| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-17页 |
| ·Hira基因的的研究概况 | 第10-14页 |
| ·Hira的结构域特点及功能 | 第10-11页 |
| ·Hira基因在多种生物体中的研究情况 | 第11-14页 |
| ·Hira基因功能的概况 | 第14页 |
| ·鱼类雌核发育研究概况 | 第14-16页 |
| ·本研究的内容、目的及意义 | 第16-17页 |
| 第2章 萍乡红鲫Hira基因cDNA全序列克隆与组织特异性表达研究 | 第17-48页 |
| ·材料与方法 | 第17-26页 |
| ·实验材料采集 | 第17页 |
| ·引物设计 | 第17-18页 |
| ·萍乡红鲫总RNA的提取 | 第18-19页 |
| ·RNA的检测 | 第19页 |
| ·SMART cDNA的合成 | 第19-20页 |
| ·Hira基因cDNA中间序列克隆 | 第20-23页 |
| ·RACE-PCR扩增Hira基因cDNA全长 | 第23-24页 |
| ·Hira cDNA序列拼接、验证及同源性分析 | 第24-25页 |
| ·荧光定量PCR检测萍乡红鲫不同组织Hira基因表达 | 第25-26页 |
| ·结果与分析 | 第26-46页 |
| ·总RNA的提取 | 第26页 |
| ·Hira基因序列全长的克隆 | 第26-28页 |
| ·萍乡红鲫Hira基因序列全长基本分析 | 第28-31页 |
| ·萍乡红鲫Hira序列的生物信息学分析 | 第31-42页 |
| ·荧光定量PCR检测萍乡红鲫Hira基因组织表达特征 | 第42-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 第3章 萍乡红鲫Hira基因蛋白表达与多克隆抗体制备 | 第48-63页 |
| ·材料与方法 | 第48-55页 |
| ·蛋白表达所用引物的设计 | 第48-49页 |
| ·表达片段PCR扩增 | 第49页 |
| ·PCR产物切胶回收 | 第49页 |
| ·萍乡红鲫pEASY-El-HIRA重组质粒的构建与鉴定 | 第49-51页 |
| ·重组质粒的诱导与表达 | 第51页 |
| ·亲和层析纯化表达的蛋白 | 第51-53页 |
| ·紫外吸收差法测定蛋白质浓度 | 第53-54页 |
| ·多克隆抗体制备 | 第54页 |
| ·ELISA检测多克隆抗体效价 | 第54-55页 |
| ·结果 | 第55-61页 |
| ·目的表达片段PCR扩增结果 | 第55-56页 |
| ·PCR产物回收结果 | 第56页 |
| ·pEASY-El-HIRA重组质粒的双酶切鉴定 | 第56-57页 |
| ·目的蛋白的诱导表达 | 第57-58页 |
| ·HIRA融合蛋白的分析与纯化 | 第58-59页 |
| ·HIRA融合蛋白的浓度测定 | 第59-60页 |
| ·ELISA间接法测定多克隆抗体效价 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-63页 |
| 第4章 结论与展望 | 第63-64页 |
| ·结论 | 第63页 |
| ·进一步工作的方向 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-70页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第70页 |
