摘要 | 第3-6页 |
Abstract | 第6-9页 |
引言 | 第13-17页 |
第一部分 小鼠成骨细胞与破骨细胞体外共培养体系的建立 | 第17-31页 |
1. 材料和方法 | 第17-23页 |
1.1 主要仪器设备 | 第17-18页 |
1.2 主要试剂与耗材 | 第18页 |
1.3 主要试剂与溶液配制 | 第18-19页 |
1.4 小鼠成骨细胞MC3T3-E1的培养 | 第19页 |
1.5 小鼠单核巨噬细胞RAW264.7的培养及破骨分化诱导 | 第19-20页 |
1.6 小鼠成骨-破骨共培养体系建立 | 第20页 |
1.7 小鼠成骨-破骨共培养体系中成骨细胞活性检测 | 第20页 |
1.8 小鼠成骨-破骨共培养体系中破骨细胞活性检测 | 第20-21页 |
1.9 小鼠成骨-破骨共培养体系的qRT-PCR和western blot检测 | 第21-23页 |
1.10 统计学方法 | 第23页 |
2. 结果 | 第23-28页 |
2.1 小鼠成骨细胞MC3T3-E1的培养及形态 | 第23页 |
2.2 小鼠破骨细胞的培养及形态 | 第23-24页 |
2.3 小鼠成骨-破骨共培养体系的建立 | 第24-25页 |
2.4 小鼠成骨-破骨共培养体系的成骨活性及破骨活性的鉴定 | 第25-26页 |
2.5 小鼠成骨-破骨共培养体系的基因表达检测 | 第26-27页 |
2.6 小鼠成骨-破骨共培养体系的蛋白表达检测 | 第27-28页 |
3. 讨论 | 第28-30页 |
4. 小结 | 第30-31页 |
第二部分 淫羊藿苷对小鼠成骨细胞-破骨细胞共培养体系的影响 | 第31-46页 |
1. 材料和方法 | 第31-36页 |
1.1 主要仪器设备 | 第31-32页 |
1.2 主要试剂与耗材 | 第32页 |
1.3 主要试剂与溶液的配制 | 第32-33页 |
1.4 小鼠成骨-破骨共培养体系的建立及实验分组 | 第33页 |
1.5 CCK-8实验、茜素红染色、TRAP染色检测成骨细胞-破骨细胞共培养体系活性 | 第33页 |
1.6 淫羊藿苷干预后成骨-破骨共培养体系相关基因表达检测 | 第33-35页 |
1.7 淫羊藿苷干预后成骨-破骨共培养体系中蛋白的Western blot检测 | 第35-36页 |
1.8 统计学方法 | 第36页 |
2. 结果 | 第36-43页 |
2.1 CCK-8法检测淫羊藿苷对共培养体系中成骨细胞增殖活性的影响 | 第36-37页 |
2.2 茜素红染色检测淫羊藿苷对共培养体系中成骨细胞活性的影响 | 第37-38页 |
2.3 TRAP染色检测淫羊藿苷对共培养体系中破骨细胞活性的影响 | 第38-39页 |
2.4 淫羊藿苷干预下共培养体系中OPG、TGF-b1、RANKL、ALP、RANK和NF-κb基因表达的检测 | 第39-42页 |
2.5 淫羊藿苷干预下小鼠成骨-破骨共培养体系中蛋白表达检测 | 第42-43页 |
3. 讨论 | 第43-45页 |
4. 小结 | 第45-46页 |
第三部分 成骨-破骨共培养下淫羊藿苷对BMSCS成脂分化影响 | 第46-64页 |
1. 材料和方法 | 第46-51页 |
1.1 主要仪器设备 | 第46-47页 |
1.2 主要试剂与耗材 | 第47-48页 |
1.3 主要试剂与溶液配制 | 第48页 |
1.4 小鼠骨髓基质干细胞的培养 | 第48页 |
1.5 小鼠成骨-破骨细胞共培养体系建立 | 第48页 |
1.6 小鼠成骨-破骨-干细胞共培养体系的建立及实验分组 | 第48页 |
1.7 成骨-破骨-干细胞共培养体系中BMSCs的油红0染色 | 第48-49页 |
1.8 成骨-破骨-干细胞共培养体系中成骨-破骨细胞的HE染色 | 第49页 |
1.9 成骨-破骨-干细胞共培养体系的qRT-PCR和Western blot检测 | 第49-51页 |
1.10 统计学方法 | 第51页 |
2. 结果 | 第51-61页 |
2.1 成骨-破骨-干细胞共培养体系光镜观察 | 第51-52页 |
2.2 小鼠成骨-破骨-干细胞共培养体系的HE染色与油红0染色 | 第52-53页 |
2.3 成骨-破骨-干细胞共培养中相关基因表达的检测 | 第53-55页 |
2.4 成骨-破骨-干细胞共培养中相关蛋白表达的检测 | 第55-56页 |
2.5 淫羊藿苷干预成骨-破骨-干细胞共培养后相关基因表达的检测 | 第56-60页 |
2.6 淫羊藿苷干预成骨-破骨-干细胞共培养后相关蛋白表达的检测 | 第60-61页 |
3. 讨论 | 第61-63页 |
4. 小结 | 第63-64页 |
第四部分 临床患者骨组织PPARΓ表达程度与骨密度关系 | 第64-73页 |
1. 材料和方法 | 第64-67页 |
1.1 主要仪器设备 | 第64-65页 |
1.2 主要试剂与耗材 | 第65页 |
1.3 临床资料采集及分析 | 第65页 |
1.4 临床患者骨组织PPARγ的检测 | 第65-66页 |
1.5 统计学分析 | 第66-67页 |
2. 结果 | 第67-71页 |
2.1 临床资料分析及PPARγ基因与蛋白表达情况 | 第67-68页 |
2.2 临床患者PPARγ基因、蛋白表达水平与BMD相关关系 | 第68-69页 |
2.3 对照组与骨质疏松患者PPARγ表达水平差异 | 第69-71页 |
3. 讨论 | 第71-72页 |
4. 小结 | 第72-73页 |
结语 | 第73-74页 |
在校期间发表论文情况 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
统计学审核证明 | 第79页 |