中文摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
缩略词表 | 第6-11页 |
第一部分 前言 | 第11-21页 |
1.1 赤霉素调控植物生长发育的研究进展 | 第11-15页 |
1.1.1 赤霉素合成途径研究进展 | 第11-12页 |
1.1.2 赤霉素信号转导途径研究进展 | 第12-14页 |
1.1.3 DELLA蛋白调控植物生长发育的作用机制 | 第14-15页 |
1.1.4 翻译后修饰调控DELLA蛋白的活性 | 第15页 |
1.2 蛋白磷酸酶PP1的研究进展 | 第15-18页 |
1.2.1 蛋白磷酸酶的分类 | 第15-16页 |
1.2.2 蛋白磷酸酶PP1参与多种生物发育过程 | 第16-18页 |
1.2.3 蛋白磷酸酶TOPP4参与GA信号通路 | 第18页 |
1.3 拟南芥基因的图位克隆技术 | 第18-20页 |
1.3.1 图位克隆技术的发展 | 第18-19页 |
1.3.2 图位克隆技术的原理 | 第19-20页 |
1.4 本论文研究的意义 | 第20-21页 |
第二部分 实验材料与方法 | 第21-33页 |
2.1 实验材料 | 第21-22页 |
2.1.1 拟南芥材料 | 第21页 |
2.1.2 菌种和载体 | 第21页 |
2.1.3 工具酶和试剂盒 | 第21-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-33页 |
2.2.1 拟南芥培养 | 第22页 |
2.2.1.1 土壤栽培 | 第22页 |
2.2.1.2 无菌苗培养 | 第22页 |
2.2.2 图位克隆 | 第22-25页 |
2.2.2.1 杂交 | 第22页 |
2.2.2.2 粗定位 | 第22-24页 |
2.2.2.3 精细定位 | 第24-25页 |
2.2.2.4 测序 | 第25页 |
2.2.3 植物总DNA提取 | 第25-26页 |
2.2.3.1 CTAB法提取植物DNA | 第25-26页 |
2.2.3.2 水煮法提取DNA | 第26页 |
2.2.3.3 试剂盒提取植物DNA | 第26页 |
2.2.4 PCR反应及琼脂糖凝胶电泳检测 | 第26-27页 |
2.2.5 载体构建及农杆菌转化植株 | 第27-29页 |
2.2.5.1 传统的酶切酶连法 | 第27页 |
2.2.5.2 Gateway重组技术 | 第27-28页 |
2.2.5.3 花序浸泡法转化拟南芥 | 第28页 |
2.2.5.4 转基因植株筛选 | 第28-29页 |
2.2.6 实时荧光定量PCR | 第29-30页 |
2.2.6.1 引物设计 | 第29页 |
2.2.6.2 RNA的提取 | 第29页 |
2.2.6.3 cDNA第一链的合成 | 第29页 |
2.2.6.4 qRT-PCR反应 | 第29-30页 |
2.2.7 半薄切片 | 第30页 |
2.2.8 亚历山大花粉染色 | 第30-31页 |
2.2.9 胚胎透明观察 | 第31页 |
2.2.10 扫描电镜 | 第31-33页 |
2.2.10.1 拟南芥种子表面结构观察 | 第31页 |
2.2.10.2 液氮低温冷冻观察 | 第31-33页 |
第三部分 结果与分析 | 第33-55页 |
3.1 topp4-1恢复突变体的筛选鉴定 | 第33-35页 |
3.2 2731突变体的表型鉴定及基因定位 | 第35-42页 |
3.2.1 afo-11突变体的表型观察及鉴定 | 第35-37页 |
3.2.2 2731突变体中恢复topp4-1表型的基因可能是afo | 第37-39页 |
3.2.3 afo-11 topp4-1突变体对外源IAA敏感度降低 | 第39-40页 |
3.2.4 AFO可能参与了GA信号通路 | 第40-42页 |
3.3 2141突变体表型鉴定及基因定位 | 第42-55页 |
3.3.1 ful-2突变体植株的表型观察及鉴定 | 第42-44页 |
3.3.2 ful-2突变体果荚和种子形态发育异常 | 第44-45页 |
3.3.3 ful-2突变体胚珠形态和胚胎发育正常 | 第45-46页 |
3.3.4 ful-2突变体花的发育异常 | 第46-47页 |
3.3.5 ful-2突变体心皮细胞生长停滞导致其果荚和种子形态异常 | 第47-48页 |
3.3.6 导致果荚异常表型的基因是ful | 第48-50页 |
3.3.7 FUL基因点突变不能恢复topp4-1的表型 | 第50-53页 |
3.3.7.1 FUL控制果荚的发育但FUL点突变不能恢复topp4-1的表型 | 第51-52页 |
3.3.7.2 FUL位点的T-DNA插入纯合体SALK_033647不能恢复topp4-1表型 | 第52-53页 |
3.3.8 2141突变体中恢复topp4-1表型的基因可能是rpt | 第53-55页 |
第四部分 讨论 | 第55-59页 |
4.1 AFO与TOPP4存在相互联系 | 第55-57页 |
4.1.1 AFO可能调控了TOPP4的表达量 | 第55-56页 |
4.1.2 AFO可能参与了GA信号通路 | 第56页 |
4.1.3 AFO可能参与了生长素合成或信号转导通路 | 第56-57页 |
4.2 RPT可能是恢复topp4-1表型的基因 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-66页 |
在学期间的科研成果 | 第66-67页 |
致谢 | 第67页 |