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辅助分子伴侣SlBAG蛋白在番茄抗病反应中的功能研究

致谢第6-10页
摘要第10-12页
Abstract第12-13页
第一章 文献综述第14-22页
    1.1 植物与B.cinerea的互作机制第14-16页
        1.1.1 B.cinerea的侵染机制第14-15页
        1.1.2 植物PTI和ETI对B.cinerea的抗性研究第15-16页
        1.1.3 植物细胞坏死调节机制对B.cinerea的抗性研究第16页
    1.2 分子伴侣调节因子BAG家族研究进展第16-21页
        1.2.1 BAG家族的发现第16-17页
        1.2.2 植物BAG蛋白结构特征第17-18页
        1.2.3 BAG蛋白在植物抗病中的作用第18-19页
        1.2.4 BAG蛋白在植物生长发育中的作用第19-20页
        1.2.5 BAG蛋白在植物胁迫响应中的作用第20-21页
    1.3 本研究的主要目的和主要内容第21-22页
第二章 材料与方法第22-33页
    2.1 实验材料第22-23页
        2.1.1 植物材料第22页
        2.1.2 植物材料的培养及处理第22-23页
        2.1.3 生化试剂第23页
        2.1.4 载体与菌株第23页
    2.2 实验方法第23-33页
        2.2.1 SlBAG家族基因的鉴定与命名第23页
        2.2.2 植物总RNA的提取与反转录第23-24页
        2.2.3 基因的克隆鉴定第24页
        2.2.4 荧光实时定量PCR表达分析第24-25页
        2.2.5 VIGS体系、依赖病毒的过表达番茄体系的构建第25-26页
            2.2.5.1 病毒介导的基因沉默载体和过表达载体构建第25页
            2.2.5.2 利用农杆菌转化法构建基因沉默或过表达体系第25-26页
        2.2.6 本氏烟瞬时过表达体系的建立第26-27页
            2.2.6.1 瞬时过表达载体的构建第26-27页
            2.2.6.2 用农杆菌转化法构建本氏烟瞬时过表达体系第27页
        2.2.7 蛋白质免疫印迹分析(Western blot)第27-28页
        2.2.8 灰霉菌的培养与接种第28-29页
            2.2.8.1 灰霉菌的培养第28页
            2.2.8.2 灰霉菌的接种第28-29页
            2.2.8.3 灰霉菌病斑大小的统计第29页
            2.2.8.4 灰霉菌菌量的测定第29页
        2.2.9 DAB染色检测活性氧产生情况第29页
        2.2.10 台酚蓝染色检测细胞坏死情况第29页
        2.2.11 亚细胞定位第29-30页
        2.2.12 酵母筛库第30页
        2.2.13 酵母双杂验证第30页
        2.2.14 双分子荧光互补试验第30-31页
        2.2.15 Luciferase实验第31页
        2.2.16 免疫共沉淀(Co-IP)试验第31-32页
        2.2.17 化学发光法ROS测定第32-33页
第三章 番茄SlBAG5在番茄对B.cinerea抗性中的作用第33-65页
    3.1 SlBAG家族基因的鉴定和生物信息学分析第33-39页
        3.1.1 SlBAG家族基因的鉴定第33-34页
        3.1.2 SlBAG家族成员的系统进化树构建第34页
        3.1.3 SlBAG家族成员的序列分析第34-37页
        3.1.4 SlBAG家族成员的蛋白结构域分析第37-39页
    3.2 SlBAG家族基因的表达模式分析第39-43页
        3.2.1 SlBAG家族基因组织特异性表达分析第39页
        3.2.2 SlBAG家族基因在激素诱导下的表达模式分析第39-40页
        3.2.3 SlBAG家族基因在灰霉菌诱导下的表达模式分析第40-43页
    3.3 SlBAG家族成员的亚细胞定位第43-45页
    3.4 SlBAG家族基因的抗病功能研究第45-65页
        3.4.1 沉默SlBAG5基因增强灰霉菌诱导的番茄抗病反应第47-49页
        3.4.2 在本氏烟中瞬时过表达SlBAG5基因减弱灰霉菌诱导的抗性反应第49-52页
        3.4.3 过表达SlBAG5基因减弱灰霉菌诱导的番茄抗病反应第52-56页
        3.4.4 SlBAG5基因沉默或过表达改变了灰霉菌诱导的SA、JA/ET途径响应基因的表达第56-58页
        3.4.5 SlBAG5基因沉默或过表达影响chitin介导的PTI反应第58-60页
        3.4.6 SlBAG5互作蛋白的筛选第60-65页
第四章 小结与讨论第65-69页
    4.1 讨论第65-68页
    4.2 展望第68-69页
参考文献第69-75页
附录Ⅰ 本文引物序列第75-80页

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