苯丙氨酸羟化酶基因多位点突变检测方法的建立及其在临床样本检测中的初步应用
| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 缩略语对照表 | 第6-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-25页 |
| 1.1 苯丙酮尿症概述 | 第11-14页 |
| 1.1.1 苯丙酮尿症的遗传病学 | 第11-12页 |
| 1.1.2 苯丙酮尿症的致病机理 | 第12-14页 |
| 1.2 苯丙氨酸羟化酶基因概述 | 第14-19页 |
| 1.2.1 苯丙氨酸羟化酶基因的分子生物学 | 第14-16页 |
| 1.2.2 苯丙氨酸羟化酶基因的突变谱 | 第16-19页 |
| 1.3 苯丙酮尿症检测方法概述 | 第19-22页 |
| 1.3.1 基于生化水平的检测方法 | 第19-20页 |
| 1.3.2 基于基因水平的检测方法 | 第20-22页 |
| 1.4 金磁微粒概述 | 第22-23页 |
| 1.4.1 金磁微粒的制备 | 第22页 |
| 1.4.2 金磁微粒在生物学领域中的应用 | 第22-23页 |
| 1.5 论文立题依据及主要工作 | 第23-25页 |
| 1.5.1 研究目的及意义 | 第23页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第23-24页 |
| 1.5.3 主要创新点 | 第24-25页 |
| 第二章 苯丙氨酸羟化酶基因阳性质控体系的建立 | 第25-41页 |
| 2.1 实验原理 | 第25-27页 |
| 2.2 实验材料 | 第27-30页 |
| 2.2.1 实验试剂及仪器 | 第27-28页 |
| 2.2.2 实验试剂的配制 | 第28-30页 |
| 2.3 实验方法 | 第30-34页 |
| 2.3.1 克隆引物的设计及合成 | 第30页 |
| 2.3.2 标准序列基因片段的制备 | 第30-32页 |
| 2.3.3 感受态细胞的制备 | 第32页 |
| 2.3.4 基因克隆 | 第32-33页 |
| 2.3.5 阳性质控体系的验证 | 第33-34页 |
| 2.4 结果与分析 | 第34-38页 |
| 2.4.1 克隆引物的设计及合成 | 第34页 |
| 2.4.2 标准序列基因片段的制备 | 第34-35页 |
| 2.4.3 感受态细胞的制备 | 第35-36页 |
| 2.4.4 基因克隆 | 第36-37页 |
| 2.4.5 阳性质控体系的验证 | 第37-38页 |
| 2.5 本章小结 | 第38-41页 |
| 第三章 苯丙氨酸羟化酶基因突变检测方法的建立 | 第41-63页 |
| 3.1 实验原理 | 第41-43页 |
| 3.2 实验试剂及仪器 | 第43-44页 |
| 3.3 实验方法 | 第44-51页 |
| 3.3.1 特异性引物组的设计及合成 | 第44页 |
| 3.3.2 特异性引物的筛选 | 第44-45页 |
| 3.3.3 检测方法的建立 | 第45-47页 |
| 3.3.4 退火温度的优化 | 第47-48页 |
| 3.3.5 循环数的优化 | 第48-49页 |
| 3.3.6 引物浓度的优化 | 第49-51页 |
| 3.4 结果与分析 | 第51-61页 |
| 3.4.1 特异性引物组的设计及合成 | 第51页 |
| 3.4.2 特异性引物的筛选 | 第51-53页 |
| 3.4.3 检测方法的建立 | 第53-54页 |
| 3.4.4 退火温度的优化 | 第54-56页 |
| 3.4.5 循环数的优化 | 第56-58页 |
| 3.4.6 引物浓度的优化 | 第58-61页 |
| 3.5 本章小结 | 第61-63页 |
| 第四章 苯丙氨酸羟化酶基因突变检测方法的评价 | 第63-75页 |
| 4.1 实验原理 | 第63-64页 |
| 4.2 实验试剂及仪器 | 第64页 |
| 4.3 实验方法 | 第64-68页 |
| 4.3.1 准确性评价 | 第64-65页 |
| 4.3.2 重复性评价 | 第65-66页 |
| 4.3.3 特异性评价 | 第66-67页 |
| 4.3.4 灵敏度评价 | 第67-68页 |
| 4.4 结果与分析 | 第68-72页 |
| 4.4.1 准确性评价 | 第68-69页 |
| 4.4.2 重复性评价 | 第69-71页 |
| 4.4.3 特异性评价 | 第71页 |
| 4.4.4 灵敏度评价 | 第71-72页 |
| 4.5 本章小结 | 第72-75页 |
| 第五章 苯丙氨酸羟化酶基因突变检测方法的临床应用 | 第75-83页 |
| 5.1 实验原理 | 第75页 |
| 5.2 实验试剂及仪器 | 第75-76页 |
| 5.3 实验方法 | 第76页 |
| 5.3.1 临床样本的收集 | 第76页 |
| 5.3.2 临床样本苯丙氨酸羟化酶基因突变的检测 | 第76页 |
| 5.4 结果与分析 | 第76-80页 |
| 5.4.1 临床样本的检测结果 | 第76-79页 |
| 5.4.2 苯丙氨酸羟化酶基因突变频率统计 | 第79-80页 |
| 5.5 本章小结 | 第80-83页 |
| 全文总结 | 第83-87页 |
| 参考文献 | 第87-95页 |
| 致谢 | 第95-96页 |
