| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-18页 |
| 1.1 性别决定机制的概述 | 第9-10页 |
| 1.2 昆虫性别决定的系统进化 | 第10-12页 |
| 1.3 膜翅目昆虫性别决定的几种模式 | 第12页 |
| 1.4 蜜蜂性别决定分子机制 | 第12-17页 |
| 1.4.1 蜜蜂csd基因 | 第12-14页 |
| 1.4.2 蜜蜂fem(feminizer)基因 | 第14-15页 |
| 1.4.3 蜜蜂Amtra2(Apis mellifera transformer 2)基因 | 第15-16页 |
| 1.4.4 蜜蜂Amdsx(Apis mellifera doublesex)基因 | 第16-17页 |
| 1.5 本论文的研究内容和目的 | 第17-18页 |
| 第二章 西方蜜蜂精巢和卵巢差异表达基因分析 | 第18-32页 |
| 2.1 引言 | 第18页 |
| 2.2 材料与方法 | 第18-21页 |
| 2.2.1 供试昆虫 | 第18页 |
| 2.2.2 实验器材及试剂 | 第18页 |
| 2.2.3 样品采集 | 第18-19页 |
| 2.2.4 样品总RNA提取及质量检测 | 第19页 |
| 2.2.5 创建cDNA文库及转录组测序 | 第19页 |
| 2.2.6 转录组测序原始数据质控 | 第19页 |
| 2.2.7 测序数据与参考基因组比对 | 第19-20页 |
| 2.2.8 基因表达水平确定及标准化 | 第20页 |
| 2.2.9 精巢和卵巢的差异表达基因筛选 | 第20页 |
| 2.2.10 差异表达基因的GO和KEGG富集分析 | 第20-21页 |
| 2.3 试验结果与分析 | 第21-30页 |
| 2.3.1 精巢和卵巢转录组测序 | 第21页 |
| 2.3.2 重复相关性评估 | 第21-22页 |
| 2.3.3 差异表达基因的筛选及聚类分析 | 第22-26页 |
| 2.3.4 差异表达基因功能注释 | 第26页 |
| 2.3.5 差异表达基因COG分类 | 第26页 |
| 2.3.6 差异表达基因GO分类 | 第26-28页 |
| 2.3.7 GO和KEGG富集分析 | 第28-30页 |
| 2.4 讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 西方蜜蜂Ampabp2的功能研究 | 第32-40页 |
| 3.1 引言 | 第32页 |
| 3.2 材料与方法 | 第32-36页 |
| 3.2.1 供试昆虫 | 第32页 |
| 3.2.2 主要试剂及仪器 | 第32-33页 |
| 3.2.3 主要溶液的配制 | 第33页 |
| 3.2.4 引物与目的基因 | 第33页 |
| 3.2.5 RNA的提取 | 第33-34页 |
| 3.2.6 RNA的检测 | 第34-35页 |
| 3.2.7 反转录合成第一链cDNA | 第35页 |
| 3.2.8 Ampabp2基因在雌雄不同发育时期的mRNA表达分析 | 第35-36页 |
| 3.2.9 Ampabp2基因的RNA干扰 | 第36页 |
| 3.3 结果与分析 | 第36-38页 |
| 3.3.1 Ampabp2基因在雌雄不同发育时期的表达分析 | 第36-37页 |
| 3.3.2 Ampabp2基因的RNAi分析 | 第37-38页 |
| 3.4 讨论 | 第38-40页 |
| 第四章 蜜蜂Amrbp1与Csd的互作研究 | 第40-49页 |
| 4.1 引言 | 第40页 |
| 4.2 材料与方法 | 第40-45页 |
| 4.2.1 主要试剂及仪器 | 第40页 |
| 4.2.2 主要溶液的配制 | 第40-41页 |
| 4.2.3 引物与目的基因 | 第41页 |
| 4.2.4 蜜蜂样品采集 | 第41页 |
| 4.2.5 RNA的提取及检测 | 第41页 |
| 4.2.6 cDNA的制备及检测 | 第41页 |
| 4.2.7 Amrbp1基因在西方蜜蜂雌雄早期胚胎发育时期的表达谱分析 | 第41页 |
| 4.2.8 Amrbp1的原核表达及纯化 | 第41-43页 |
| 4.2.9 CsdA和GST空载的原核表达 | 第43页 |
| 4.2.10 CsdA和GST空载蛋白纯化 | 第43-44页 |
| 4.2.11 GST pull-down检测Amrbp1蛋白和Csd蛋白的相互作用 | 第44-45页 |
| 4.2.12 GST pull-down的Western Blot检测 | 第45页 |
| 4.3 结果与分析 | 第45-48页 |
| 4.3.1 Amrbp1基因在西方蜜蜂雌雄不同发育时期的表达 | 第45-46页 |
| 4.3.2 pET15b-Amrbp1重组质粒的诱导表达 | 第46-47页 |
| 4.3.3 pGEX-4T-1-csdA重组质粒的诱导表达 | 第47-48页 |
| 4.3.4 GSTpull-down检测Amrbp1蛋白和Csd蛋白的相互作用 | 第48页 |
| 4.4 讨论 | 第48-49页 |
| 第五章 结论与展望 | 第49-50页 |
| 5.1 主要结论 | 第49页 |
| 5.2 研究展望 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 攻读硕士期间发表论文情况 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
