摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
引言 | 第11-15页 |
第一部分 LPC诱导的HUVE-12损伤模型的制备 | 第15-25页 |
1.1 材料与试剂 | 第15-16页 |
1.1.1 细胞系 | 第15页 |
1.1.2 试剂与耗材 | 第15-16页 |
1.1.3 主要试剂的配制 | 第16页 |
1.1.4 仪器设备 | 第16页 |
1.2 实验方法 | 第16-20页 |
1.2.1 HUVE-12培养 | 第16-17页 |
1.2.2 实验分组 | 第17页 |
1.2.3 CCK-8试剂盒检测LPC对HUVE-12增殖的影响 | 第17-18页 |
1.2.4 LDH试剂盒测LPC损伤HUVE-12上清中LDH含量 | 第18页 |
1.2.5 划痕实验测LPC对HUVE-12迁移的影响 | 第18-19页 |
1.2.6 Western Blot检测 LPC对HUVE-12 TLR4,VEGF蛋白的影响 | 第19-20页 |
1.2.7 统计学分析 | 第20页 |
1.3 结果 | 第20-22页 |
1.3.1 LPC抑制HUVE-12增殖 | 第20页 |
1.3.2 LPC促进HUVE-12 LDH分泌 | 第20-21页 |
1.3.3 LPC促进HUVE-12迁移 | 第21-22页 |
1.3.4 LPC上调HUVE-12 TLR4、VEGF蛋白表达 | 第22页 |
1.4 讨论 | 第22-24页 |
1.5 小结 | 第24-25页 |
第二部分 DFMG对LPC诱导的HUVE-12内皮小管形成的影响 | 第25-36页 |
2.1 材料与试剂 | 第25页 |
2.1.1 细胞系 | 第25页 |
2.1.2 药品与试剂 | 第25页 |
2.1.3 主要试剂的配制 | 第25页 |
2.1.4 仪器与设备 | 第25页 |
2.2 实验方法 | 第25-29页 |
2.2.1 细胞培养 | 第25页 |
2.2.2 实验分组 | 第25-26页 |
2.2.3 条件培养基的配制 | 第26页 |
2.2.4 CCK-8试剂盒测DFMG对LPC诱导的HUVE-12增殖的影响 | 第26页 |
2.2.5 LDH试剂盒测DFMG对LPC诱导的HUVE-12 LDH的影响 | 第26页 |
2.2.6 划痕法检测DFMG对LPC诱导的HUVE-12迁移的影响 | 第26页 |
2.2.7 Matrigel基质胶血管形成试验检测DFMG对LPC诱导的HUVE-12内皮小管形成的影响 | 第26-27页 |
2.2.8 qPCR测DFMG对LPC诱导的HUVE-12 TLR4、VEGF mRNA的影响 | 第27-29页 |
2.2.9 Western Blot检测DFMG对LPC诱导的HUVE-12 TLR4、VEGF蛋白的影响 | 第29页 |
2.2.10 统计学分析 | 第29页 |
2.3 结果 | 第29-34页 |
2.3.1 DFMG对LPC诱导的HUVE-12增殖的影响 | 第29-30页 |
2.3.2 DFMG对LPC诱导的HUVE-12 LDH分泌的影响 | 第30页 |
2.3.3 DFMG对LPC诱导的HUVE-12迁移的影响 | 第30-31页 |
2.3.4 DFMG对LPC诱导的HUVE-12内皮小管形成的影响 | 第31-32页 |
2.3.5 DFMG对LPC诱导的HUVE-12 TLR4、VEGF mRNA的影响 | 第32-33页 |
2.3.6 DFMG对LPC诱导的HUVE-12 TLR4、VEGF蛋白的影响 | 第33-34页 |
2.4 讨论 | 第34-35页 |
2.5 小结 | 第35-36页 |
第三部分 DFMG干预TLR4信号通路对LPC诱导的HUVE-12内皮小管形成的影响 | 第36-46页 |
3.1 材料与试剂 | 第36-37页 |
3.1.1 药品与试剂 | 第36页 |
3.1.2 病毒载体 | 第36页 |
3.1.3 引物 | 第36-37页 |
3.1.4 主要试剂的配制 | 第37页 |
3.1.5 仪器与设备 | 第37页 |
3.2 实验方法 | 第37-39页 |
3.2.1 细胞培养 | 第37页 |
3.2.2 TLR4慢病毒感染HUVE-12及稳定细胞系的筛选 | 第37-38页 |
3.2.3 qPCR检测稳定细胞系中TLR4的表达 | 第38页 |
3.2.4 qPCR检测DFMG干预TLR4信号通路对LPC诱导的HUVE-12VEGF mRNA的影响 | 第38-39页 |
3.2.5 Matrigel基质胶内皮小管形成试验检测DFMG干预TLR4信号通路对LPC诱导的HUVE-12 VEGF内皮小管形成的影响 | 第39页 |
3.2.6 数据统计分析 | 第39页 |
3.3 结果 | 第39-43页 |
3.3.1 筛选稳定TLR4过表达及TLR4抑制表达的HUVE-12系 | 第39-40页 |
3.3.2 qPCR检测稳定感染细胞系中TLR4表达 | 第40-42页 |
3.3.3 DFMG干预TLR4信号通路对LPC诱导的HUVE-12血管形成的影响 | 第42-43页 |
3.4 讨论 | 第43-45页 |
3.5 小结 | 第45-46页 |
结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-53页 |
综述 | 第53-66页 |
参考文献 | 第59-66页 |
英文缩写略词索引 | 第66-67页 |
攻读硕士学位期间的主要成果 | 第67-68页 |
致谢 | 第68-70页 |