| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略语对照表 | 第8-12页 |
| 第1章 文献回顾 | 第12-26页 |
| 1.1 传统方法分离纯化蛋白 | 第12-16页 |
| 1.1.1 离子交换色谱 | 第12-13页 |
| 1.1.2 疏水作用色谱 | 第13-14页 |
| 1.1.3 凝胶色谱 | 第14页 |
| 1.1.4 亲和色谱 | 第14-16页 |
| 1.2 类弹性蛋白样多肽概述 | 第16-20页 |
| 1.2.1 类弹性蛋白样多肽的来源 | 第16-18页 |
| 1.2.2 类弹性蛋白样多肽可逆相变机理 | 第18-19页 |
| 1.2.3 类弹性蛋白样多肽的合成 | 第19-20页 |
| 1.3 类弹性蛋白样多肽的应用 | 第20-24页 |
| 1.3.1 类弹性蛋白样多肽在组织工程方面的应用 | 第21页 |
| 1.3.2 类弹性蛋白样多肽在药物递送中的应用 | 第21-22页 |
| 1.3.3 类弹性蛋白样多肽在蛋白纯化方面的应用 | 第22-24页 |
| 1.4 实验方案与创新 | 第24-26页 |
| 1.4.1 实验方案 | 第24页 |
| 1.4.2 创新及意义 | 第24-26页 |
| 第2章 ELP[H_3S]_n原核表达载体的构建 | 第26-40页 |
| 2.1 实验设备及试剂 | 第26-27页 |
| 2.1.1 实验设备 | 第26页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第26-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-34页 |
| 2.2.1 ELP重复单元基因的制备 | 第27-28页 |
| 2.2.2 ELP克隆载体的构建 | 第28-33页 |
| 2.2.3 ELP原核表达载体的构建 | 第33-34页 |
| 2.3 实验结果 | 第34-37页 |
| 2.3.1 OEPCR结果 | 第34页 |
| 2.3.2 pGel-ELP[H_3S]_5质粒双酶切鉴定 | 第34-35页 |
| 2.3.3 pGel-ELP[H_3S]_5DNA测序结果 | 第35-36页 |
| 2.3.4 pGel-ELP[H_3S]_n(n=10、20、30)质粒双酶切鉴定 | 第36页 |
| 2.3.5 pET-ELP[H_3S]_n(n=10、20、30、40、50、60)质粒酶切鉴定 | 第36-37页 |
| 2.4 讨论 | 第37-40页 |
| 第3章 ELP[H_3S]_n蛋白表达和分离纯化 | 第40-58页 |
| 3.1 实验设备及试剂 | 第40页 |
| 3.1.1 实验设备 | 第40页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第40页 |
| 3.2 实验方法 | 第40-46页 |
| 3.2.1 实验准备 | 第40-43页 |
| 3.2.2 ELP[H_3S]_n蛋白表达 | 第43-45页 |
| 3.2.3 ELP[H_3S]_n蛋白纯化 | 第45-46页 |
| 3.3 实验结果 | 第46-56页 |
| 3.3.1 IPTG诱导表达分析 | 第46-47页 |
| 3.3.2 诱导表达条件的优化 | 第47-49页 |
| 3.3.3 ELP[H_3S]_n亚细胞定位分析 | 第49-50页 |
| 3.3.4 纯化条件优化分析 | 第50-54页 |
| 3.3.5 ITC循环纯化ELP[H_3S]_n蛋白分析 | 第54-56页 |
| 3.4 讨论 | 第56-58页 |
| 第4章 ELP[H_3S]_n标签纯化融合蛋白 | 第58-64页 |
| 4.1 实验方法 | 第58-60页 |
| 4.1.1 融合蛋白的表达载体构建 | 第58-59页 |
| 4.1.2 融合蛋白表达与纯化 | 第59-60页 |
| 4.2 实验结果 | 第60-62页 |
| 4.2.1 融合蛋白表达载体鉴定 | 第60-61页 |
| 4.2.2 融合蛋白表达结果 | 第61页 |
| 4.2.3 融合蛋白的ITC循环纯化 | 第61-62页 |
| 4.3 讨论 | 第62-64页 |
| 结论 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第72-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
