实验结果 | 第35-39页 |
3.1 胰岛β细胞OGA敲除小鼠与WT对照组小鼠空腹血糖及体质量无明显差异 | 第35-36页 |
3.2 胰岛β细胞OGA特异性敲除小鼠葡萄糖耐量受损 | 第36-37页 |
3.3 胰岛β细胞OGA缺失可降低雄性小鼠胰岛素敏感性 | 第37-38页 |
3.4 胰岛β细胞OGA小鼠与野生对照小鼠相比空腹胰岛素含量无明显差异 | 第38-39页 |
4 结果分析与讨论 | 第39-41页 |
第三部分 胰岛β细胞OGA缺失可加重高脂饮食诱导的糖代谢紊乱 | 第41-53页 |
1 材料与试剂 | 第41-43页 |
1.1 实验动物 | 第41页 |
1.2 实验仪器及器材 | 第41-42页 |
1.3 实验试剂及药物 | 第42-43页 |
1.4 实验溶液配制 | 第43页 |
2 实验方法 | 第43-45页 |
2.1 小鼠分组 | 第43页 |
2.2 检测空腹体质量及血糖 | 第43页 |
2.3 经腹腔葡萄糖耐量实验(IPGTT) | 第43页 |
2.4 经腹腔胰岛素耐量实验(IPITT) | 第43页 |
2.5 小鼠眼眶采血 | 第43页 |
2.6 血清样品采集与保存 | 第43页 |
2.7 采用ELASA方法测定小鼠空腹胰岛素含量 | 第43页 |
2.8 小鼠胰腺石蜡切片免疫荧光染色 | 第43-44页 |
2.9 小鼠胰腺石蜡切片DABTUNEL染色 | 第44-45页 |
2.10 统计学方法 | 第45页 |
3 实验结果 | 第45-51页 |
3.1 不同基因型小鼠在不同饮食作用后空腹血糖及空腹体质量变化情况 | 第45-46页 |
3.2 胰岛β细胞OGA缺失可加重高脂饮食导致的糖耐量受损 | 第46-47页 |
3.3 胰岛β细胞OGA缺失可使高脂饮食导致的胰岛素敏感性减低更明显 | 第47页 |
3.4 经HFD饲养后的OGA β cell KO组小鼠的空腹血糖较WT组减低 | 第47-48页 |
3.5 OGA β cell KO组小鼠在高脂饮食28周后出现奇异变形杆菌感染的皮肤病变 | 第48-50页 |
3.6 石蜡切片免疫荧光染色显示HFD OGA β cell KO组小鼠胰岛素分泌减低 | 第50-51页 |
4 结果分析与讨论 | 第51-53页 |
第四部分 胰岛β细胞OGA基因缺失可引起肠道菌群分布发生改变 | 第53-62页 |
1 实验材料 | 第53页 |
1.1 实验动物 | 第53页 |
1.2 主要仪器及器材 | 第53页 |
2 实验方法 | 第53页 |
3 实验结果 | 第53-61页 |
3.1 小鼠分组结果 | 第53页 |
3.2 粪便DNA提取结果 | 第53-55页 |
3.3 OTU聚类及抽平处理 | 第55页 |
3.4 物种多样性分析 | 第55-61页 |
4 结果分析与讨论 | 第61-62页 |
结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-69页 |
攻读学位期间科研成果及获奖情况 | 第69-70页 |
致谢 | 第70页 |