| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 引言 | 第9-12页 |
| 1 实验材料、试剂和仪器 | 第12-17页 |
| 1.1 细胞株 | 第12页 |
| 1.2 主要仪器设备 | 第12-13页 |
| 1.3 主要试剂与实验材料 | 第13-14页 |
| 1.4 主要试剂配制方法 | 第14-17页 |
| 1.4.1 细胞培养基 | 第14页 |
| 1.4.2 磷酸盐缓冲液（PBS） | 第14页 |
| 1.4.3 MTT工作液 | 第14页 |
| 1.4.4 30% Acr-Bis | 第14页 |
| 1.4.5 分离胶缓冲液 | 第14页 |
| 1.4.6 浓缩胶缓冲液 | 第14-15页 |
| 1.4.7 1.0 mol/L Tris·HCl，pH 7.5 | 第15页 |
| 1.4.8 10% SDS | 第15页 |
| 1.4.9 2×转移电泳缓冲液 | 第15页 |
| 1.4.10 10×电泳缓冲液 | 第15页 |
| 1.4.11 10×TBS缓冲液 | 第15页 |
| 1.4.12 TBST缓冲液 | 第15页 |
| 1.4.13 Epon812树脂 | 第15-17页 |
| 2 实验方法 | 第17-21页 |
| 2.1 MTT法检测细胞生存率 | 第17页 |
| 2.2 DAPI染色检测细胞凋亡 | 第17页 |
| 2.3 间接免疫荧光检测LC3与p62的表达及定位 | 第17-18页 |
| 2.4 透射电镜观察自噬体形态学特征 | 第18页 |
| 2.5 Western-Blot检测LC3与p62蛋白表达量 | 第18-20页 |
| 2.5.1 蛋白样品的制备和定量 | 第18-19页 |
| 2.5.2 SDS-PAGE及转移电泳 | 第19-20页 |
| 2.5.3 抗体杂交和发光检测 | 第20页 |
| 2.6 统计学方法 | 第20-21页 |
| 3 结果 | 第21-33页 |
| 3.1 酒精对SMMC-7721细胞生存率的影响 | 第21-22页 |
| 3.2 酒精诱导SMMC-7721细胞凋亡 | 第22-23页 |
| 3.3 自噬体的超微结构 | 第23页 |
| 3.4 间接免疫荧光法观察酒精对SMMC-7721细胞LC3的影响 | 第23-24页 |
| 3.5 间接免疫荧光法观察酒精对SMMC-7721细胞p62的影响 | 第24页 |
| 3.6 SMMC-7721细胞中LC3与p62的共定位 | 第24-25页 |
| 3.7 Western-Blot法检测酒精对SMMC-7721细胞LC3的影响 | 第25-28页 |
| 3.8 Western-Blot法检测酒精对SMMC-7721细胞p62的影响 | 第28-33页 |
| 4 讨论 | 第33-35页 |
| 5 结论 | 第35-37页 |
| 参考文献 | 第37-41页 |
| 文献综述 | 第41-67页 |
| 参考文献 | 第55-67页 |
| 附录A 英文缩略词表 | 第67-69页 |
| 致谢 | 第69-71页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第71-72页 |
