| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 中英缩略词对照 | 第9-12页 |
| 第1章 引言 | 第12-15页 |
| 第2章 材料和方法 | 第15-31页 |
| ·材料 | 第15-17页 |
| ·细胞株和菌株 | 第15页 |
| ·主要仪器 | 第15-16页 |
| ·主要试剂 | 第16页 |
| ·主要试剂配制 | 第16-17页 |
| ·方法 | 第17-31页 |
| ·K562、HL60细胞培养 | 第17页 |
| ·微基因pcDNA3.1(-)-bcl-x构建策略 | 第17-18页 |
| ·K562细胞基因组DNA的提取 | 第18-19页 |
| ·目的片段(P1P2、P3P4)的体外扩增及DNA片段胶回收 | 第19-20页 |
| ·质粒pcDNA3.1(-)和P1P2的双酶切(XbaⅠ,XhoⅠ)反应,DNA片段回收及T4连接反应 | 第20-22页 |
| ·将连接产物pcDNA3.1(-)-P1P2转化大肠杆菌DH5α | 第22页 |
| ·质粒pcDNA3.1(-)-P1P2和片段P3P4双酶切(XhoⅠ,EcoRⅠ)反应,DNA片段回收及T4连接反应 | 第22-24页 |
| ·双酶切及测序鉴定bcl-x微基因:pcDNA3.1(-)-bcl-x | 第24-25页 |
| ·微基因pcDNA3.1(-)-bcl-x突变体的构建:pcDNA3.1(-)-bcl-x-CRCE1(M)、pcDNA3.1(-)-bcl-x-CRCE2(M)、pcDNA3.1(-)-bcl-x-B2G(M) | 第25-28页 |
| ·bcl-x微基因及其突变微基因脂质体转染HL60细胞 | 第28页 |
| ·RT-PCR检测微基因及其突变微基因转染后bcl-xL/bcl-xSmRNA比值 | 第28-31页 |
| 第3章 结果 | 第31-40页 |
| ·目的片段(P1P2、P3P4)的体外扩增及DNA片段胶回收 | 第31-32页 |
| ·pcDNA3.1(-)-P1P2双酶切(XbaⅠ,XhoⅠ)琼脂糖凝胶电泳 | 第32页 |
| ·pcDNA3.1(-)-P1P2-P3P4即pcDNA3.1(-)-bcl-x双酶切鉴定电泳 | 第32-33页 |
| ·pcDNA3.1(-)-bcl-x测序图 | 第33-36页 |
| ·突变微基因pcDNA3.1(-)-bcl-x-CRCE1(M)的EcoRⅠ单酶切及测序鉴定 | 第36-37页 |
| ·pcDNA3.1(-)-bcl-x-CRCE2(M)EcoRⅠ单酶切和pcDNA3.1(-)-bcl-x-B2G(M)XbaⅠ、EcoRⅠ)双酶切电泳及测序鉴定 | 第37-38页 |
| ·RT-PCR鉴定微基因pcDNA3.1(-)-bcl-x、pcDNA3.1(-)-bcl-x-B2G(M)、pcDNA3.1(-)-bcl-x-CRCE2(M)、pcDNA3.1(-)-bcl-x-CRCE2(M)在HL-60细胞中转录情况 | 第38-40页 |
| 第4章 讨论 | 第40-43页 |
| 第5章 结论 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-48页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第48-49页 |
| 附带综述 | 第49-55页 |
