| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-7页 |
| 一 引言 | 第11-18页 |
| 1.1 甜瓜简介 | 第11页 |
| 1.2 植物MADS-box基因的研究进展 | 第11-14页 |
| 1.2.1 MADS-box蛋白的结构 | 第11-12页 |
| 1.2.2 MADS-box基因家族的分类 | 第12页 |
| 1.2.3 MADS-box基因在植物花器官发育中的研究进展 | 第12页 |
| 1.2.4 花器官的ABC(D)E发育模式 | 第12-14页 |
| 1.3 PI和 AP3 基因的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.4 CRISPR/Cas系统概述 | 第15-17页 |
| 1.5 本研究目的及意义 | 第17-18页 |
| 二 材料和方法 | 第18-25页 |
| 2.1 材料 | 第18页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第18页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第18页 |
| 2.1.3 菌种与质粒 | 第18页 |
| 2.2 方法 | 第18-25页 |
| 2.2.1 生物信息学分析 | 第18-19页 |
| 2.2.2 目的基因的克隆 | 第19-20页 |
| 2.2.3 CmPI基因的表达特性分析 | 第20页 |
| 2.2.4 超表达载体的构建 | 第20-21页 |
| 2.2.5 CRISPR-Cas9 载体的构建 | 第21-23页 |
| 2.2.6 甜瓜的稳定遗传 | 第23页 |
| 2.2.7 T_1 代转化植株的检测 | 第23-24页 |
| 2.2.8 T_2和T_3 代超表达转化植株的检测 | 第24页 |
| 2.2.9 T_3 代植株中花发育相关基因的表达分析 | 第24页 |
| 2.2.10 CmPI基因下游相关调控基因的表达分析 | 第24页 |
| 2.2.11 雄花数量统计分析 | 第24-25页 |
| 三 结果与分析 | 第25-43页 |
| 3.1 生物信息学分析 | 第25-29页 |
| 3.1.1 蛋白序列的理化性质 | 第25页 |
| 3.1.2 亲疏水性分析 | 第25-26页 |
| 3.1.3 亚细胞定位 | 第26页 |
| 3.1.4 信号肽分析 | 第26页 |
| 3.1.5 启动子分析 | 第26-27页 |
| 3.1.6 序列比对及系统发生分析 | 第27-29页 |
| 3.1.7 保守基序分析 | 第29页 |
| 3.2 甜瓜CmPI基因全长c DNA的克隆 | 第29-32页 |
| 3.2.1 RT-PCR扩增的产物分析 | 第29-30页 |
| 3.2.2 重组质粒的筛选 | 第30页 |
| 3.2.3 序列分析 | 第30-32页 |
| 3.3 CmPI基因的表达特性分析 | 第32页 |
| 3.4 超表达载体的构建 | 第32-34页 |
| 3.4.1 重组质粒的PCR鉴定 | 第32-33页 |
| 3.4.2 重组质粒的酶切鉴定 | 第33-34页 |
| 3.5 基因编辑载体的构建 | 第34-35页 |
| 3.5.1 g RNA表达盒的构建 | 第34-35页 |
| 3.5.2 菌体PCR检测 | 第35页 |
| 3.6 甜瓜的遗传转化及转基因植株检测 | 第35-39页 |
| 3.6.1 甜瓜的遗传转化 | 第35-36页 |
| 3.6.2 T_1 代转化植株的检测 | 第36-38页 |
| 3.6.3 T_2和T_3 代超表达转化植株的检测 | 第38-39页 |
| 3.7 T_3 超表达转化植株中CmPI基因的表达分析 | 第39-40页 |
| 3.8 T_3 代转化植株中花发育相关基因的表达分析 | 第40页 |
| 3.9 甜瓜转化植株CmPI下游基因表达量分析 | 第40-41页 |
| 3.10 花数量统计分析 | 第41-43页 |
| 四 讨论 | 第43-45页 |
| 五 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 附录 | 第54-55页 |
