| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略词说明清单 | 第14-17页 |
| 引言 | 第17-20页 |
| 第一部分 基因Blo t的合成及蛋白FABP的原核表达、纯化 | 第20-50页 |
| 1 研究内容 | 第20-21页 |
| 1.1 合成基因 | 第20页 |
| 1.2 设计并合成引物 | 第20页 |
| 1.3 构建重组表达载体 | 第20-21页 |
| 2 材料和方法 | 第21-40页 |
| 2.1 材料 | 第21-28页 |
| 2.1.1 菌株、质粒及引物 | 第21页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第21-23页 |
| 2.1.3 试剂配制过程 | 第23-28页 |
| 2.2 方法 | 第28-40页 |
| 2.2.1 Blot基因的制备 | 第28-29页 |
| 2.2.2 质粒的提取 | 第29页 |
| 2.2.3 空质粒pET-28a(+)的双酶切鉴定 | 第29-30页 |
| 2.2.4 重组表达质粒pET-28a(+)-Blot的构建 | 第30页 |
| 2.2.5 重组表达质粒pET-28a(+)-Blot的双酶切鉴定 | 第30-31页 |
| 2.2.6 E.coli DH5a感受态细胞的制备及重组质粒pET-28a(+)-Blot的转化 | 第31页 |
| 2.2.7 pET-28a(+)-Blot菌落PCR及筛选阳性克隆、测序 | 第31-32页 |
| 2.2.8 蛋白FABP的小剂量诱导表达 | 第32-33页 |
| 2.2.9 蛋白FABP的SDS-PAGE分析 | 第33-34页 |
| 2.2.10 蛋白FABP的大剂量诱导表达 | 第34-35页 |
| 2.2.11 蛋白FABP的纯化及鉴定 | 第35-36页 |
| 2.2.12 蛋白FABP的最终纯化及鉴定 | 第36页 |
| 2.2.13 纯化产物目的蛋白FABP的免疫印记分析 | 第36-38页 |
| 2.2.14 定量蛋白FABP的浓度 | 第38-40页 |
| 3 结果 | 第40-49页 |
| 3.1 质粒的双酶切鉴定 | 第40-41页 |
| 3.2 目的基因Blot的PCR扩增 | 第41-42页 |
| 3.3 重组质粒pET-28a(+)-Blot的测序鉴定 | 第42-44页 |
| 3.4 目的蛋白FABP的SDS-PAGE分析 | 第44-45页 |
| 3.5 目的蛋白FABP的纯化及SDS-PAGE分析鉴定 | 第45页 |
| 3.6 目的蛋白FABP最终纯化的SDS-PAGE鉴定 | 第45-46页 |
| 3.7 目的蛋白FABP的Western blot鉴定 | 第46-47页 |
| 3.8 纯化的目的蛋白FABP的浓度测定 | 第47-49页 |
| 讨论 | 第49-50页 |
| 第二部分 PI3K/AKT信号通路在FABP特异性免疫治疗中的作用机理研究 | 第50-72页 |
| 1 研究内容 | 第50-51页 |
| 2 材料和方法 | 第51-58页 |
| 2.1 材料 | 第51-54页 |
| 2.1.1 动物材料 | 第51页 |
| 2.1.2 主要试剂材料 | 第51-52页 |
| 2.1.3 主要试剂配制 | 第52-54页 |
| 2.2 方法 | 第54-58页 |
| 2.2.1 制备热带无爪螨粗制提取液 | 第54-55页 |
| 2.2.2 制备哮喘小鼠模型 | 第55页 |
| 2.2.3 特异性免疫治疗 | 第55页 |
| 2.2.4 实验标本取材及指标检测 | 第55-58页 |
| 3 结果 | 第58-70页 |
| 3.1 热带无爪螨粗制提取液浓度的测定 | 第58页 |
| 3.2 BALF中特异性细胞因子IL-4、IL-5、IL-13、IL-17、IL-10和IFN-γ含量的测定 | 第58-60页 |
| 3.3 BALF中细胞分类计数 | 第60-62页 |
| 3.4 测定血清中IgE、IgG_1和IgG_(2a)抗体的水平 | 第62-64页 |
| 3.5 脾上清中IL-4、IL-5、IL-13、IL-17、IL-10和IFN-γ细胞因子含量的测定 | 第64-66页 |
| 3.6 肺组织病理切片染色结果 | 第66-67页 |
| 3.7 肺组织中信号蛋白表达结果 | 第67-70页 |
| 讨论 | 第70-72页 |
| 结论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 作者简介及读研期间主要科研成果 | 第81页 |
