中文摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5-6页 |
第1章 综述 | 第9-13页 |
1 烯醇酶是一种多功能蛋白 | 第9-10页 |
2 烯醇酶与牙周病的发生发展 | 第10-11页 |
3 烯醇酶与龋病 | 第11页 |
4 烯醇酶与细菌耐氟 | 第11-12页 |
5 结束语 | 第12-13页 |
第2章 绪论 | 第13-15页 |
第3章 材料与方法 | 第15-23页 |
3.1 材料 | 第15-16页 |
3.1.1 细菌和载体 | 第15页 |
3.1.2 仪器设备 | 第15页 |
3.1.3 试剂及配制 | 第15-16页 |
3.2 方法 | 第16-23页 |
3.2.1 引物设计 | 第16页 |
3.2.2 Streptococcus mutans UA159-FR细菌培养 | 第16页 |
3.2.3 上下游同源臂及卡那霉素抗性基因 PCR 扩增 | 第16-18页 |
3.2.4 PCR产物的琼脂糖凝胶电泳 | 第18页 |
3.2.5 凝胶回收目的片段 | 第18-19页 |
3.2.6 overlap PCR构建eno基因敲除线性片段 | 第19-20页 |
3.2.7 线性片段与平末端载体的连接 | 第20页 |
3.2.8 连接产物转化至大肠杆菌感受态细胞 | 第20页 |
3.2.9 重组质粒提取 | 第20-21页 |
3.2.10 重组质粒送检测序 | 第21页 |
3.2.11 变形链球菌耐氟菌株感受态细胞的制备 | 第21页 |
3.2.12 eno基因敲除同源重组片段的扩增及PCR产物乙醇纯化 | 第21-22页 |
3.2.13 同源重组DNA线性片段的电击转化至大肠杆菌感受态细胞 | 第22页 |
3.2.14 PCR鉴定eno基因敲除株 | 第22-23页 |
第4章 结果 | 第23-28页 |
4.1 变形链球菌耐氟菌株的培养 | 第23页 |
4.2 变形链球菌耐氟菌株16srDNA鉴定 | 第23-24页 |
4.3 PCR产物的琼脂糖凝胶电泳结果 | 第24页 |
4.4 重组质粒的测序鉴定 | 第24-27页 |
4.5 菌液PCR筛选eno基因敲除菌株 | 第27-28页 |
第5章 讨论 | 第28-33页 |
第6章 结论 | 第33-34页 |
参考文献 | 第34-41页 |
综述参考文献 | 第34-36页 |
正文参考文献 | 第36-41页 |
作者简介及在学期间取得的科研成果 | 第41-42页 |
致谢 | 第42页 |