致谢 | 第7-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
第一章 绪论 | 第17-25页 |
1.1 铅的神经毒性 | 第17-18页 |
1.2 海马、突触与学习记忆 | 第18-19页 |
1.3 树突棘的研究 | 第19页 |
1.4 兴奋性和抑制性突触的平衡 | 第19-20页 |
1.5 铅中毒的防治 | 第20-21页 |
1.6 EGCG的研究进展 | 第21-22页 |
1.7 Wnt通路 | 第22-24页 |
1.8 课题研究的内容 | 第24-25页 |
第二章 铅暴露对大鼠海马神经元突触形成的影响 | 第25-41页 |
2.1 材料与方法 | 第25-34页 |
2.1.1 主要仪器耗材 | 第25页 |
2.1.2 主要试剂 | 第25页 |
2.1.3 海马神经元培养 | 第25-26页 |
2.1.4 电生理实验 | 第26-28页 |
2.1.4.1 主要仪器 | 第26页 |
2.1.4.2 主要试剂和药品 | 第26-27页 |
2.1.4.3 电生理实验步骤 | 第27-28页 |
2.1.5 细胞免疫荧光实验 | 第28-29页 |
2.1.5.1 试剂和药品 | 第28页 |
2.1.5.2 实验步骤 | 第28-29页 |
2.1.5.3 图像分析 | 第29页 |
2.1.6 Western Blot实验 | 第29-33页 |
2.1.6.1 主要仪器 | 第29页 |
2.1.6.2 主要试剂和药品 | 第29页 |
2.1.6.3 主要抗体 | 第29页 |
2.1.6.4 海马组织蛋白的提取 | 第29-30页 |
2.1.6.5 海马组织蛋白浓度的测定及蛋白样品的准备 | 第30-31页 |
2.1.6.6 Western Blot所需溶液配制 | 第31-32页 |
2.1.6.7 Western Blot实验步骤 | 第32-33页 |
2.1.7 细胞表面生物素酰化 | 第33-34页 |
2.1.7.1 试剂 | 第33页 |
2.1.7.2 实验步骤 | 第33-34页 |
2.2 实验结果 | 第34-38页 |
2.2.1 铅暴露对海马神经元树突棘的影响 | 第34页 |
2.2.2 铅暴露对海马神经元突触传递功能的影响 | 第34-35页 |
2.2.3 铅暴露对海马神经元兴奋性突触与抑制性突触数目的影响 | 第35-36页 |
2.2.4 铅暴露对抑制性突触GABA合成酶GAD65的影响 | 第36-37页 |
2.2.5 铅暴露对抑制性突触GABA_A受体的影响 | 第37-38页 |
2.3 讨论 | 第38-41页 |
第三章 EGCG对铅暴露大鼠突触形成损伤的修复作用 | 第41-57页 |
3.1 材料与方法 | 第41-48页 |
3.1.1 主要仪器 | 第41页 |
3.1.2 药物及试剂 | 第41页 |
3.1.3 实验动物 | 第41页 |
3.1.4 海马组织铅含量测定 | 第41-42页 |
3.1.5 Golgi-cox染色,树突棘形态分析 | 第42页 |
3.1.6 Western Blot检测相关蛋白的表达 | 第42-43页 |
3.1.6.1 主要仪器,主要试剂和药品(同第二部分) | 第42-43页 |
3.1.6.2 主要抗体 | 第43页 |
3.1.6.3 Western Blot蛋白定量分析(同第二部分) | 第43页 |
3.1.7 RT-PCR表达检测 | 第43-46页 |
3.1.7.1 材料 | 第43页 |
3.1.7.2 海马组织中总量RNA的提取 | 第43-44页 |
3.1.7.3 RNA浓度的测定 | 第44页 |
3.1.7.4 反转录 | 第44页 |
3.1.7.5 引物设计 | 第44-45页 |
3.1.7.6 缓冲液配制 | 第45页 |
3.1.7.7 琼脂糖凝胶配制 | 第45页 |
3.1.7.8 RT-PCR检测 | 第45-46页 |
3.1.8 海马神经元培养(同第二章) | 第46-48页 |
3.1.9 统计学分析 | 第48页 |
3.2 实验结果 | 第48-55页 |
3.2.1 大鼠海马组织铅含量测定 | 第48-49页 |
3.2.2 铅暴露和EGCG对树突棘密度的影响 | 第49-50页 |
3.2.3 铅暴露和EGCG对树突棘头部形态的影响 | 第50页 |
3.2.4 铅暴露和EGCG对Wnt7a蛋白表达水平的影响 | 第50-51页 |
3.2.5 铅暴露和EGCG对Wnt7a mRNA水平的影响 | 第51-52页 |
3.2.6 铅暴露和EGCG对Wnt通路β-catenin磷酸化水平的影响 | 第52-53页 |
3.2.7 EGCG对铅暴露海马神经元Wnt7a和β-catenin的影响 | 第53-54页 |
3.2.8 铅暴露海马神经元转染Wnt7ashRNA,EGCG对树突棘的影响 | 第54-55页 |
3.3 讨论 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-66页 |
攻读硕士学位期间的学术活动及成果情况 | 第66-67页 |