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酒精诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡过程中自噬的研究

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
引言第9-12页
1 实验材料、试剂和仪器第12-17页
    1.1 细胞株第12页
    1.2 主要仪器设备第12-13页
    1.3 主要试剂与实验材料第13-14页
    1.4 主要试剂配制方法第14-17页
        1.4.1 细胞培养基第14页
        1.4.2 磷酸盐缓冲液(PBS)第14页
        1.4.3 MTT工作液第14页
        1.4.4 30% Acr-Bis第14页
        1.4.5 分离胶缓冲液第14页
        1.4.6 浓缩胶缓冲液第14-15页
        1.4.7 1.0 mol/L Tris·HCl,pH 7.5第15页
        1.4.8 10% SDS第15页
        1.4.9 2×转移电泳缓冲液第15页
        1.4.10 10×电泳缓冲液第15页
        1.4.11 10×TBS缓冲液第15页
        1.4.12 TBST缓冲液第15页
        1.4.13 Epon812树脂第15-17页
2 实验方法第17-21页
    2.1 MTT法检测细胞生存率第17页
    2.2 DAPI染色检测细胞凋亡第17页
    2.3 间接免疫荧光检测LC3与p62的表达及定位第17-18页
    2.4 透射电镜观察自噬体形态学特征第18页
    2.5 Western-Blot检测LC3与p62蛋白表达量第18-20页
        2.5.1 蛋白样品的制备和定量第18-19页
        2.5.2 SDS-PAGE及转移电泳第19-20页
        2.5.3 抗体杂交和发光检测第20页
    2.6 统计学方法第20-21页
3 结果第21-33页
    3.1 酒精对SMMC-7721细胞生存率的影响第21-22页
    3.2 酒精诱导SMMC-7721细胞凋亡第22-23页
    3.3 自噬体的超微结构第23页
    3.4 间接免疫荧光法观察酒精对SMMC-7721细胞LC3的影响第23-24页
    3.5 间接免疫荧光法观察酒精对SMMC-7721细胞p62的影响第24页
    3.6 SMMC-7721细胞中LC3与p62的共定位第24-25页
    3.7 Western-Blot法检测酒精对SMMC-7721细胞LC3的影响第25-28页
    3.8 Western-Blot法检测酒精对SMMC-7721细胞p62的影响第28-33页
4 讨论第33-35页
5 结论第35-37页
参考文献第37-41页
文献综述第41-67页
    参考文献第55-67页
附录A 英文缩略词表第67-69页
致谢第69-71页
攻读学位期间发表的学术论文第71-72页

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