中文摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5-6页 |
引言 | 第9-12页 |
材料和方法 | 第12-23页 |
1 实验材料 | 第12-16页 |
1.1 细胞系 | 第12页 |
1.2 主要试剂和材料 | 第12-13页 |
1.3 主要仪器与设备 | 第13页 |
1.4 主要抗体 | 第13页 |
1.5 主要试剂配方 | 第13-16页 |
2 实验方法 | 第16-23页 |
2.1 A2-CAR-pCDH和A3-CAR-pCDH载体的构建 | 第16页 |
2.2 慢病毒的包装及CAR-NK92MI细胞的制备 | 第16-18页 |
2.3 流式细胞术分析目的蛋白的表达 | 第18页 |
2.4 蛋白免疫印迹(Westernblotting,WB)分析 | 第18-19页 |
2.5 体外细胞毒性试验 | 第19页 |
2.6 MTT法测细胞增殖试验 | 第19-20页 |
2.7 细胞因子检测试验 | 第20-21页 |
2.8 CAR-T细胞的制备 | 第21-22页 |
2.9 从外周血中分选单核细胞(磁珠分选法) | 第22页 |
2.10 数据分析 | 第22-23页 |
结果 | 第23-34页 |
1.1 A2-CAR-pCDH和A3-CAR-pCDH重组质粒构建 | 第23页 |
1.2 慢病毒包装及滴度测定 | 第23-25页 |
1.3 流式检测CAR-NK92MI细胞 | 第25页 |
1.4 WesternBlotting检测CAR-NK92MI细胞 | 第25-26页 |
1.5 293T-CSF1R和K562-CSF1R细胞的构建及CSF1R抗原的检测 | 第26-27页 |
1.6 CAR-NK92MI的细胞毒性试验 | 第27-29页 |
1.7 NK92MI、A2-CAR-NK92MI和A3-CAR-NK92MI细胞增殖试验 | 第29页 |
1.8 CAR-NK92MI的细胞因子检测 | 第29-30页 |
1.9 A3-CAR-T细胞的构建 | 第30-31页 |
1.10 A3-CAR-T细胞的细胞毒性及细胞因子检测 | 第31-32页 |
1.11 外周血单核细胞的分离及细胞毒性试验 | 第32-34页 |
讨论 | 第34-38页 |
参考文献 | 第38-43页 |
综述 应用嵌合抗原受体修饰的T细胞治疗实体瘤的现状与应用前景 | 第43-59页 |
参考文献 | 第51-59页 |
科研成果 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-62页 |