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拟南芥topp4-1恢复突变体的表型鉴定和基因定位

中文摘要第3-4页
Abstract第4-5页
缩略词表第6-11页
第一部分 前言第11-21页
    1.1 赤霉素调控植物生长发育的研究进展第11-15页
        1.1.1 赤霉素合成途径研究进展第11-12页
        1.1.2 赤霉素信号转导途径研究进展第12-14页
        1.1.3 DELLA蛋白调控植物生长发育的作用机制第14-15页
        1.1.4 翻译后修饰调控DELLA蛋白的活性第15页
    1.2 蛋白磷酸酶PP1的研究进展第15-18页
        1.2.1 蛋白磷酸酶的分类第15-16页
        1.2.2 蛋白磷酸酶PP1参与多种生物发育过程第16-18页
        1.2.3 蛋白磷酸酶TOPP4参与GA信号通路第18页
    1.3 拟南芥基因的图位克隆技术第18-20页
        1.3.1 图位克隆技术的发展第18-19页
        1.3.2 图位克隆技术的原理第19-20页
    1.4 本论文研究的意义第20-21页
第二部分 实验材料与方法第21-33页
    2.1 实验材料第21-22页
        2.1.1 拟南芥材料第21页
        2.1.2 菌种和载体第21页
        2.1.3 工具酶和试剂盒第21-22页
    2.2 实验方法第22-33页
        2.2.1 拟南芥培养第22页
            2.2.1.1 土壤栽培第22页
            2.2.1.2 无菌苗培养第22页
        2.2.2 图位克隆第22-25页
            2.2.2.1 杂交第22页
            2.2.2.2 粗定位第22-24页
            2.2.2.3 精细定位第24-25页
            2.2.2.4 测序第25页
        2.2.3 植物总DNA提取第25-26页
            2.2.3.1 CTAB法提取植物DNA第25-26页
            2.2.3.2 水煮法提取DNA第26页
            2.2.3.3 试剂盒提取植物DNA第26页
        2.2.4 PCR反应及琼脂糖凝胶电泳检测第26-27页
        2.2.5 载体构建及农杆菌转化植株第27-29页
            2.2.5.1 传统的酶切酶连法第27页
            2.2.5.2 Gateway重组技术第27-28页
            2.2.5.3 花序浸泡法转化拟南芥第28页
            2.2.5.4 转基因植株筛选第28-29页
        2.2.6 实时荧光定量PCR第29-30页
            2.2.6.1 引物设计第29页
            2.2.6.2 RNA的提取第29页
            2.2.6.3 cDNA第一链的合成第29页
            2.2.6.4 qRT-PCR反应第29-30页
        2.2.7 半薄切片第30页
        2.2.8 亚历山大花粉染色第30-31页
        2.2.9 胚胎透明观察第31页
        2.2.10 扫描电镜第31-33页
            2.2.10.1 拟南芥种子表面结构观察第31页
            2.2.10.2 液氮低温冷冻观察第31-33页
第三部分 结果与分析第33-55页
    3.1 topp4-1恢复突变体的筛选鉴定第33-35页
    3.2 2731突变体的表型鉴定及基因定位第35-42页
        3.2.1 afo-11突变体的表型观察及鉴定第35-37页
        3.2.2 2731突变体中恢复topp4-1表型的基因可能是afo第37-39页
        3.2.3 afo-11 topp4-1突变体对外源IAA敏感度降低第39-40页
        3.2.4 AFO可能参与了GA信号通路第40-42页
    3.3 2141突变体表型鉴定及基因定位第42-55页
        3.3.1 ful-2突变体植株的表型观察及鉴定第42-44页
        3.3.2 ful-2突变体果荚和种子形态发育异常第44-45页
        3.3.3 ful-2突变体胚珠形态和胚胎发育正常第45-46页
        3.3.4 ful-2突变体花的发育异常第46-47页
        3.3.5 ful-2突变体心皮细胞生长停滞导致其果荚和种子形态异常第47-48页
        3.3.6 导致果荚异常表型的基因是ful第48-50页
        3.3.7 FUL基因点突变不能恢复topp4-1的表型第50-53页
            3.3.7.1 FUL控制果荚的发育但FUL点突变不能恢复topp4-1的表型第51-52页
            3.3.7.2 FUL位点的T-DNA插入纯合体SALK_033647不能恢复topp4-1表型第52-53页
        3.3.8 2141突变体中恢复topp4-1表型的基因可能是rpt第53-55页
第四部分 讨论第55-59页
    4.1 AFO与TOPP4存在相互联系第55-57页
        4.1.1 AFO可能调控了TOPP4的表达量第55-56页
        4.1.2 AFO可能参与了GA信号通路第56页
        4.1.3 AFO可能参与了生长素合成或信号转导通路第56-57页
    4.2 RPT可能是恢复topp4-1表型的基因第57-59页
参考文献第59-66页
在学期间的科研成果第66-67页
致谢第67页

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